Селенитовый бульон / Основа селенитового бульона / Бульон без селенита

Selenite Broth / Broth Base / without selenite Селенитовый бульон / Основа селенитового бульона / Бульон без селенита

M052A /  M970 / M1079

Эти среды рекомендуют в качестве сред обогащения для выделения сальмонелл из патологического материала, пищевых материалов при санитарно-микробиологических исследованиях.

Состав**:

Ингредиенты	М052А грамм/литр	М970 грамм/литр	М1079 грамм/литр
Гидролизат казеина Лактоза Натрия фосфат Натрия гидрофосфат Натрия гидроселенит L-Цистин Конечное значение рН (при 25єС) 7,0 ± 0,2	5,00 4,00 10,00 – 4,00 –	5,00 4,00 10,00 – – –	5,00 4,00 – 10,00 – 0,01

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 23,0 г порошка М052А в 1000 мл дистиллированной воды. Размешать 4,0 г порошка гидроселенита натрия в 1000 мл дистиллированной воды. Добавить 19,0 г порошка М970 или М1079. Тщательно перемешать. Подогреть для полного растворения частиц. Разлить в стерильные пробирки. Стерилизовать в кипящей водяной бане или струе пара в течение 10 мин. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ И НЕ ДОПУСКАТЬ ПЕРЕГРЕВАНИЯ СРЕДЫ. Если большое количество селенита восстановлено (это видно по выпадению красного преципитата на дне пробирки или флакона) среду не рекомендуется использовать.

Предупреждение: Гидроселенит натрия очень токсичен, обладает тератогенностью и вызывает коррозию, поэтому с ним надо обращаться очень осторожно. При попадании его на кожу следует промыть ее большим количеством воды.

Принцип и оценка результата:

Впервые ингибиторный эффект селенита был показан Klett (1), а Guth (2) использовал его для выделения возбудителя брюшного тифа. Лейфсон всесторонне изучил действие селенита и составил прописи сред. Жидкая селенитовая среда с цистином  является модификацией прописи Лейфсона (3), в которую введен цистин (4). Эта пропись соответствует рекомендуемой АОАС (5) для определения сальмонелл в пищевых материалах, в частности, яичных продуктах. Она рекомендована  также АРНА (6, 7, 8) и USP (9). Среды обогащения обычно используют для определения патогенных микроорганизмов, присутствующих в небольшом количестве, по сравнению с сопутствующей кишечной микрофлорой. Селенитовый бульон с цистином полезен для выделения сальмонелл в неострых стадиях заболеваний, у реконвалесцентов или при профилактических исследованиях, когда они представлены в материале небольшим количеством клеток (10).

Гидролизат казеина обеспечивает присутствие в среде необходимых питательных веществ. Лактоза поддерживает рН среды. Бактерии восстанавливают селенит, образуя щелочь. При повышении рН уменьшается токсичность селенита, что способствует росту сопутствующей флоры. Ферментация ее представителями лактозы приводит к образованию кислоты, которая снижает рН, тем самым обеспечивая селективные свойства среды. Фосфат натрия стабилизирует рН и также уменьшает токсичность селенита. L-Цистин способствует выделению сальмонелл. После обогащения в данном бульоне материал отсевают на такие дифференциальные среды, как Висмут-сульфитный агар (М027), Агар с бриллиантовым зеленым (М016), КЛД-агар (М031) и т. п. Не рекомендуется инкубировать бульон более 24 ч, т. к. через 6-12 ч инкубации селективная активность селенита снижается.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.

Кислотность среды:

При 25єС водные растворы М052А (2,3% вес/об) или М970/М1079 (1,9% вес/об, с 0,4% вес/об гидроселенита) имеют рН 7,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35єС.

Штаммы микроорганизмов (АТСС) Salmonella typhimurium (14028) Salmonella choleraesuis (12011) Salmonella typhi (6539) Escherichia coli (25922)

Накопление Хорошее или обильное Хорошее или обильное Хорошее или обильное Не размножаются

Цвет колоний * Бесцветные Бесцветные Бесцветные Белые или розовые с желчным преципитатом

Примечание: * = при субкультивировании на Агаре МакКонки (М081)

Ссылки:

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25єС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8єС.