Основа агара Миддлбрука 7H11
Middlebrook 7H11 Agar Base / without Malachite Green
Основа агара Миддлбрука 7H11 / без малахитового зеленого
| M511/M511А
|
Основа агара Миддлбрука 7Н11 с добавкой рекомендуется для выделения, культивирования и тестирования чувствительности микобактерий.
Состав**:
Ингредиенты
| M511 грамм/литр
| M511A грамм/литр
| Ферментативный гидролизат казеина
| 1,00
| 1,00
| Аммония сульфат
| 0,50
| 0,50
| L-Глутаминовая кислота
| 0,50
| 0,50
| Калия дигидрофосфат
| 1,50
| 1,50
| Натрия гидрофосфат
| 1,50
| 1,50
| Натрия сульфат
| 0,40
| 0,40
| Железа аммонийного цитрат
| 0,04
| 0,04
| Магния сульфат
| 0,05
| 0,05
| Пиридоксин
| 0,001
| 0,001
| Биотин
| 0,0005
| 0,0005
| Малахитовый зеленый
| 0,001
| –
| Агар-агар
| 15,00
| 15,00
| Конечное значение рН (при 25°С) 6,6 ± 0,2
| | |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 10,25 г порошка в 450 мл дистиллированной воды, содержащей 2,5 мл глицерина. Прокипятить до полного растворения компонентов среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (1210С) в течении 15 мин. Охладить до 500С. Асептически добавить содержимое одного флакона добавки FD018 (Middlebrook OADC Growth Supplement).
Принцип и оценка результата:
Среда 7Н11 является модификацией среды 7Н10 (1). Кон (2) показал, что добавление гидролизата казеина существенно улучшает рост большинства штаммовM. tuberculosis и особенно помогает при определении чувствительности к противотуберкулезным препаратам (3).
Среда содержит много неорганических ионов, способствующих росту микобактерий. Глицерин является источником углерода и энергии.
Добавка OADC (FD018) содержит олеиновую кислоту, альбумин, хлорид натрия, глюкозу и каталазу. Олеиновая кислота и другие высокомолекулярные жирные кислоты метаболизируются микобактериями, глюкоза используется как источник энергии. Каталаза нейтрализует токсическое воздействие перекисей, альбумин предохраняет туберкулезные бациллы от влияния других токсичных агентов. Малахитовый зеленый частично ингибирует сопутствующую флору.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок светло-зеленого (М511) и желтого (М511А) цвета.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5% агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Светлого янтарного цвета, слегка опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком.
Кислотность среды:
При 250С водный раствор (2,05% вес/об), содержащий 0,5% глицерина, имеет pH 6,6+0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 2-4 недели при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
| Рост
| M. tuberculоsis H37 Rv (25618)
| Обильный или хороший
| M. smegmatis (14468)
| Обильный или хороший
| M. fortuitum (6841)
| Обильный или хороший
|
Ссылки:
1.Middlebrook and Cohn, 1958, Am. J. Public Health, 48:844.
2.Cohn et al, 1968, Am. Rev. Resp. Dis., 98:295.
3.MacFaddin J. F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Maintenance of Medical Bacteria, Vol.1, Williams and Wilkins, Baltimore.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже 25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре 2…8°С.
|
