Пробиотик ФС
споровых бактерий
поликомпонентный,
таблетки Вводится впервые
__________________________________________________________________
Настоящая фармакопейная статья распространяется на биотехнологический лекарственный препарат (БтЛП), пробиотик споровых бактерий поликомпонентный, таблетки. Активным компонентом пробиотика является биомасса живых антагонистически активных штаммов бактерий Bacillus subtilis 3 и Bacillus licheniformis 31. В одной дозе препарата должно содержаться Bacillus subtilis 3 от 1ˑ109 до 8ˑ109 и Bacillus licheniformis 31 от 0,1ˑ109 до 2ˑ109 КОЕ споровых бактерий.
ПРОИЗВОДСТВО
Основные этапы производства препарата:
- получение биомассы производственных штаммов бактерий Bacillus subtilis 3 и Bacillus licheniformis 31 (выращивание/культивирование на оптимальной питательной среде в соответствующих условиях культивирования);
- подготовка биомассы и основы перед формованием (прессованием) таблеток (лиофилизация с последующим измельчением);
- получение готовой лекарственной формы препарата – таблетки: - добавление в биомассу споровых бактерий вспомогательных веществ; - спрессовывание таблеток; - герметизация и маркировка.
Используемые в процессе производства производственные штаммы должны быть охарактеризованы в объеме в соответствие с требованиями, изложенными в ОФС «Споровые пробиотики», испытания проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».
При производстве пробиотика споровых бактерий поликомпонентного, таблетки, проводят валидацию технологического процесса и методов контроля в соответствии с требованиями правил организации производства и контроля качества БтЛП. Стадии производственного процесса получения пробиотика споровых бактерий поликомпонентного, таблетки должны быть охарактеризованы в соответствии с требованиями, изложенными в ОФС «Пробиотики» и ОФС «Споровые пробиотики».
ИСПЫТАНИЯ
Описание. Таблетки беловато-серого до бежевого цвета, допускается «мраморность» окраски, имеют круглую форму с плоскими или слегка выпуклыми поверхностями, диаметром 6, 9 или 12 мм, со специфическим запахом. Определение проводят органолептически.
Подлинность. В мазках, окрашенных по Цилю-Нильсену, должны присутствовать вегетативные клетки синего цвета и розовые споры. Испытание проводят микроскопически в соответствии с ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».
Подлинность подтверждается специфической активностью (раздел «Специфическая активность»).
Время распадаемости. Не более 20 мин. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость таблеток и капсул».
Потеря в массе при высушивании. Не более 4,5%. Определение проводят гравиметрическим методом в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или другим валидированным методом.
Средняя масса и отклонение от средней массы. Нормативные требования должны быть указаны в нормативной документации производителя. Определение проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм».
Специфическая безвредность. Препарат должен быть безвреден для белых мышей при пероральном введении одной таблетки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo». Тест доза испытуемого препарата содержится в объеме 0,5 мл на животное.
Отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов (микробиологическая чистота). Категория 5.3.Б:
В 1 таблетке допускается не более 50 КОЕ аэробных бактерий. Бактерии семейства Enterobacteriaceae, бактерии рода Proteus, гемолитические бактерии, дрожжевые и плесневые грибы должны отсутствовать.
Определение на отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» методом прямого посева.
Специфическая активность. В одной дозе препарата должно содержаться Bacillus subtilis 3 от 1ˑ109 до 8ˑ109 КОЕ и Bacillus licheniformis 31 от 0,1ˑ109 до 2ˑ109 КОЕ споровых бактерий, показатели антагонистической активности должены быть не ниже: Shigella sonnei и Salmonella typhimurium – 10 мм, Staphylococcus aureus - 15 мм, Candida albicans – 12 мм. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков».
Определение количества живых бактериальных клеток в 1 дозе проводят методом последовательных десятикратных разведений в 0,9 % растворе натрия хлорида с последующим высевом на среду Гаузе № 2. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков» (метод Коха).
Показатели антагонистической активности определяют методом отсроченного антагонизма на среде Гаузе №2, выражая в миллиметрах зоны задержки роста тест-штаммов S. sonnei 5063, S. typhimurium 55, S. aureus ATCC 6538-Р и Candida albicans ATCC 10231 или C. albicans NCTC 885-653.
Производственные штаммы и штаммы для контроля. Производственные штаммы бактерий Bacillus subtilis 3(ВКПМ В-2335) и Bacillus licheniformis 31 (ВКПМ В-2336) депонированы в ВНИИ Генетика Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (Россия).
Производственные штамм бактерий Bacillus subtilis 3 и Bacillus licheniformis 31 по биологическим и биохимических свойствам должны соответствовать требованиям ОФС «Споровые пробиотики». Испытания проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков», ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo», ОФС «Определение специфической активности пробиотиков», ОФС «Микробиологическая чистота».
Используемые для контроля штаммы бактерий депонированы в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов, Россия (ГКПМ): Shigella sonnei 5063 (депозит № 000); Salmonella typhimurium 55 (депозит № 000); Staphylococcus aureus FDA 209-Р или ATCC 6538-Р (депозит № 000); Candida albicans ATCC 10231 (депозит № 000) или C. albicans NCTC 885-653 (депозит № 000). Тест-штаммы должны соответствовать требованиям ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».
Контроль качества производственных пробиотических штаммов и штаммов для контроля пробиотиков проводится не реже 1 раза в год.
Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».
Транспортирование и хранение. При температуре от 2 до 8 оС в соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».
