EMB Agar (Levine) / Agar Base Агар Левина / Основа агара Левина | M022 / M301 |
Эту среду рекомендуют для выделения, подсчета и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов кишечной группы.
Состав**: |
Ингредиенты | М022 грамм/литр | М301 грамм/литр |
Пептический перевар животной ткани Калия гидрофосфат Лактоза Эозин Y Метиленовый синий Агар-агар Конечное значение рН (при 25єС) | 10,00 2,00 10,00 0,40 0,065 15,00 7,1 ± 0,2 | 10,00 2,00 – 0,40 0,065 15,00 7,3 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление: |
Размешать 37,5 г порошка М022 или 27,5 г порошка М301 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Добавить соответствующий углевод к Основе агара Левина (М301) перед стерилизацией. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121єС) в течение 15 мин. НЕ ДОПУСКАТЬ ПЕРЕГРЕВАНИЯ СРЕДЫ. Остудить до 50єС и встряхнуть для окисления метиленового синего (чтобы восстановить его синий цвет и размешать хлопьевидный преципитат). Если среда используется в тот же день, ее можно не автоклавировать.
Предупреждение: среду надо хранить в темноте, чтобы не допустить ее окисления на свету.
Принцип и оценка результата: |
Эта среда разработана Levine (1, 2) и используется для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes, а также для быстрой идентификации грибов Candida albicans. Американские специалисты рекомендуют эту среду для выделения, подсчета и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов кишечной (колиформной) группы (3, 4, 5).
Метиленовый синий и эозин в определенной степени подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Данные красители служат в качестве дифференцирующими индикаторами ферментации лактозы. На этой среде могут вырастать в виде точечных колоний дрожжи и некоторые грамположительные бактерии, например, энтерококки. Weld (6, 7) предложил использовать агар Левина с добавлением хлортетрациклина гидрохлорида для быстрой идентификации грибов Candida albicans в клиническом материале. Обнаружение этих грибов в таком материале, как фекалии, оральный и вагинальный секрет, ногти, чешуйки кожи и другом возможно через 24-48 ч инкубирования при 35-37єС в атмосфере, содержащей 10% углекислого газа. Однако культуральные свойства грибов при этом варьируют.
Контроль качества: |
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-лиловый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет красновато-лиловую окраску, опалесцирует с зеленоватым оттенком и легким преципитатом, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25єС водный раствор М022 (3,75% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2, водный раствор М301 (2,75% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35-37єС.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) Escherichia coli (25922) Pseudomonas aeruginosa (27853) Salmonella typhimurium (14028) *Candida albicans (10231) Enterobacter aerogenes (13048) Staphylococcus aureus (25923) Saccharomyces cerevisiae (9763) Enterococcus faecalis (29212) | Рост Обильный Обильный Обильный Хороший или обильный Хороший Слабый или отсутствует Слабый или отсутствует Подавляется | Цвет колоний на среде М317 Черно-синие с металлическим блеском Бесцветные Бесцветные Бесцветные Розовые или красные Бесцветные Кремовые – |
Примечание: * = в атмосфере с 10% углекислого газа;
Ссылки: |
Условия и сроки хранения: |
Порошок хранить при температуре ниже +25єС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8єС в темноте.
