Анаэробный агар по Вилкинсу-Чалгрену / Анаэробный бульон по Вилкинсу-Чалгрену

Wilkins Chalgren Anaerobic Agar / Broth Анаэробный агар по Вилкинсу-Чалгрену / Анаэробный бульон по Вилкинсу-Чалгрену

M832 / M863

Этот агар используют для выделения и культивирования, а также определения чувствительности методом разведения в агаре анаэробных бактерий.

Состав**:

Ингредиенты	М832 грамм/литр	М863 грамм/литр
Гидролизат казеина Пептический перевар животной ткани Дрожжевой экстракт Глюкоза Натрия хлорид L-Аргинин Натрия пируват Гемин Менадион Агар-агар Конечное значение рН (при 25єС) 7,1 ± 0,2	10,00 10,00 5,00 1,00 5,00 1,00 1,00 0,005 0,0005 10,00	10,00 10,00 5,00 1,00 5,00 1,00 1,00 0,005 0,0005 –

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 43,0 г порошка М832 или 33,0 г порошка М863 в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в соответствующую посуду.  Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121єС) в течение 15 мин. Перед внесением антибиотиков остудить до 50єС. Осторожно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри. Для культивирования анаэробов в стерильную расплавленную среду перед розливом в чашки внести добавку FD001 или добавку FD002 (по желанию).

Принцип и оценка результата:

Эти среды готовят по прописи Wilkins и Chalgren (1), предложенной для определения минимальных ингибирующих концентраций (МИК) антибиотиков в отношении анаэробных бактерий. Последние хорошо растут на этих средах. В отличие от других сред, в данном случае не требуется добавление крови.

Дрожжевой экстракт является источником витаминов и других факторов роста, например, пуринов и пиримидинов, которые важны для роста Prevotella melaninogenica. Аргинин служит источником аминокислот, в частности, для Eubacterium lentum, а пируват – источником энергии для асахаролитических кокков, например, вейллонелл (2). Гемин нужен для роста бактероидов (3), а менадион – для роста Prevotella (Bacteroides) melaninogenica. Пептический перевар животной ткани и гидролизат казеина способствуют стандартизации условий в среде.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0%-ному агаровому гелю (М832).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель.

Кислотность среды:

При 25єС водные растворы М832 (4,3% вес/об) или  М863 (3,3% вес/об) имеют рН 7,1 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35єС в анаэробных условиях.

Штаммы микроорганизмов (АТСС) Bacteroides fragilis (25285) Bacteroides melaninogenicus (15930) Clostridium perfringens  (12924) Escherichia coli (25922)

Рост Обильный Обильный Обильный Подавляется

Ссылки:

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25єС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8єС.