Федеральное государственное казенное общеобразовательное учреждение
Московский кадетский корпус «Пансион воспитанниц МО РФ»
_________________________________________________________________
Получение аскорбиновой кислоты из игольчатых листьев ели
Автор:
,
воспитанницы 10 «Д» класса
Научный руководитель:
,
преподаватель химии
Москва 2017
Цели проектной работы:
1)получить аскорбиновую кислоту из игольчатых листьев ели
2)доказать экологическую значимость использования строительных и производственных отходов (игольчатых листьев хвойных) для получения альтернативного фармацевтического сырья
Задачи:
1)Провести литературный обзор по выбранной теме
2)Теоретически и практически ознакомиться с процессами получения аскорбиновой кислоты
3)Рассмотреть преимущества данного вида эксплуатации сырья с экономической и экологической точек зрения
4)Провести экспериментальную работу по получению аскорбиновой кислоты
5)Научиться обрабатывать результаты измерения и делать выводы на их основе
Гипотеза: из игольчатых листьев ели можно получить аскорбиновую кислоту; данный способ использования игольчатых листьев ели уменьшит уровень вреда, наносимого природе человеком в наше время
Вопросы проектной работы:
1)Процесс получения аскорбиновой кислоты из игольчатых листьев ели
2)Факторы, на которые влияет концентрация спирта в растворе
3)Определить практическую значимость проекта
Проблема: возможность использовать строительные и производственные отходы (в частности игольчатые листья хвойных) как альтернативный источник получения витаминов
Актуальность: использование данного вида сырья для химической продукции еще не распространено в фармацевтической промышленности
Практическая значимость: данная работа может быть использована как информационный материал при возобновлении применения данного способа эксплуатации хвои в промышленности
СОДЕРЖАНИЕ
Введение …………………………………………………….………... 4
ГЛАВА I. Литературный обзор
История обнаружения и изучения аскорбиновой кислоты……..5 Структура и свойства аскорбиновой кислоты……..…………….7 Получение аскорбиновой кислоты в промышленности………...8 Функции в организме..…………………………………………….9ГЛАВА II. Анализ статистический данных по использованию игольчатых листьев хвойных в промышленности
2.1 Основные данные по использованию хвои ели в промышленности..11
2.2 Экономическая и экологическая значимость………………………12
ГЛАВА III. Выполнение практической части
3.1 Определение аскорбиновой кислоты титриметрическим методом…13
3.1.1 Аппаратура, материалы и реактивы………………………….. 13
3.1.2 Приготовление экстрактов…………………………………….13
3.1.3 Процесс титрования…………………………………………..14
3.2 Обработка результатов. Расчеты……………………………….15
ЗАКЛЮЧЕНИЕ……………………………………………………………16
Ресурсы……………………………………………………………….17
Приложение………………………………………………………….17
ВВЕДЕНИЕ
В XXI веке витамины играют особую роль. Плохая экология, неправильное питание, стрессы и нарушение режима сна – эти и многие другие факторы имеют пагубное влияние на здоровье современного человека. Многие витамины необходимы организму для нормального функционирования, но не всегда имеется возможность получать их в достаточных количествах с пищей. В связи с этим, в наше время как никогда важную роль играют лекарственные средства и другие виды фармацевтической продукции. Одним из таких веществ является витамин C, также известный как аскорбиновая кислота.
Внешне аскорбиновая кислота (в твердом состоянии) мало чем отличается от многих других витаминов. Прозрачный порошок, хорошо растворимый в спирте и воде, но нерастворимый в жире. На вкус, как и следует ожидать от кислоты, она кисловата. Запаха не имеет. Распадается при высокой температуре (190 -193 oC) и при долгом хранении.
О существовании особого вещества, ответственного за защиту организма человека от цинги, медики догадывались ещё с середины позапрошлого столетия. Ещё раньше многие мореплаватели и доктора знали, что употребление в пищу картофеля и цитрусовых фруктов являлось надёжной защитой человека от этой болезни. Во время длительных поездок путешественники употребляли в пищу хвою деревьев, так как знали, что в ней, как и в некоторых продуктах питания, содержится вещество, защищающее человека от заражения цингой.
В наши дни, с учетом резкого роста спроса на фармацевтическую продукцию, поиск альтернативного сырья для получения витаминов становится актуальным. Этим и обуславливается наш выбор темы проектной работы.
