Mycoplasma Agar / Broth Base Агар Микоплазма / Основа Бульона Микоплазма | M266 / M267 / M268 |
Эти среды с обогащающей добавкой используют для выделения и культивирования микоплазм (PPLO).
Состав**: |
Ингредиенты | М266 грамм/литр | М267 грамм/литр | М268 грамм/литр |
Настой говяжьего сердца Пептический перевар животной ткани Натрия хлорид Кристаллический фиолетовый Агар-агар Конечное значение рН (при 25єС) 7,8 ± 0,2 | 250,00 10,00 5,00 – 15,00 | 250,00 10,00 5,00 – – | 250,00 10,00 5,00 0,01 – |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление: |
Размешать 36,0 г порошка М266 или 21,0 г порошков М267 или M268 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить до полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121єС) в течение 15 мин. Остудить до 45єС и асептично добавить 1% стерильной лошадиной сыворотки (FD074) и добавку Mycoplasma Supplement (FD075). Перед розливом среду тщательно перемешать. Для среды М268, помимо добавок FD074 и FD075, ввести 2,85 мл 1%-ного раствора теллурита калия (FD052). Вместо лошадиной сыворотки можно использовать асцитическую жидкость.
Принцип и оценка результата: |
Эти среды разработаны Morton и соавт. (1) и используются для выделения микоплазм из клинического материала (мокроты и др.), а также из смешанных культур. Компоненты среды и все добавки, используемые для культивирования микоплазм, не должны содержать токсических веществ, даже в малых количествах. Для хорошего роста многие микоплазмы нуждаются в добавлении сыворотки крови, а также присутствии антибиотика, препятствующего росту сопутствующих микроорганизмов. Кристаллический фиолетовый и теллурит калия подавляют рост многих грамположительных и грамотрицательных бактерий. Большинство видов микоплазм относятся к аэробам или факультативным анаэробам, но некоторые являются микроаэрофилами. Немногие микоплазмы являются анаэробными сапрофитами, которые лучше всего растут в диапазоне 22-35єС, патогенные штаммы – при 35єС. При росте на агаре микоплазмы образуют характерные колонии, врастающие в среду.
Чашки или пробирки со средой рекомендуется инкубировать в атмосфере 5-10% углекислого газа и учитывать результаты через 48 ч, а в случае отсутствия роста – в течение 3 недель.
Контроль качества: |
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М266).
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель.
Кислотность среды:
При 25єС водные растворы М266 (3,6% вес/об), М267 или М268 (2,1% вес/об) имеют рН 7,8 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35єС в атмосфере 10% углекислого газа.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) Mycoplasma bovis (25523) Mycoplasma gallinarium (19708) Mycoplasma pneumoniae(15531) Streptococcus pneumoniae (6303) | Рост Хороший или обильный Хороший или обильный Хороший или обильный Хороший или обильный | Рост* Хороший или обильный Хороший или обильный Хороший или обильный Подавляется |
Примечания: * с добавками кристаллического фиолетового и теллурита калия.
Условия и сроки хранения: |
Порошок хранить при температуре ниже +25єС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8єС.
