Основа селективной среды для Aeromonas hydrophila

RS Medium Base Основа селективной среды для Aeromonas hydrophila

M576

Этот агар с селективной добавкой (новобиоцином) используют для селективного выделения, культивирования и предварительной идентификации  Aeromonas hydrophila.

Состав**:
Ингредиенты	грамм/литр
Дрожжевой экстракт Мальтоза L-Цистеина гидрохлорид L-Лизина гидрохлорид L-Орнитина гидрохлорид Натрия тиосульфат Железа аммонийного цитрат Натрия дезоксихолат Натрия хлорид Бромтимоловый синий Агар-агар Конечное значение рН (при 25єС) 7,0 ± 0,2	3,00 3,50 0,30 5,00 6,50 6,80 0,80 1,00 5,00 0,03 13,50

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 45,43 г порошка в 990 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ. Остудить до 45-50єС и асептично добавить растворенное в воде содержимое 1 флакончика с добавкой FD096. Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Агар разработан Rimler и Shotts (1) и основан на прописях ксилозо-лизиновых агаров (2, 3). Его используют для селективного выделения и предварительной идентификации  Aeromonas hydrophila и других грамотрицательных бактерий по таким свойствам, как декарбоксилирование лизина и орнитина, ферментации мальтозы и образование сероводорода (4). Дрожжевой экстракт является источником питательных веществ. Натрия тиосульфат, L-цистеина гидрохлорид и железа аммонийного цитрат являются индикатором продукции сероводорода. Ферментацию мальтозы определяют по цвету индикатора бромтимолового синего. Дезоксихолат натрия и новобиоцин подавляют рост грамположительных бактерий и вибрионов.

Хотя представители вида Citrobacter freundii обычно образуют сероводород, иногда встречаются сероводородотрицательные штаммы. Результаты учитывают через 24 ч, так как через 26 ч начинается постепенное восстановление цвета после ферментации мальтозы (с желтого на первоначальный зеленый). Среду следует инкубировать именно при 35єС, так как при других температурах Aeromonas salmonicida может давать ложноположительную реакцию. Для исключения принадлежности культур к цитробактерам желтые колонии (сероводородположительные с черным центром или без него) следует проверить на наличие оксидазы. В течение 24 ч на этой среде подавляется рост Proteus mirabilis.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-зеленый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,35%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет темно-зеленую окраску, прозрачна, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25єС водный раствор (4,54% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч  при 35єС.

Штаммы микроорганизмов (АТСС) Aeromonas hydrophila  (7966) Citrobacter freundii (8090) Salmonella typhi (6539) Proteus vulgaris (13315) Escherichia coli (25922)

Мальтоза + – + + –

Лизин/Орнитин  (декарбоксилирование) – V – – V

Сероводород – + – + –

Примечания: Ферментация мальтозы + = желтый цвет колоний

Декарбоксилирование лизина и/или орнитина = зеленовато-желтый или желтый оттенок

Образование сероводорода = черный центр колонии

V = вариабельный результат.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25єС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8єС.