Также, стоит отметить экологическую значимость данной работы. Использование игольчатых листьев ели для переработки предполагает уменьшение масс промышленных отходов и исключает необходимость их сжигания, что в дальнейшем могло бы привести к загрязнению воздуха.
ГЛАВА I
1.1 История обнаружения и изучения аскорбиновой кислоты
Впервые в чистом виде аскорбиновая кислота была выделена в 1928 году венгерско-американским химиком Альбертом Сент-Дьёрди, а в 1932 году было доказано, что именно отсутствие аскорбиновой кислоты в пище человека вызывает цингу.
Уолтер Хоуорс и Пауль Каррер получили Нобелевскую премию мира в 1937 году за свою работу по обнаружению и идентификации аскорбиновой кислоты.
С тех пор, наука обнаружила некоторые интересные факты, которые касаются аскорбиновой кислоты.
В 1970 г. Лайнус Полинг опубликовал в Докладах национальной академии США статью «Эволюция и потребность в аскорбиновой кислоте», в которой выдвинул концепцию необходимости высоких доз витамина С, предполагая их оптимальными для здоровья. К этому выводу Полинг пришёл путём теоретических рассуждений на основе доступной ему в то время литературы. Полинг предполагал, что высокие дозы витамина С способны защитить человека от многих заболеваний, в частности вирусных (ОРВИ, грипп) и онкологических. Полинг предложил повысить ежедневную дозу витамина С в 100—200 раз. Сам он сообщал, что вместе с женой установил для себя дневную норму витамина С в 10 граммов.
олингом надежды на активацию защитных сил с помощью витамина С, способствующих излечению от рака, не нашли явного подтверждения. Более того, доказано, что при лучевой терапии использование аскорбиновой кислоты приводит к повышенной устойчивости опухолевых клеток.
Существуют исследования, проведённые Марком Левиным, в которых витамин С вводился мышам инъекциями внутривенно в дозе до 4 граммов на килограмм веса животного в сутки и в которых доказывалось противораковое действие витамина С примерно на 75 % раковых клеток, без воздействия на здоровые клетки. При этом рост опухоли замедлялся на 41-53 %.
Несмотря на это, было доказано, что переизбыток аскорбиновой кислоты в организме также вреден, как и ее недостаток.
В 1996 г. в Норвегии был принят закон, запрещавший продавать капсулы, содержавшие больше 250 мг аскорбиновой кислоты. За Норвегией в 1997 г. последовала и Германия. Ограничительные законы запрещали рекламу витаминов как лечебных препаратов против конкретных заболеваний, если не было необходимой для лекарств серии клинических испытаний. Эти законы, как оказалось, затрагивали интересы множества пищевых и фармакологических фирм. Поскольку витамины классифицировались в Европейском союзе как пищевые продукты, то для их поступления в коммерческую продажу никаких клинических испытаний не требовалось.
В 2005 году европейский суд обязал всех производителей аскорбиновой кислоты в описаниях препарата использовать слова «защищает», «способствует сохранению» вместо «излечивает» и «продлевает».
Кроме того, во врачебных практиках постоянно регулируются дозы витамина С, которые следует применять в тех или иных случаях. Но как бы то ни было, важность этого вещества для организма и огромное количество его функций требуют постоянного потребления достаточных его количеств с пищей или специальными препаратами.
В конце 20-х годов исследователь C. Зильва сумел выделить чистую аскорбиновую кислоту из лимонного сока, а чуть позже венгерский врач Альберт Джорджи и американский учёный, специалист по сахарам, Чарльз Кинг полностью расшифровали её химическую структуру и разработали схему искусственного синтеза этого витамина.
В настоящее время мнение об эффективности низких доз (до 1000 мг) витамина С при простуде по-прежнему не находит подтверждения, а эксперименты с дозировкой более 2000 мг/сут (согласно теории Полинга) так и не проведены. С другой стороны, предположения о том, что дозы аскорбиновой кислоты, существенно превышающие потребность, могут приводить к определённым физиологическим расстройствам, также не доказаны.
1.2 Структура и свойства аскорбиновой кислоты
Структуру аскорбиновой кислоты почти одновременно расшифровали английские ученые Эйлер и Хирст. Аскорбиновая кислота имеет эмпирическую формулу С6Н8О6 , молекулярную массу 176 и в химическом отношении представляет собой лактон-2,3-диэнол-1-гулоновой кислоты. В кристаллической форме аскорбиновая кислота устойчивая.
