McClung Toabe Agar Base Основа агара МакКланга-Тобе | M387 |
Эту среду используют для определения и выделения Clostridium perfringens из пищевых продуктов.
Состав**: |
Ингредиенты | грамм/литр |
Протеозопептон Глюкоза Натрия гидрофосфат Калия дигидрофосфат Натрия хлорид Магния сульфат Агар-агар Конечное значение рН (при 25єС) 7,6 ± 0,2 | 40,00 2,00 5,00 1,00 2,00 0,10 25,00 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление: |
Размешать 75,0 г порошка в 900 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121єС) в течение 20 мин. Остудить до 50єС и асептично добавить 100 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата: |
Эту среду готовят в соответствии с прописью McClung и Toabe (1, 2, 3) и используют для дифференциации Clostridium perfringens по лецитиназной и липазной активности. Фермент лецитиназа расщепляет лецитин желтка с образованием зоны непрозрачного преципитата вокруг слегка приподнятой колонии. Протеозопептон обеспечивает присутствие в среде азотистых питательных веществ. Глюкоза служит ферментируемым субстратом, а фосфаты придают буферные свойства среде.
Исследуемый пищевой продукт в количестве 25,0 г вносят в 2 пробирки, содержащие 25 мл Жидкой тиогликолевой среды (М009) с поплавками. Инкубируют при 46єС в течение 4-6 ч. При появлении признаков роста и газообразования материал штрихами пересевают на чашки с данным агаром и инкубируют в соответствующих условиях.
Контроль качества: |
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 2,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет янтарную окраску, прозрачна; после добавления желтка и розлива среды в чашках Петри формируется желтый непрозрачный гель.
Кислотность среды:
При 25єС водный раствор (7,5% вес/об) имеет рН 7,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35єС в анаэробных условиях.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) Clostridium perfringens (12919) Clostridium sporogenes (11437) Staphylococcus aureus (25923) | Рост Обильный Обильный Обильный | Лецитиназа + – + | Липаза – + + |
Примечания: Лецитиназа+ = положительная реакция, непрозрачная зона вокруг колоний;
Липаза+ = положительная реакция, радужный блеск на поверхности роста.
Ссылки: |
Условия и сроки хранения: |
Порошок хранить при температуре ниже +25єС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8єС.
