Пробиотик бифидобактерий ФС
бифидум монокомпонентный,
суппозитории вагинальные
и ректальные Взамен ФС 42-3240-95
__________________________________________________________________
Настоящая фармакопейная статья распространяется на биотехнологический лекарственный препарат (БтЛП), пробиотик бифидобактерий бифидум монокомпонентный, суппозитории вагинальные и ректальные. Активным компонентом пробиотика является биомасса живого антагонистически активного штамма бактерий Bifidobacterium bifidum № 1 или Bifidobacterium bifidum № 000. В одном суппозитории (дозе) препарата должно содержаться не менее 107 КОЕ бифидобактерий.
ПРОИЗВОДСТВО
Основные этапы производства препарата:
- получение биомассы производственного штамма бактерий Bifidobacterium bifidum № 1 или Bifidobacterium bifidum № 000 (выращивание/культивирование на оптимальной питательной среде в соответствующих условиях культивирования);
- подготовка биомассы и основы перед формированием суппозиториев (лиофилизация с последующим измельчением).
- получение готовой лекарственной формы препарата - суппозитории вагинальные и ректальные на липофильной основе (формирование суппозиторной массы и ее розлив в контурную ячейковую упаковку - герметизация и маркировка). Масса суппозитория в зависимости от технологии производства от 1,1 до 2,0 г.
Используемые в процессе производства производственные штаммы должны быть охарактеризованы в объеме в соответствие с требованиями, изложенными в ОФС «Бифидосодержащие пробиотики», испытания проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».
При производстве пробиотика бифидобактерий бифидум монокомпонентного, суппозитории вагинальные и ректальные проводят валидацию технологического процесса и методов контроля в соответствии с требованиями правил организации производства и контроля качества БтЛП. Стадии производственного процесса получения пробиотика бифидобактерий бифидум монокомпонентного, суппозитории вагинальные и ректальные должны быть охарактеризованы в соответствии с требованиями, изложенными в ОФС «Пробиотики».
ИСПЫТАНИЯ
Описание. Суппозитории белого, желтовато-серого, светло-желтого с коричневым оттенком или разных оттенков бежевого цвета, торпедовидной, конусообразной или цилиндрической формы со специфическим запахом жира; допускается неоднородность цвета в виде вкраплений или «мраморности», возможно окрашивание кончика суппозитория от бледно-желтого до светло-коричневого цвета. Определение проводят органолептически.
Подлинность. В мазках, окрашенных по Граму, должны присутствовать грамположительные полиморфные палочки с бифуркацией на одном или двух концах, длиной 4-5 мкм, располагающиеся в виде скоплений или отдельных клеток. Испытание проводят микроскопически в соответствии с ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».
Подлинность подтверждается специфической активностью (раздел «Специфическая активность»).
Время полной деформации. Не более 20 мин. Один суппозиторий помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл и добавляют 50 мл воды, прогретой до температуры (37±1) оС, колбу выдерживают в термостате при температуре (37±1) °С, время полной деформации не должно превышать 20 мин.
Средняя масса и отклонение от средней массы. Масса суппозиториев от 1,1 до 2,0 г. Отклонение от средней массы внутри одной серии:
18/20 - не более ±5 %,
2/20 - не более ±7,5 %.
Суппозиториев взвешивают с точностью до 0,001 г. Определение проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм».
Специфическая безвредность. Препарат должен быть безвреден для белых мышей при пероральном введении одного суппозитория (дозы).
Определение проводят в соответствии с ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo». Тест доза испытуемого препарата содержится в объеме 1 мл на животное.
Отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов (микробиологическая чистота). Категория 5.3.Б:
В 1 суппозитории (1 доза) допускается не более 50 КОЕ аэробных бактерий. Бактерии семейства Enterobacteriaceae, бактерии рода Proteus, гемолитические бактерии, дрожжевые и плесневые грибы должны отсутствовать.
Определение на отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» методом прямого посева.
Специфическая активность. В одном суппозитории (дозе) препарата должно содержаться не менее 107 КОЕ бифидобактерий, показатель активности кислотообразования должен быть не ниже 90 оТ. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков».
Определение количества живых бактериальных клеток в 1 суппозитории (дозе) проводят методом последовательных десятикратных разведений в 0,9 % растворе натрия хлорида с последующим высевом в модифицированную печеночную среду Блаурокка. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков» (Пробирочный метод учета колоний в полужидкой среде).
Показатель активности кислотообразования определяют методом кислотно-основного титрования (титриметрический метод). Для выращивания бифидобактерий используют модифицированную печеночную среду Блаурокка.
Производственные штаммы и штаммы для контроля. Производственнй штамм бактерий Bifidobacterium bifidum 1 (ГКПМ № 000) депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов, (Россия). Производственный штамм бактерий Bifidobacterium bifidum 791 (ЦМПМ № В-3300) депонирован в ВНИИ Генетика Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (Россия) и в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры ФГУН МНИИЭМ им. Роспотребнадзора (Россия), номер депозита № 80.
Производственные штаммы бактерий Bifidobacterium bifidum № 1 и Bifidobacterium bifidum № 000 по биологическим и биохимических свойствам должны соответствовать требованиям ОФС «Бифидосодержащие пробиотики». Испытания проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков», ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo», ОФС «Определение специфической активности пробиотиков», ОФС «Микробиологическая чистота».
Используемые для контроля штаммы бактерий депонированы в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов, Россия (ГКПМ): Shigella sonnei 5063 (депозит № 000 или 233043); S. flexneri 337 (депозит № 000 или 232152), 170 (депозит № 000или 232151); Escherichia. coli 157 (депозит № 000 или 240329); Proteus mirabilis H-237 (депозит № 000 или 160120), P. vulgaris 177 (депозит № 000 или 160153); Staphylococcus aureus 209-Р FDA = 6538-Р ATCC (депозит № 000 или 201108). Тест-штаммы должны соответствовать требованиям ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».
Контроль качества производственных пробиотических штаммов и штаммов для контроля пробиотиков проводится не реже 1 раза в год.
Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».
Транспортирование и хранение. При температуре от 2 до 8 оС в соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».