В водных растворах быстро теряет свою биологическую активность, особенно в присутствии воздуха и следов металла. Аскорбиновая кислота является одноосновной кислотой, дающей соли типа С6Н7О6М. Витамин C - близкое к сахарам соединение с сильными восстановительными свойствами. В отличие от всех других витаминов, витамин C наиболее нестоек и легко разрушается. Наличие в молекуле этого витамина, так называемой диэнольной группировки, обуславливает подвижность двух атомов водорода. При их потере, то есть окислении, аскорбиновая кислота переходит в дегидроаскорбиновую кислоту. Если окисление не было глубоким, аскорбиновая кислота вновь может быть возвращена в исходную форму. Обе формы собственно АК и ДГАК биологически активны, только вторая менее устойчива. Переходы АК к ДГАК осуществляются разными ферментами.
Аскорбиновая кислота окисляется при действии аскорбаторедуктазы, пероксидазы, полифенол оксидазы. Дегидроаскорбиновая кислота восстанавливается при участии аскорбаторедуктазы. Среди условий, влияющих на скорость окисления аскорбиновой кислоты, кроме катализаторов, очень важную роль играет реакция среды. Витамин C относительно более устойчив в кислой среде, малоустойчив в нейтральной и чрезвычайно быстро распадается в щелочной. Аскорбиновая и дегидроаскорбиновая кислоты относятся к так называемой свободной аскорбиновой кислоте.
1.3 Получение аскорбиновой кислоты в промышленности
Сегодня, чаще всего, аскорбиновая кислота в промышленности производится из D-глюкозы по методу Рейхштейна — Грюсснера.
D-Глюкозу гидрируют в D-сорбит и ферментативно окисляют его в L-сорбозу. Циклическую форму б - L-сорбофуранозы действием ацетона и серной кислоты превращают в диизопропилиденсорбозу. Ацетонирование сорбозы при низких температурах (–5 °С) дает существенное повышение выхода ди-О-изопропилиденового производного. Дальнейшее окисление диацетонсорбозы до кислоты обычно выполняется с помощью гипохлорита натрия в присутствии сульфата никеля. Изопропилиденовые защитные группировки снимают действием хлороводородной кислоты в безводной среде (этанол-хлороформ, 65 °С, 50 ч). Образующаяся циклическая форма переходит в 2-оксогулоновую кислоту, при действии на которую кислоты происходит лактонизация; промежуточно образующееся соединение затем ионизуется, давая аскорбиновую кислоту.
Недостатком данного метода является многоступенчатость процесса, а также большие затраты фармацевтических ресурсов.
Так же существует способ получения аскорбиновой кислоты, заключающийся в том, что смесь гидрата диацетон-2-кетогулоновой кислоты, ароматического углеводорода и концентрированной соляной кислоты нагревают несколько часов, за 1 ч до окончания реакции прибавляют органический растворитель и отгоняют в вакууме азеотропную смесь, содержащую НСl, целевой продукт отфильтровывают и промывают эфиром.
Недостатком этого метода является сложность технологии, включающей выделение технической аскорбиновой кислоты, проведение о гонки растворителем в вакууме и использование пожароопасного растворителя — эфира.
1.4 Функции в организме
Наиболее заметной ролью аскорбиновой кислоты в организме является его борьба со свободными радикалами и антиоксидантная активность. Из всех витаминов именно витамин С считается наиболее сильным антиоксидантом, защищающим все ткани и органы от риска возникновения различных химических повреждений и развития злокачественных опухолей.
Вообще в окислительно-восстановительных процессах аскорбиновая кислота играет очень важную роль. При ее участии протекают реакции синтеза коллагеновых белков и все процессы создания соединительной ткани. Как результат, аскорбиновая кислота обеспечивает максимально быстрое протекание репарационных процессов — заживление ран, восстановление повреждённых оболочек, регенерацию различных эпителиальных тканей.
Не менее значима роль этого вещества в транспортировке глюкозы в клетки. Именно эта функция обеспечивает нормальное протекание всех энергетических процессов в организме.
Кроме того аскорбиновая кислота активно участвует в синтезе стероидных гормонов и катехоламинов, без него не обходится обмен фолиевой кислоты и некоторых металлов в организме.
