ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
Тиамина нитрат ФС
Тиамин
Thiamini nitras Вводится впервые
3-[(4-Амино-2-метилпиримидин-5-ил)метил]-5-(2-гидроксиэтил)-4-метил-1,3-тиазол-3-ий нитрат
C12H17N5O4S | М. м. 327,36 |
Содержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % тиамина нитрата C12H17N5O4S в пересчёте на сухое вещество.
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или мелкие бесцветные кристаллы.
Растворимость. Умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в хлороформе.
Подлинность. 1. ИК-спектр. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца тиамина нитрата.
2. Качественная реакция. К 1 мл 2 % раствора субстанции прибавляют 0,5 мл 10 % раствора калия феррицианида и 5 мл 2-бутанола. При УФ-облучении сверху на поверхности раствора при определённом угле к лучам наблюдается выраженная синяя флуоресценция, исчезающая при подкислении раствора и возвращающаяся при его подщелачивании.
3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на нитраты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
*Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей»).
*Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).
рН. От 6,7 до 7,6 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ.
цетонитрил – метанол 2:3.
0,005 М раствор натрия октансульфоната в уксусной кислоте, разведённой водой 1:100.
Подвижная фаза: Раствор А – раствор Б 40:60.
Раствор внутреннего стандарта. Около 200 мг (точная навеска) метилбензоата помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.
Испытуемый раствор. Около 0,1 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.
Раствор сравнения А. 1,0 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём ПФ до метки.
Раствор сравнения Б. Около 50 мг (точная навеска) стандартного образца тиамина гидрохлорида помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. 20,0 мл полученного раствора и 5,0 мл раствора внутреннего стандарта помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора ПФ до метки.
Хроматографические условия
Колонка | 150 Ч 4,0 мм, октадецилсиликагель (C18), 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |
Скорость потока | 0,75 мл/мин; |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |
Объём пробы | 10 мкл. |
Хроматографируют растворы сравнения А и Б и испытуемый раствор.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б:
- разрешение (R) между пиками тиамина и метилбензоата должно быть не менее 4,0;
- фактор асимметрии пика (AS) тиамина должен быть не более 2,0;
- относительное стандартное отклонение отношений площади пика тиамина к площади пика метилбензоата должно быть не более 2,0 % (6 определений);
- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику тиамина, должна составлять не менее 1500 теоретических тарелок.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %).
Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).
Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.
Тяжелые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2, в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.
*Бактериальные эндотоксины. Не более 3,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции 50 мг/мл, а затем разбавляют его не менее чем в 1000 раз для ЛАЛ-реактива с чувствительностью 0,03 ЕЭ/мл.
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Количественное определение. Около 0,15 г (точная навеска) субстанции растворяют в 5 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 50 мл уксусного ангидрида и сразу титруют при интенсивном перемешивании 0,1 М раствором хлорной кислоты.
Конечную точку титрования определяют потенциометрически.
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 16,37 мг тиамина нитрата C12H17N5O4S.
Хранение. В плотно закрытой упаковке в защищенном от света месте при температуре не выше 25 °С.
*Контроль по показателям качества «Прозрачность раствора», «Цветность раствора» и «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.
