ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Лактобактерин, лиофилизат                 Вводится взамен

для приготовления суспензии для  ФС 42-3256-96

приема внутрь и местного применения

Настоящая фармакопейная статья распространяется на биотехнологический лекарственный препарат (БтЛП), лактосодержащий пробиотик - лактобактерин, лиофилизат для приготовления суспензии для приема внутрь и местного применения.

Лактобактерин  – представляет собой биомассу живого антагонистически активного штамма бактерий Lactobacillus plantarum 8Р-А3 или L. fermentum 90Т-С4, лиофилизированную в среде культивирования с добавлением защитной среды высушивания (сахарозо-желатино-молочной). В одной  дозе препарата должно содержаться не менее 2х109 КОЕ лактобактерий.

ПРОИЗВОДСТВО

Производство лактобактерина основано на выращивании/культивировании производственного штамма бактерий Lactobacillus plantarum 8Р-А3 или L. fermentum 90Т-С4 на оптимальной питательной среде в соответствующих условиях культивирования с последующей лиофилизацией биомассы в защитной среде. Используемые в процессе производства производственные штаммы должны быть охарактеризованы в объеме в соответствие с требованиями, изложенными в ОФС «Лактосодержащие пробиотики», испытания проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».

При производстве лактобактерина проводят валидацию технологического процесса и методов контроля в соответствии с требованиями правил организации производства и контроля качества БтЛП. Стадии производственного процесса получения лактобактерина должны быть охарактеризованы в соответствии с требованиями, изложенными в ОФС «Пробиотики».

ИСПЫТАНИЯ

Описание. Кристаллическая или пористая масса желтовато-бежевого или беловато-серого цвета различной интенсивности. Имеет специфический запах.

Подлинность. В мазках, окрашенных по Граму, должны присутствовать грамположительные прямые палочки длиной от 0,7 до 3,0 мкм, располагающиеся беспорядочными скоплениями или скоплений в отдельными короткими цепочками. Испытание проводят микроскопически в соответствии с ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».

Подтверждается специфической активностью (см. раздел «Специфическая активность»).

Время восстановления препарата. Не более 5 мин. При добавлении во флакон с препаратом из расчета 1 мл на 1 дозу 0,9 % раствора натрия хлорида, содержимое в течение 5 мин должно полностью диспергироваться с образованием гомогенной непрозрачной суспензии желтовато-бежевого или беловато-серого цвета..

Испытание проводят визуально в соответствии с ОФС «Пробиотики».

рН. От 4,5 до 6,0. Испытание проводят после восстановления препарата, согласно разделу «Время восстановления препарата» потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия».

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,5 %. Определение проводят гравиметрическим методом в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или другим валидированным методом.

Специфическая безвредность. Препарат должен быть безвреден для белых мышей при пероральном введении одной дозы. Определение проводят в соответствии с ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo».

Отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов (микробиологическая чистота).  Категория 5.3.А:

    Бактерии - контаминанты должны отсутствовать (флак.); дрожжевые и плесневые грибы должны отсутствовать (флак.).

В мазках, приготовленных из восстановленных испытуемых образцов и окрашенных по Граму должны быть только характерные для препарата грамположительные прямые палочки длиной от 0,7 до 3,0 мкм, располагающиеся беспорядочными скоплениями или скоплений в отдельными короткими цепочками..

Определение на отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» методом прямого посева.

Специфическая активность. В одной дозе препарата должно содержаться не менее  2х109 КОЕ лактобактерий, показатель активности кислотообразования должен быть не ниже 200 оТ. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков».

Определение количества живых бактериальных клеток в 1 дозе проводят методом серийных разведений в 0,9 % растворе натрия хлорида с последующим высевом на среду МРC-4. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков» (метод Коха).

Показатель активности кислотообразования определяют методом кислотно-основного титрования, для выращивания лактобактерий используют среду МРC-1.

Производственные штаммы и штаммы для контроля. Производственные штаммы бактерий Lactobacillus plantarum 8Р-А (ГКПМ № 000) и L. fermentum 90Т-С4 (ГКПМ № 000) депонированы в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов, (Россия).

Производственные штаммы бактерий L. plantarum 8Р-А и L. fermentum 90Т-С4 по биологическим и биохимических свойствам должны соответствовать требованиям ОФС «Лактосодержащие пробиотики».  Испытания  проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков», ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo», ОФС «Определение специфической активности пробиотиков», ОФС «Микробиологическая чистота».

Используемые для контроля штаммы бактерий  депонированы в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов, Россия (ГКПМ): Shigella sonnei 5063 (депозит № 000); S. flexneri 337 (депозит № 000), 170 (депозит № 000); Escherichia. coli 0157 (депозит № 000); Proteus mirabilis H-237 (депозит № 000), P. vulgaris 177 (депозит № 000); Staphylococcus aureus 209 (депозит № 000). Тест-штаммы должны соответствовать требованиям ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».

Контроль качества производственных пробиотических штаммов и штаммов для контроля пробиотиков проводится не реже 1 раза в год.

Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».

Транспортирование и хранение. При температуре от 2 до 8 оС  в соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».