Витамин С крайне важен для здоровья кровеносных сосудов и всей сердечно-сосудистой системы. Он способствует укреплению стенок сосудов и одновременно увеличению их проницаемости. С ним же наиболее эффективно происходят процессы кроветворения и регенерации необходимого количества форменных элементов крови. И наоборот, различные воспалительные и аллергические реакции, связанные со скоплением объёмов крови в определённых участках тела, легче протекают или вовсе не возникают при достаточном количестве аскорбиновой кислоты в организме.
Аскорбиновая кислота принимает активное участие в нормализации синтеза и обмена холестерина в организме, благодаря чему при нормальном его количестве существенно снижается риск отложения окисленного холестерина на стенках сосудов и развития атеросклероза.
К тому же, аскорбиновая кислота способствует лучшему всасыванию кальция и железа в пищеварительном тракте, обеспечивая кровь противоанемическим фактором, а нервную систему и суставы — важнейшим для них кальцием.
Крайне важен витамин С для иммунной системы. Он входит в так называемую «знаменитую тройку» витаминов, обеспечивающих наивысший уровень защитных сил организма — витамин А, витамин С и витамин Е. В этой компании аскорбиновая кислота регулирует активность защитных клеток организма, увеличивает сопротивляемость его различным инфекциям — вирусным, бактериальным или паразитарным — и препятствует возникновению раковых опухолей.
С онкологией, однако, не всё так однозначно. При нормальном уровне витамина С в организме происходит наиболее эффективная естественная борьба его с мутировавшими клетками, с которых начинается развитие опухоли. При избыточных же дозах потребления аскорбиновой кислоты увеличивается устойчивость раковых клеток к обработке их при лучевой терапии. Однако введение самого витамина непосредственно в опухоль тормозит её развитие. Однозначный результат ещё ждёт проведения дополнительных исследований, а сегодня может быть одна рекомендация — поддерживать уровень витамина С в организме на оптимальном уровне.
Поддерживая иммунную систему организма, аскорбиновая кислота позволяет успешно противостоять развитию различных аллергий и действию большинства, в том числе - и достаточно сильных, аллергенов.
Аскорбиновая кислота быстро обезвреживает различные токсичные вещества. При ее участии в печени происходит более полный вывод меди, радиоактивных веществ и тяжёлых металлов — ртути и свинца.
Кроме того, многие исследования показали эффективность аскорбиновой кислоты при профилактике различных заболеваний желудочно-кишечного тракта. Так, сегодня ее часто прописывают при подозрении на различные язвенные болезни желудка и кишечника, как профилактику рака толстой кишки и мочевого пузыря.
Аскорбиновая кислота способствует нормализации работы нервной системы и устойчивости организма к стрессам. Помимо улучшения потребления кальция, необходимого для нормального функционирования нервной системы, витамин С стабилизирует работу надпочечников и выработку гормонов, необходимых для борьбы с последствиями стресса. К тому же, аскорбиновая кислота нейтрализует токсические продукты, вырабатываемые в результате стресса.
ГЛАВА II. Анализ статистический данных по использованию игольчатых листьев хвойных в промышленности
2.1 Основные данные по использованию хвои ели в промышленности
В 30-е годы XX в. в нашей стране началось систематическое изучение хвои, ее состава и свойств, в частности лечебных и кормовых. После выделения аскорбиновой кислоты из игольчатых листьев началось активное использование хвои в промышленности с целью получения витамина C.
Но открытие новых источников, более богатых по содержанию витамином С, чем хвоя, постепенно привело к значительному свертыванию работ в этом направлении.
В России около 6,63 млн. км2 покрыто хвойными лесами. С каждым днем объем вырубки лесов непреклонно растет, и, как следствие, объемы отходов в виде хвои увеличиваются. В связи с этим, мы решили возобновить использование хвои, как источника аскорбиновой кислоты.
Ежегодно, после празднования Нового года множество елей выбрасывают на улицы или приносят в специализированные пункты утилизации. Для продажи вырубают около 55 тыс. деревьев, но только около 10 тыс. попадают в пункты, а остальные, скорее всего, будут выброшены. Но сейчас мало кто задумывается, что отходы от утилизации можно использовать в фармацевтических целях.
Изучая объект нашего исследования, мы не могли не обратить внимание на экологические и экономические аспекты использования хвои.
Стоит отметить, что мы также провели сравнительный анализ с одним из наиболее используемых видов хвойных – пихтой. Это было необходимо, чтобы наглядно продемонстрировать, как огромны количества остатков от общей массы вырубаемой ели, в отличие от пихты, использование хвои которой уже хорошо рассмотрено и изучено.
