Винпоцетин, ФС
раствор для парентерального
применения Вводится впервые
Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат винпоцетин, раствор для парентерального применения (раствор для инъекций; концентрат для приготовления раствора для инфузий). Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения» и ниже приведенным требованиям.
Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % винпоцетина С22Н26N2O2 от заявленного количества.
Описание. Прозрачная бесцветная или слегка окрашенная жидкость.
Подлинность. 1. Спектрофотометрия. Ультрафиолетовые спектры поглощения испытуемого и стандартного растворов в области длин волн от 230 до 350 нм должны иметь максимумы и минимумы при одних и тех же длинах волн («Количественное определение»).
2. ВЭЖХ. Время удерживания пика винпоцетина на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика винпоцентина на хроматограмме стандартного раствора («Количественное определение»).
Прозрачность. Препарат должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей»).
Цветность. Препарат должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном GY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).
pH. От 3,0 до 4,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3).
Механические включения. Видимые частицы. В соответствии с ОФС «Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».
Невидимые частицы. В соответствии с ОФС «Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения».
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ.
0,2 М раствор аммония ацетата. 15,4 г аммония ацетата помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, растворяют в 800 мл воды и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Подвижная фаза (ПФ). 0,2 М раствор аммония ацетата – ацетонитрил 1:1.
Испытуемый раствор. Точный объем препарата, содержащий около 25 мг винпоцетина, помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора ПФ до метки.
Стандартный раствор примеси А винпоцетина. Около 10 мг (точная навеска) стандартного образца примеси А винпоцетина помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 8 мл ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Стандартный раствор примеси В винпоцетина. Около 10 мг (точная навеска) стандартного образца примеси В винпоцетина помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 8 мл ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор сравнения. Около 0,1 г (точная навеска) стандартного образца винпоцетина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 40 мл ПФ, прибавляют 0,5 мл стандартного раствора примеси А винпоцетина, 0,8 мл стандартного раствора примеси В винпоцетина и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор для проверки чувствительности системы. 1,0 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора ПФ до метки. 1,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл и доводят объем раствора ПФ до метки.
Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. 50 мг стандартного образца винпоцетина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 40 мл ПФ, прибавляют 2,5 мл стандартного раствора примеси А винпоцетина, 2,5 мл раствора стандартного раствора примеси В винпоцетина и доводят объем раствора ПФ до метки.
Примечание.
Примесь А: этил[(12RS,13aSR,13bSR)-12-гидрокси-13a-этил-2,3,5,6,12,13,13a,13b-октагидро-1H-индоло[3,2,1-de]пиридо[3,2,1-ij][1,5]нафтиридин-12-карбоксилат] (этилвинкаминат), CAS 68780-78-9;
примесь В: метил[(13aS,13bS)-13a-этил-2,3,5,6,13a,13b-гексагидро-1H-индоло[3,2,1-de]пиридо[3,2,1-ij][1,5]нафтиридин-12-карбоксилат] (аповинкамин), CAS 4880-92-6.
Хроматографические условия
Колонка | 15 Ч 0,46 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм или 25 Ч 0,46 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |
Объем пробы | 20 мкл; |
Время хроматографирования | двукратное от времени удерживания пика винпоцетина. |
Хроматографируют испытуемый раствор, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и раствор для проверки чувствительности системы.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:
- разрешение (R) между пиками примеси А винпоцетина и примеси В винпоцетина должно быть не менее 1,5;
- разрешение (R) между пиками примеси В винпоцетина и винпоцетина должно быть не менее 1,5.
На хроматограмме раствора для проверки чувствительности системы отношение сигнал/шум для пика винпоцетина должно быть не менее 10:1.
Относительные времена удерживания соединений. Винпоцетин – 1, примесь А винпоцетина – около 0,5, примесь В винпоцетина – около 0,8.
