Пробиотик лактобактерий ФС
ацидофильных
поликомпонентный,
суппозитории вагинальные Взамен ВФС 42-2941-97
_________________________________________________________________
Настоящая фармакопейная статья распространяется на биотехнологический лекарственный препарат (БтЛП), пробиотик лактобактерий ацидофильных поликомпонентный, суппозитории вагинальные. Активным компонентом пробиотика является биомасса живых антагонистически активных штаммов бактерий Lactobacillus acidophilus 100аш, Lactobacillus acidophilus NK1 и Lactobacillus acidophilus К3Ш24. В одном суппозитории (дозе) препарата должно содержаться не менее 107 КОЕ лактобактерий ацидофильных.
ПРОИЗВОДСТВО
Основные этапы производства препарата:
- получение биомассы производственных штаммов бактерий Lactobacillus acidophilus 100аш, Lactobacillus acidophilus NK1 и Lactobacillus acidophilus К3Ш24 (выращивание/культивирование на оптимальной питательной среде в соответствующих условиях культивирования);
- подготовка биомассы и основы перед формированием суппозиториев (лиофилизация с последующим измельчением или концентрирование биомассы лактобактерий);
- получение готовой лекарственной формы препарата - суппозитории вагинальные на липофильной основе (формирование суппозиторной массы и ее розлив в контурную ячейковую упаковку - герметизация и маркировка). Масса суппозитория в зависимости от технологии производства от 1,1 до 2,0 г.
Используемые в процессе производства производственные штаммы должны быть охарактеризованы в объеме в соответствие с требованиями, изложенными в ОФС «Лактосодержащие пробиотики», испытания проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».
При производстве пробиотика лактобактерий ацидофильных поликомпонентного, суппозитории вагинальные проводят валидацию технологического процесса и методов контроля в соответствии с требованиями правил организации производства и контроля качества БтЛП. Стадии производственного процесса получения пробиотика лактобактерий ацидофильных поликомпонентного, суппозитории вагинальные должны быть охарактеризованы в соответствии с требованиями, изложенными в ОФС «Пробиотики».
ИСПЫТАНИЯ
Описание. Суппозитории желтовато-серого или разных оттенков бежевого цвета, конусообразной, торпедообразной или цилиндрической формы; допускается специфический запах жира и неоднородность цвета в виде вкраплений или «мраморности», возможно окрашивание кончика суппозитория от бледно-желтого до светло-коричневого цвета. Определение проводят органолептически.
Подлинность. В мазках, окрашенных по Граму, должны присутствовать грамположительные прямые бесспоровыепалочки, располагающиеся поодиночке или в виде цепочек по 2-4 и более клеток. Испытание проводят микроскопически в соответствии с ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».
Подлинность подтверждается специфической активностью (раздел «Специфическая активность»).
Время полной деформации. Не более 20 мин. Один суппозиторий помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл и добавляют 50 мл воды очищенной, прогретой до температуры (37±1) оС, колбу выдерживают в термостате при температуре (37±1) °С, время полной деформации не должно превышать 20 мин.
Средняя масса и отклонение от средней массы. Масса суппозиториев от 1,1 до 2,0 г. Отклонение от средней массы внутри одной серии:
18/20 – не более ±5 %,
2/20 – не более ±7,5%.
Суппозиториев взвешивают с точностью до 0,001 г. Определение проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм».
Специфическая безвредность. Препарат должен быть безвреден для белых мышей при пероральном введении одного суппозитория (дозы).
Определение проводят в соответствии с ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo». Тест доза испытуемого препарата содержится в объеме 1 мл на животное.
Отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов (микробиологическая чистота). Категория 5.3.Б:
В 1 суппозитории (1 доза) допускается не более 102 КОЕ аэробных бактерий. Бактерии семейства Enterobacteriaceae, бактерии рода Proteus, гемолитические бактерии, дрожжевые и плесневые грибы должны отсутствовать.
Определение на отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» методом прямого посева.
Специфическая активность. В одном суппозитории (дозе) препарата должно содержаться не менее 107 КОЕ лактобактерий ацидофильных, показатель активности кислотообразования должен быть не ниже 200 оТ. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков».
Определение количества живых бактериальных клеток в 1 суппозитории (дозе) проводят методом последовательных десятикратных разведений в 0,9 % растворе натрия хлорида с последующим высевом в обезжиренное стерильное молоко. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение специфической активности пробиотиков» (Пробирочный метод наиболее вероятных чисел (определение количества живых ацидофильных лактобактерий).
Показатель активности кислотообразования определяют методом кислотно-основного титрования (титриметрический метод). Для выращивания лактобактерий ацидофильных используют стерильное обезжиренное молоко.
Производственные штаммы и штаммы для контроля. Производственные штаммы бактерий Lactobacillus acidophilus 100аш (ВКПМ В-3190), Lactobacillus acidophilus К3Ш24 (ВКПМ В-3090) и Lactobacillus acidophilus NK1 (ВКПМ В-8957) депонированы во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) ВНИИ «Генетика» (Россия).
Производственные штаммы бактерий L. acidophilus 100аш, L. acidophilus К3Ш24 и L. acidophilus NK1 по биологическим и биохимических свойствам должны соответствовать требованиям ОФС «Лактосодержащие пробиотики». Испытания проводят согласно ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков», ОФС «Безопасность пробиотиков в тестах in vivo», ОФС «Определение специфической активности пробиотиков», ОФС «Микробиологическая чистота».
Используемые для контроля штаммы бактерий депонированы в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов, Россия (ГКПМ): Shigella sonnei 5063 (депозит № 000); S. flexneri 337 (депозит № 000), 170 (депозит № 000); Escherichia. coli 157 (депозит № 000); Proteus mirabilis H-237 (депозит № 000), P. vulgaris 177 (депозит № 000); Staphylococcus aureus FDA 209-Р = ATCC 6538-Р (депозит № 000). Тест-штаммы должны соответствовать требованиям ОФС «Производственные пробиотические штаммы и штаммы для контроля пробиотиков».
Контроль качества производственных пробиотических штаммов и штаммов для контроля пробиотиков проводится не реже 1 раза в год.
Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».
Транспортирование и хранение. При температуре от 2 до 8 оС в соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств».