Проведя литературный обзор и обзор интернет – источников, мы систематизировали все полученные данные на тему использования хвои в промышленности в данную таблицу:
Общий объем заготовки древесины (м3) | Остатки от общей массы древесины (%) | Использование отходов в фармацевтических целях | Использование продуктов разложения | |
Ель | 10 млрд | 25-30 | Эфирное масло ели | Эфирное масло Аскорбиновая кислота Каротин Дубильные вещества |
Пихта | 26 млрд | 7-15 | Пихтовое эфирное масло | Витамин Е Дубильные вещества |
2.2 Экономическая и экологическая значимость
Проанализировав данные, мы сделали вывод, что объем неиспользованной хвои ели невероятно высок. Дальнейшая эксплуатация его как сырья может благоприятно повлиять на решение сразу 2 проблем: экономической и экологической. С экономической точки зрения использование отходов как сырья увеличит объем получаемых из хвои продуктов, а с экологической точки зрения уменьшит необходимость использования свежей хвои для фармацевтических продуктов и исключит необходимость сжигания ее как отходов, что в дальнейшем могло привести к загрязнению воздуха.
К положительным свойствам хвои как сырья для промышленности также следует отнести сравнительно высокую устойчивость в ней при хранении витамина С: два месяца зимой и пять-десять суток в другое время года. Эта устойчивость обусловлена низкой активностью аскорбиназы.
Мы рассчитали объем неиспользуемой хвои, т. е. хвои, идущей в отходы.
Чтобы это сделать мы использовали следующую формулу:
X = (Vз * %ост/100) – Vисп, где:
Vз - Общий объем заготовки древесины (м3);
%ост - Остатки от общей массы древесины (%);
Vисп - Объем использованной хвои (м3);
Х - Объем неиспользуемой хвои.
X = (10 млрд*0,3) – 1 млрд ≈ 2 млрд.
Далее, после выполнения практической части исследования, мы будем использовать полученные данные для вычисления объема аскорбиновой кислоты от объёма неиспользуемой хвои.
ГЛАВА III. Выполнение практической части
3.1 Определение аскорбиновой кислоты титриметрическим методом
Метод основан на экстрагировании аскорбиновой кислоты спиртом с последующим титрованием (визуально: до установления темно-синей или фиолетовой окраски).
3.1.1 Аппаратура, материалы и реактивы
Для выполнения анализа необходимы: весы лабораторные общего назначения; воронки лабораторные; колбы мерные лабораторные стеклянные; колбы вместимостью 50, 100; палочки стеклянные; пипетки; стаканы; цилиндры мерные;
Вода дистиллированная; 5-процентный йод; полученные экстракты.
3.1.2 Приготовление экстрактов
Перед началом выполнения практического исследования, мы ознакомились с различными способами синтеза аскорбиновой кислоты из содержащих ее продуктов.
Так как продукты питания, содержащие аскорбиновую кислоту (например: яблоки, шиповник, черная смородина, цитрусовые, зеленый лук) использовать не рентабельно, свой выбор мы остановили на игольчатых листьях хвойный, а точнее ели.
При подготовке мы придерживались следующего хода работы:
•Обзор литературы и выбор сырья;
•Сбор и взвешивание необходимого сырья;
•Высушивание хвои и ее измельчение;
•Изготовление экстрактов разного процентного содержания спирта;
•Выполнение предварительных расчетов.
Готовясь к практической части проекта, мы собрали некоторое количество игольчатых листьев ели, высушили, и приготовили экстракты, используя 40 и 98 процентный спирт.
Экстракты настаивались в течение трех месяцев, после чего мы провели качественную реакцию на обесцвечивание хлорофилла в гидроксиде натрия (NaOH) или едком натре при сообщении тепла. Тем самым мы практически доказали наличие аскорбиновой кислоты в хвое ели.
Обесцвечивание проходило следующим образом:
Мы взяли несколько высушенных игольчатых листьев и залили небольшим количеством гидроксида натрия (едкого натра);
Затем нагревали хвою над спиртовкой до изменения цвета раствора с прозрачного на зеленоватый, что говорило об обесцвечивании хлорофилла.
Позже в микроскоп мы наблюдали появление прозрачных (вследствие обесцвечивания) устьиц, в которых и содержится аскорбиновая кислота.