Допустимое содержание примесей. Содержание примеси А винпоцетина и примеси В винпоцетина в процентах (Х1) вычисляют по формуле:
где | S1 | – | площадь пика примеси А винпоцетина или примеси В винпоцетина на хроматограмме испытуемого раствора; |
S0 | – | площадь пика примеси А винпоцетина или примеси В винпоцетина на хроматограмме раствора сравнения; | |
a0 | – | навеска стандартного образца примеси А или примеси В винпоцетина, мг; | |
V0 | – | аликвота стандартного раствора примеси А винпоцетина или примеси В винпоцетина, взятая для приготовления раствора сравнения, мл; | |
V1 | – | объем препарата, взятый для приготовления испытуемого раствора, мл; | |
P | – | содержание основного вещества в стандартном образце примеси А или примеси В винпоцетина; | |
L | – | заявленное количество винпоцетина в препарате, мг/мл. |
Суммарное содержание неидентифицированных примесей в процентах (Х) вычисляют по формуле:
где | УS1 | – | сумма площадей пиков неидентифицированных примесей на хроматограмме испытуемого раствора; |
S0 | – | площадь пика винпоцетина на хроматограмме испытуемого раствора; | |
С1 | – | концентрация испытуемого раствора, мг/мл; | |
С0 | – | концентрация винпоцетина в растворе сравнения, мг/мл. |
Сумму примесей вычисляют суммированием примеси А винпоцетина, примеси В винпоцетина и неидентифицированных примесей.
Содержание примеси А винпоцетина – не более 0,8 %, примеси В винпоцетина – не более 0,5 %. Сумма неидентифицированных примесей – не более 0,5 %, сумма всех примесей – не более 2,0 %.
Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от площади пика винпоцетина на хроматограмме испытуемого раствора и пики, имеющие время удерживания менее 0,2 относительно времени удерживания винпоцетина.
Извлекаемый объем. Не менее номинального (ОФС «Извлекаемый объем лекарственных форм для парентерального применения»).
Бактериальные эндотоксины. Не более 5,0 ЕЭ на мг винпоцетина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ОФС «Стерильность»).
Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» или методом спектрофотометрии.
1. ВЭЖХ
Стандартный раствор. Около 50 мг (точная навеска) стандартного образца винпоцетина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 30 мл ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:
- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику винпоцетина, должна быть не менее 1000 т. т.;
- фактор асимметрии пика винпоцетина должен быть не более 1,6;
- относительное стандартное отклонение площадей пиков винпоцетина должно быть не более 2,0 %.
Содержание винпоцетина С22Н26N2O2 в процентах от заявленного количества (Х) вычисляют по формуле:
где | S1 | – | площадь пика винпоцетина на хроматограмме испытуемого раствора; |
S0 | – | площадь пика винпоцетина на хроматограмме стандартного раствора; | |
a0 | – | навеска стандартного образца винпоцетина, мг; | |
P | – | содержание винпоцетина в стандартном образце, %; | |
V1 | – | объем препарата, взятый для приготовления испытуемого раствора, мл; | |
L | – | заявленное количество винпоцетина в препарате, мг/мл. |
2. Спектрофотометрия
Растворитель. К 30 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты прибавляют 270 мл спирта 96 %.
Испытуемый раствор. Точный объем препарата, содержащий около 25 мг винпоцетина, помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора растворителем до метки. 2,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора растворителем до метки.
Стандартный раствор. Около 50 мг (точная навеска) стандартного образца винпоцетина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. 2,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор сравнения. Растворитель.
Измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 314 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
Содержание винпоцетина С22Н26N2O2 в процентах от заявленного количества (Х) вычисляют по формуле:
где | A1 | – | оптическая плотность испытуемого раствора; |
A0 | – | оптическая плотность стандартного раствора; | |
a0 | – | навеска стандартного образца винпоцетина, мг; | |
V1 | – | объем препарата, взятый для приготовления испытуемого раствора, мл; | |
P | – | содержание винпоцетина в стандартном образце, %; | |
L | – | заявленное количество винпоцетина в препарате, мг/мл. |
Хранение. В защищенном от света месте.
