Рибавирин лиофилизат для приготовления суспензии для приема внутрь

Рибавирин,        ФС

лиофилизат для приготовления

суспензии для приема внутрь        Вводится впервые

       

Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат рибавирин, лиофилизат для приготовления суспензии для приема внутрь. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Лиофилизаты», ОФС «Суспензии» и ниже приведенным требованиям.

Препарат представляет собой липосомальный рибавирин, получаемый лиофилизацией из раствора, содержащего необходимое количество рибавирина и вспомогательных веществ, в том числе холестерин и фосфолипиды (например, фосфатидилхолин).

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленного количества рибавирина C8H12N4O5  в одном флаконе.

Описание. Содержание раздела приводится в соответствии с требованиями ОФС «Лиофилизаты».

Подлинность. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).

Время получения восстановленного препарата. Не более 10 мин. К содержимому флакона прибавляют воду из расчета 4,0 мл на 1,0 г препарата. Далее непрерывно встряхивают в течение указанного времени. Должна образоваться однородная суспензия.

Определение проводят визуально.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ.

Фосфатный буферный раствор рН 3,0. 6,8 г калия фосфата однозамещенного помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяют в 900 мл воды и прибавляют по каплям, при перемешивании, кислоту ортофосфорную концентрированную до рН 3,0±0,05. Доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Подвижная фаза (ПФ). Фосфатный буферный раствор рН 3,0 – ацетонитрил 97 : 3.

Растворитель. Вода, доведенная 10 % серной кислотой до рН 2,5±0,05.

Испытуемый раствор. Точную навеску лиофилизата, содержащую около 1 г рибавирина, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 10 мл воды, необходимое количество поверхностно активного вещества (например, 0,55 мл Тритона Х-100), помещают в термостат и выдерживают при температуре 37±3 °С в течение 35±5 мин для разрушения липосом, периодически встряхивая. Объем содержимого доводят до метки растворителем и перемешивают. 1,0 мл полученной суспензии помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем суспензии растворителем до метки, перемешивают. Испытуемый раствор получают путем центрифугирования части суспензии в течение 5 мин при скорости 13400 об/мин.

Стандартный раствор 1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты. Около 5 мг (точная навеска) стандартного образца 1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл растворителя и выдерживают в ультразвуковой бане до растворения. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора растворителем до метки и перемешивают.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. 1,0 мл стандартного раствора 1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора растворителем до метки и перемешивают. 1,0 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора растворителем до метки и перемешивают.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Около 20 мг (точная навеска) стандартного образца рибавирина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл растворителя и выдерживают в ультразвуковой бане до растворения. После охлаждения до комнатной температуры к полученному раствору добавляют 2,0 мл стандартного раствора 1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты, доводят объем раствора растворителем до метки и перемешивают.

Хроматографические условия

Колонка	150 мм Ч 4 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм;
Температура колонки	25 °С;
Скорость потока	0,8 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 207 нм;
Объем пробы	10 мкл;
Время хроматографирования	15 мин.

Колонку уравновешивают ПФ до достижения стабильной базовой линии.

Хроматографируют последовательно растворитель, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

-разрешение (R) между пиками 1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты и рибавирина должно быть не менее 2;

-относительное стандартное отклонение площади пика рибавирина должно быть не более 2,0 %;

-фактор асимметрии (Т), рассчитанный для пика рибавирина, должен быть не более 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы:

-соотношение сигнал/шум для пика 1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты должно быть не менее, чем 10:1;

-относительное стандартное отклонение площади пика рибавирина должно быть не более 2,0 %;

-фактор асимметрии (Т), рассчитанный для пика рибавирина, должен быть не более 2,0.

На хроматограмме испытуемого раствора не учитывают пики растворителя и пики с площадью менее или равной площади пика 1,2,4-триазол-3-карбоновой кислоты на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,05 %).

На хроматограмме испытуемого раствора рассчитывают площадь пика любой примеси (Si), сумму площадей пиков всех примесей (), сумму площадей всех пиков ().

Содержание любой примеси (Xi), общее содержание примесей (), в процентах, вычисляют по формулам:

Содержание любой примеси должно быть не более 0,5 %.

Суммарное содержание примесей должно быть не более 5,0 %.

Однородность дозирования. Определение проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» методом ВЭЖХ в условиях испытания «Количественное определение».

Испытуемый раствор. Содержимое одного флакона количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 10 мл воды, необходимое количество поверхностно активного вещества (например, 0,55 мл Тритона Х-100), помещают в термостат и выдерживают при температуре 37±3 °С в течение 35±5 мин для разрушения липосом, периодически встряхивая. Объем содержимого доводят до метки растворителем и перемешивают. Полученную суспензию разводят растворителем до получения концентрации рибавирина 0,2 мг/мл. Испытуемый раствор получают путем центрифугирования части суспензии в течение 5 мин при скорости 13400 об/мин.

Содержание рибавирина C8H12N4O5 в одном флаконе в процентах от заявленного количества (Х) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь основного пика на хроматограмме испытуемого раствора;
S0	–	площадь основного пика на хроматограмме стандартного раствора;
a0	–	навеска стандартного образца рибавирина, мг;
P	–	содержание основного вещества в стандартном образце рибавирина, %;
L	–	заявленное содержание рибавирина в одном флаконе, мг;
F	–	фактор разведения испытуемого раствора.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях определения родственных примесей.

Испытуемый раствор. Точную навеску лиофилизата, содержащую около 1 г рибавирина, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 10 мл воды, необходимое количество поверхностно активного вещества (например, 0,55 мл Тритона Х-100), помещают в термостат и выдерживают при температуре 37±3 °С в течение 35±5 мин для разрушения липосом, периодически встряхивая. Объем содержимого доводят до метки растворителем и перемешивают. 1,0 мл полученной суспензии помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем суспензии растворителем до метки, перемешивают. Испытуемый раствор получают путем центрифугирования части суспензии в течение 5 мин при скорости 13400 об/мин.

Стандартный раствор рибавирина. Около 5 мг (точная навеска) стандартного образца рибавирина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл растворителя и выдерживают в ультразвуковой бане до растворения. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора растворителем до метки и перемешивают.

Хроматографируют последовательно стандартный и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

-относительное стандартное отклонение времени удерживания и площади пика рибавирина должно быть не более 2,0 %;

-фактор асимметрии (Т), рассчитанный для пика рибавирина, должен быть не более 2,0.

-эффективность колонки (N), рассчитанная по пику рибавирина, должна быть не менее 2000 теоретических тарелок;

Содержание рибавирина C8H12N4O5 в одном флаконе в процентах от заявленного количества (Х) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика рибавирина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0	–	площадь пика рибавирина на хроматограмме стандартного раствора;
a1	–	навеска препарата, мг;
a0	–	навеска стандартного образца рибавирина, мг;
P	–	содержание основного вещества в стандартном образце рибавирина, %;
G	–	средняя масса содержимого флакона, мг;
L	–	заявленное количество рибавирина в одном флаконе, мг.

Хранение. В защищенном от света месте.