Следующим этапом практической части мы провели титрование.
3.1.3 Процесс титрования
Титрование происходило следующим образом:
К 10 мл каждого экстракта мы добавили дистиллированную воду, получив общий объём нового раствора 100 мл.
Затем мы взяли 10 мл нового раствора.
В новый полученный раствор мы по капле добавляли раствор 5% йода и индикатор в виде жидкого крахмала.
Мы наблюдали изменение цвета растворов. Раствор, который был получен из экстракта хвои и 98% спирта прореагировал с окрашиванием в насыщено синий цвет, а раствор, полученный из экстракта хвои и 40% спирта прореагировал с окрашиванием в фиолетовый цвет. Это говорит о разной концентрации аскорбиновой кислоты в экстрактах.
Далее мы рассчитали титр и массовую долю аскорбиновой кислоты каждого из экстрактов.
3.2 Обработка результатов. Расчеты
Последним этапом работы была обработка результатов и произведение необходимых расчетов. Сначала мы рассчитали массовую долю аскорбиновой кислоты в экстрактах, а позже, используя эти данные и расчёты, приведенные в пункте 2.2 второй главы, вычислили объем аскорбиновой кислоты в не перерабатываемых отходах.
Для расчетов мы использовали следующую формулу:
X =
Где:
X – Содержание аскорбиновой кислоты (%);
m1 – Грамм – молекулярная масса;
A – Количество раствора йода, пошедшего на титрование;
V1 – Общее количество вытяжки;
m2 – Количество г экстракта, взятого для вычисления процентного содержание;
V2 – Количество мл вытяжки, взятой для титрования;
m3 – Количество вещества, взятого для анализа.
Выполнив необходимые вычисления, и взяв за конечный результат среднее арифметическое трех промежуточных результатов, мы рассчитали массовую долю аскорбиновой кислоты в экстрактах, которая равна ≈ 67%.
Используя данные вычисления, рассчитаем примерный объем аскорбиновой кислоты в отходах по данной формуле:
V1 = V2*(w/100), где:
V1 – Объем аскорбиновой кислоты в отходах;
V2 – Объем неиспользуемой хвои;
w – Массовая доля аскорбиновой кислоты.
Получим:
V1 = 2 млрд*0,67 ≈ 1,34 млрд
Данные показатели являются доказательством целесообразности использования отходов обработки древесины хвойных (в нашем случае – ели) в качестве альтернативного фармацевтического сырья.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Систематизировав и проанализировав все сведения и данные, полученные нами в процессе выполнения проектной работы, мы можем сделать вывод об успешном завершении исследования.
Мы подтвердили гипотезу о получении аскорбиновой кислоты из игольчатых листьев хвойных и доказали, что листья хвойных можно использовать в качестве дополнительного сырья для получения аскорбиновой кислоты. Также мы определили высокую экологическую значимость использования игольчатых листьев хвойных.
К тому же, последние достижения в области использования биологически активных веществ хвои свидетельствуют о невозможности одностороннего рассмотрения хвои только как источника витамина С. Хвоя содержит весь комплекс водорастворимых витаминов, значительное количество микроэлементов и фитонцидов, что говорит о возможности ее использования для синтеза не только аскорбиновой кислоты, но и ряда других полезных веществ.
Ресурсы
- h t t p s : / / r u . w i k i p e d i a . o r g / w i k i w w w . m a r b i o p h a r m . r u / c a t a l o g / v i t a m i n n y e - p r e p a r a t y - / 3 1 5 w w w . x u m u k . r u / o r g a n i k a / 3 5 5 . h t m l chem21.info/info/327109 h t t p s : / / b i o h i m i s t . r u / s h p a r g a l k i - p o - b i o k h i m i i / 5 4 4108.ru/u/askorbinovaya_kislota_-_svoystva ГОСТ 24556-89. Методы определения витамина C. – Введ. 1990-01-01. – М.: Изд-во стандартов, 2003. Химия пищевых продуктов / Ш. Дамодаран, , Изд-во «Профессия» , 2012. forum. xumuk. ru >8=65=5@=K9 D0:C;LB5B !%" > h t t p : / / w w w . a c t i v e s t u d y . i n f o / v o d o r a s t v o r i m y e - v e s h h e s t v a - x v o i / © >>8=65=5@=K9 D0:C;LB5B !%
Приложение
