Практическое занятие №28.

2. Тема: Патогенные грибы.

3. Цель: Изучить этиологию, эпидемиологию, патогенез, методы лабораторной диагностики, принципы профилактики и терапии основных микозов человека.

4. Вопросы для самоподготовки:

Значение грибов в жизнедеятельности человека. Ультраструктура грибной клетки. Таксономическое положение и систематика грибов. Морфологические свойства грибов. Особенности морфологии дрожжей и плесеней. Диморфизм. Этиология кандидозов. Основные виды возбудителей. Эпидемиология и патогенез кандидозов. Диагностика кандидозов. Этиология аспергиллезов. Основные виды возбудителей. Эпидемиология и патогенез аспергиллезов. Диагностика аспергиллезов. Возбудители глубоких эндемичных микозов (бластомикоз, гистоплазмоз), эпидемиология, диагностика, профилактика. Лечение микозов. Основные группы антимикотиков. Механизм действия препаратов.

5. Основные понятия темы:

Дрожжевые, плесневые и диморфные грибы. Роль диморфизма в патогенезе микозов. Возбудители оппортунистических микозов: Candida albicans, Candida tropicalis, Candida glabrata, Candida crusei, Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger.

Эпидемиология и патогенез кандидамикоза и аспергиллёза. Особенности течения кандозов. Роль дисбиоза в развитии очагового и иммунодефицита в развитии системного кандидамикоза и аспергиллеза.

Лабораторная диагностика микозов инфекций. Микологический метод: среды для культивирования грибов. Особенности видовой идентификации патогенных грибов: тест на ассимиляцию, микроскопическое выявление диморфизма.

Лечение и профилактика микозов: группы антимикотических препаратов и принципы их действия, особенности противогрибковой терапии.

6. Рекомендуемая литература:

, Медицинская микробиология, иммунология, вирусология. СПб., 1998. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. В 2-х т. / под ред. , . - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 480 с. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии: Учебное пособие для студентов медицинских вузов / Под ред. , – М.: Медицинское информационное агенство, 2003. – 236 с.

7. Самостоятельная работа студентов к занятию.

ПЛАН САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

1. Освоить микологический метод диагностики кандидозов (работа № 1).

2. Оценить результаты экспресс метода (генетического) диагностики бластомикоза (работа № 2).

3. Изучить основные группы препаратов антимикотиков (работа № 3).

САМОСТОЯТЕЛЬНЫЕ ПРАКТИЧЕСКИЕ РАБОТЫ

Работа  1. Провести микологический метод диагностики кандидоза.

Задача. У пациента диагностирован стоматит. Для установления этиологии заболевания проведено бактериоскопическое исследование мазка из ротовой полости и обнаружены дрожжевые клетки. Для подтверждения диагноза было проведено микологическое исследование. Оцените результат, оформите протокол и сделайте вывод.

Методика 2. Микологический метод диагностики кандидоза

Селективные среды для грибов: среда Сабуро, агар Никерсона (BiGGY-агар), кандида-агар. Тем не менее, для него существуют ограничения, присущие культуральным методам. Для диагностики необходимо культивировать посев не менее 1-2 недель при температуре 25-30С.

Оцените результаты. Оформите протокол.

ПРОТОКОЛ ИССЛЕДОВАНИЯ

Цель: …

Выделение чистой культуры

Идентификация чистой культуры

Исследуемый материал

Элективная среда для посева

Характеристика колоний

морфология

ферментативная активность

Наличие факторов вирулентности

Вывод (ответить на вопросы): Подтверждается ли диагноз кандидозного стоматита? На каком основании? Достаточно ли для диагностики кандидоза использовать микроскопический метод?

Работа  2. Оценить результаты экспресс метода диагностики бластомикоза.

Задача. В клинику обратился больной жалобами на недомогание, кашель с примесью крови. На рентгенограмме верхнедолевые очаговые инфильтраты. Поставлен диагноз «Пневмония». Туберкулиновая проба отрицательная. В анамнезе: находился на территории США (работа в сельской местности) в течение последних двух лет. Врач предположил бластомикоз. Была проведена ПЦР диагностика промывных вод бронхов. Оцените результат ПЦР-анализа, оформите протокол исследования, сделайте вывод.

Методика 1. Экспресс-диагностика бластомикоза с помощью ПЦР

ПЦР является исключительно высокочувствительным и быстрым методом диагностики в микробиологии и вирусологии, помогая выявлять хекультивируемые и труднокультивируемых возбудителей практически любых известных инфекций. Используя специфические праймеры, комплементарные определенным участкам ДНК. Blastomyces dermalitidis получают амликоны, детекцию которых проводят с помощью электрофореза в агарозном геле с флоресцентным красителем, связывающимся с нуклеиновыми кислотами.

Результат электрофореза продуктов ПЦР

Оцените результаты. Оформите протокол.

Протокол исследованиЯ

Цель:

Исследуемый материал

Метод диагностики

Обнаружение гена


Вывод: Подтверждается ли диагноз кандидозного стоматита? На каком основании? Что выявляется при положительной реакции ПЦР-анализа?

Работа  3

Цель: Изучить основные группы препаратов антимикотиков.

Протокол исследования:

Цель:


группа антимикотиков

механизм действия, эффект действия

примеры препаратов (названия)

1

2

3

4

5

6

7

8


ПИСЬМЕННЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

ВО ВНЕУЧЕБНОЕ ВРЕМЯ

В тетради для практических занятий ответить на вопросы:

Что такое диморфизм грибов? Приведите примеры грибов, возбудителей микозов человека, обладающие диморфизмом? Перечислите условия, приводящие к морфологической трансформации грибов?