Основа агара для теста на токсигенность коринебактерий
Diphtheria Virulence Agar Base (Modified)
Основа агара для определения токсигенности дифтерийных микроорганизмов (модифицированная)
| М882R
|
Эту среду используют для проверки токсигенности Corynebacterium diphtheriae.
Состав**:
Ингредиенты
| грамм/литр
| Вытяжка из мозга теленка
| 10,00
| Вытяжка из бычьего сердца
| 10,00
| Натрия хлорид
| 5,00
| Натрия карбонат
| 0,60
| Агар
| 10,00
| Конечное значение рН (при 25°С) 7,8 ± 0,2
| |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 35,6 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц и разлить по 17 мл. в соответствующие пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 110°С в течение 30 мин. Остудить до 45-50°С. Асептично добавить 3 мл лошадиной сыворотки (RM1239) или сыворотки КРС (Рекомендуется использовать свободную от бактерий и вирусов лощадиную сыворотку или сыворотку КРС) в каждую пробирку. Перемешать и быстро вылить в чашку Петри.
Принцип и оценка результата:
Эта среда предложена Hermann и соавт. (1) для получения обильного роста Corynebacterium diphtheriae. Илек (2) показал возможность использования техники диффузии в агаре для выявления дифтерийного токсина in vitro. Стандартизацию метода в сравнительных опытах на животных провел King и соавт. (3). Однако было показано, что сыворотки животных разных видов дают разные результаты, и Hermann и соавт. (1) разработали среду, на которой этого удается избежать. В соответствии с их предложением, среда обогащается 1 г кислотного гидролизата казеина, 1 мл глицерина и 1 мл твина-80 (4). После инкубирования токсигенных штаммов в среде образуется линия преципитата. Теллурит калия подавляет рост большинства грамотрицательных микроорганизмов и большинство представителей нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей, но не действует на дифтерийную палочку, а также Streptococcus mitis, Streptococcus salivarius, энтерококки и некоторые штаммы Staphylococcus epidermidis.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет янтарную окраску, слегка опалесцирует, когда в чашках Петри образуется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,75% вес/об) имеет рН 7,8 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-72 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
| Рост
| Линия преципитата
| Corynebacterium diphtheriae gravis
| Обильный
| +
| Corynebacterium diphtheriae intermedius
| Обильный
| +
| Corynebacterium diphtheriae mitis
| Обильный
| +
| Staphylococcus epidermidis (25923)
| Отсутствует или слабый
| –
| Bacillus subtilis (6633)
| Подавляется
| –
|
Ссылки:
1. Hermann, Moore and Parsons, 1958, Am. J. Clin. Path., 29:181.
2. Elek, 1948, Brit. Med. J., 1:493.
3. King, Frobisher and Parsons, 1949, Am. J. Pub. Health, 39:1314.
4. MacFaddin J. F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria. Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|
