Пробиотик  лактобактерий        ФС

монокомпонентный, 

суппозитории вагинальные  Взамен  ФС 42-3950-00

__________________________________________________________________

Настоящая фармакопейная статья распространяется на биотехнологический лекарственный препарат (БтЛП), пробиотик лактобактерий монокомпонентный, суппозитории вагинальные. Активным компонентом пробиотика является биомасса живого антагонистически активного штамма бактерий Lactobacillus plantarum 8Р-А3 или Lactobacillus fermentum 90Т-С4. В одном суппозитории (дозе) препарата должно содержаться не менее 107 КОЕ лактобактерий.

ПРОИЗВОДСТВО

Основные этапы производства препарата:

- получение биомассы производственного штамма бактерий Lactobacillus plantarum 8Р-А3 или Lactobacillus fermentum 90Т-С4 (выращивание/культивирование на оптимальной питательной среде в соответствующих условиях культивирования);

- подготовка биомассы и основы перед формированием суппозиториев (лиофилизация с последующим измельчением или концентрирование биомассы лактобактерий);

- получение готовой лекарственной формы препарата - суппозитории вагинальные на липофильной основе (формирование суппозиторной массы и ее розлив в контурную ячейковую упаковку - герметизация и маркировка). Масса суппозитория в зависимости от технологии производства от 1,1 до 2,0 г.

Используемые в процессе производства производственные штаммы должны быть охарактеризованы в объеме в соответствие с требованиями, изложенными в ОФС «Лактосодержащие пробиотики», испытания проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».

При производстве лактобактерий монокомпонентных, суппозиторий вагинальных проводят валидацию технологического процесса и методов контроля в соответствии с требованиями правил организации производства и контроля качества БтЛП. Стадии производственного процесса получения лактобактерий монокомпонентных, суппозиторий вагинальных должны быть охарактеризованы в соответствии с требованиями, изложенными в ОФС «Пробиотики».

ИСПЫТАНИЯ

Описание. Суппозитории от белого до светло-бежевого цвета, торпедовидной или цилиндрической формы; допускается неоднородность цвета в виде вкраплений или «мраморности». Определение проводят визуально.

Подлинность. В мазках, окрашенных по Граму, должны присутствовать грамположительные прямые палочки длиной от 0,7 до 3,0 мкм, располагающиеся беспорядочными скоплениями или отдельными короткими цепочками. Испытание проводят микроскопически в соответствии с ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».

Подтверждается специфической активностью (см. раздел «Специфическая активность»).

Время полной деформации. Не более 20 мин. Один суппозиторий помещают в коническую колбу вместимостью100 мл и добавляют 50 мл воды, прогретой до температуры (37±1) оС, колбу выдерживают в термостате при температуре (37±1) °С, время полной деформации не должно превышать 20 мин.

Средняя масса и отклонение от средней массы. Масса суппозиториев от 1,1 до 2,0 г. Отклонение от средней массы внутри одной серии:

18/20 - не более ±5 %,

2/20 - не более ±7,5 %.

Суппозиториев взвешивают с точностью до 0,01 г. Определение проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозирования лекарственных форм».

Специфическая безвредность. Препарат должен быть безвреден для белых мышей при пероральном введении одного суппозитория (дозы).

Определение проводят в соответствии с ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo». Тест доза испытуемого препарата содержится в объеме 1 мл на животное.

Отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов (микробиологическая чистота).  Категория 5.3.Б:

В 1 суппозитории (1 доза) допускается не более 102 КОЕ аэробных бактерий. Бактерии семейства Enterobacteriaceae, бактерии рода Proteus, гемолитические бактерии, дрожжевые и плесневые грибы должны отсутствовать.

Определение на отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» методом прямого посева.

Специфическая активность. В одном суппозитории (дозе) препарата должно содержаться не менее 107  КОЕ лактобактерий, показатель активности кислотообразования должен быть не ниже 200 оТ. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков».

Определение количества живых бактериальных клеток в 1 суппозитории (дозе) проводят методом последовательных десятикратных разведений в 0,9 % растворе натрия хлорида с последующим высевом в полужидкую среду МРC-2.  Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков»  (Пробирочный метод учета колоний в полужидкой среде).

Показатель активности кислотообразования определяют методом кислотно-основного титрования (титриметрический метод), для выращивания лактобактерий используют среду МРC-1.

Производственные штаммы и штаммы для контроля. Производственные штаммы бактерий Lactobacillus plantarum 8Р-А (ГКПМ № 000) и L. fermentum 90Т-С4 (ГКПМ № 000) депонированы в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов, (Россия).

Производственные штаммы бактерий L. plantarum 8Р-А и L. fermentum 90Т-С4 по биологическим и биохимических свойствам должны соответствовать требованиям ОФС «Лактосодержащие пробиотики». Испытания проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков», ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo», ОФС «Определение специфической активности пробиотиков», ОФС «Микробиологическая чистота».

Используемые для контроля штаммы бактерий  депонированы в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов, Россия (ГКПМ): Shigella sonnei 5063 (депозит № 000 или 233043); S. flexneri 337 (депозит № 000 или 232152), 170 (депозит № 000или 232151); Escherichia. coli 157 (депозит № 000 или 240329); Proteus mirabilis H-237 (депозит  № 000 или 160120), P. vulgaris 177 (депозит № 000 или 160153); Staphylococcus aureus 209-Р FDA = 6538-Р ATCC (депозит № 000 или 201108). Тест-штаммы должны соответствовать требованиям ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».

Контроль качества производственных пробиотических штаммов и штаммов для контроля пробиотиков проводится не реже 1 раза в год.

Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».

Транспортирование и хранение. При температуре от 2 до 8 оС в соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».