Показано, что однократное введение интактным крысам фитоуросепта и эксабола в указанных дозах сокращает время снижения тромбопластин-тромбиновой активности в 2 – 2,5 раза и повышает индекс инактивации тромбопластина и тромбина в 3 – 10 раза соответственно. Введение крысам нефрофита удлиняет время образования фибринового сгустка, что указывает на их фибринолитические свойства.
С использованием модели односторонней нефрэктомии показано, что под влиянием курсового введения нефрофита и фитоуросепта в экспериментально-терапевтических дозах наблюдается повышение концентрации РНК на 124% и 20%, соответственно, и общего белка в гомогенате оставшейся почки, что сопровождается развитием ее компенсаторной гипертрофии.
Установлено, что испытуемые средства обладают существенным иммуномодулирующим потенциалом, обеспечивая повышение показателей иммунных реакций организма при иммунодепресивных состояниях. В частности, при азатиоприновой иммуносупрессии фитоэкстракты способствовали активации основных звеньев иммунного ответа организма на 36 – 100%, уменьшали выраженность инволюции иммунокомпетентных органов, повышали активность клеточно-опосредованной реакции, макрофагального звена иммунитета на 54 – 60%. Показано также, что нефрофит не обладает митогенной активностью, ингибирует спонтанную и Кон-А стимулированную пролиферацию лимфоцитов, а также ингибирует бласттрансформацию лимфоцитов (в концентрациях 75-300 мкг/мл) до полного угнетения. В то же время, данный фитоэкстракт в малых концентрациях от 0,3 до 3,0 мкг/мл повышает цитотоксическую активность мононуклеарных клеток крови, что свидетельствует о наличии у нефрофита значительного иммуномодулирующего потенциала. Аналогичные данные получены и в отношении эксабола: его внесение в модельную систему в концентрации 100 мкг/мл приводило к достоверному подавлению пролиферации Т-лимфоцитов на 28%. При этом установлено, что из исследованных средств только фитоуросепт проявляет иммуностимулирующую активность, поскольку под его влиянием возрастала стимулированная конканавалином-А и липополисахаридом пролиферативная активность лимфоцитов на 30 и 50%.
Испытуемые средства оказывали выраженное стресспротективное действие: их введение животным на фоне иммобилизационного стресса препятствовало развитию катаболических изменений во внутренних органах белых крыс. У животных опытных групп наблюдали уменьшение выраженности инволюции тимуса, гипертрофии надпочечников и развитие деструкций в слизистой оболочке желудка.
Указанные средства значимо снижали гемолиз эритроцитов, индуцированный реактивом Фентона (табл. 4). При этом, наиболее выраженное мембраностабилизирующее действие проявляет нефрофит, уменьшая выраженность перекисного гемолиза в 3 раза по сравнению с контролем. Поскольку известно, что реактив Фентона индуцирует перекисное окисление липидов, можно полагать, что мембранопротекторное действие фитосредств обусловлено их способностью ингибировать процессы свободнорадикального окисления биомакромолекул, что было подтверждено далее в отдельной серии экспериментов.
Таблица 4
Влияние фитосредств на гемолиз эритроцитов
Условия опыта | Концентрация, мг/мл | Перекисный гемолиз, % | Осмотический гемолиз, % |
Контроль (гемолиз) | - | 86,0 ± 1,5 | 84,0 ± 4,0 |
Гемолиз+нефрофит | 1,5 | 25,0 ± 1,0* | 55,0 ± 1,0* |
Гемолиз +фитоуросепт | 0,5 | 57,0 ± 2,8* | 91,0 ± 4,0 |
Гемолиз +эксабол | 1,0 | 32,0 ± 3,0* | 82,0 ± 6,0 |
В частности, о наличии у фитосредств антиоксидантной активности свидетельствуют полученные данные об их способности существенно снижать скорость генерации супероксидного анион-радикала (.О2-) в модельной системе: уровень их перехвата составил 50% - 90 %. Принимая во внимание, что. O2 - является пусковым звеном свободнорадикальных реакций, можно полагать, что фенольные соединения, входящие в состав фитоэкстрактов, обладая антирадикальной активностью по отношению к. O2 - , предотвращают их развитие уже на начальной стадии процесса. Также, с использованием модельных систем показано, что ингибирование процессов СРО под их влиянием связано с наличием достаточно высокой восстанавливающей способности, сопоставимой с таковой у классического антиоксиданта – ионола, что свидетельствует о наличии высокой общей антиоксидантной емкости. Испытуемые сухие экстракты оказывают антирадикальное действие по отношению к радикалам дифенилпикрилгидразина (ДФПГ) и оксида азота (NO). При этом наиболее выраженная активность выявлена для эксабола, его антирадикальные и хелатирующие свойства были близки к таковым у ионола. Подтверждением антирадикального механизма действия указанных средств служили данные об их ингибирующем влиянии на кинетику Fe2+- индуцированной хемилюминесценции, что выражалось в уменьшении амплитуды «быстрой вспышки» в среднем в 2 раза, а также предотвращении «медленной вспышки». При этом отмечен дозозависимый эффект: с увеличением концентрации испытуемых средств их эффективность повышается до определенных значений, а при дальнейшем повышении концентрации – снижается, что свойственно для истинных антиоксидантов, например, альфа-токоферола. Под влиянием фитосредств повышалась активность ферментов антиоксидантной защиты: каталазы, супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы. Показано, что антиоксидантное действие испытуемых средств связано также с их способностью связывать металлы переменной валентности, в частности, ионы железа и, тем самым, ограничивать развитие свободнорадикальных процессов. Наиболее выраженное хелатирующее действие, превосходящее таковое у аскорбиновой кислоты, установлено в отношении эксабола.
Выявлено стимулирующее влияние нефрофита и фитоуросепта на энергетический обмен клеток, о чем свидетельствует более чем двукратное повышение активности пируваткиназы под их влиянием. Показано также, что курсовое введение нефрофита на фоне ишемии-реперфузии почек сопровождается повышением уровня АТФ в ишемизированных почках животных на 30% по сравнению с контролем, что свидетельствует об активации ресинтеза АТФ под его влиянием.
Курсовое введение нефрофита и эксабола в экспериментально-терапевтических дозах на фоне ишемии-реперфузии почек животных сопровождается снижением выраженности индуцированного апоптоза, о чем свидетельствует снижение активности каспазы-3, сопоставимое с действием специфического ингибитора этого фермента Ac-DEVD-CHO (табл. 5).
Таблица 5
Влияние нефрофита на активность каспазы-3 при ишемических повреждениях почек у белых крыс
Группы животных | Активность каспазы-3, пмоль/мин/мг белка | |||
1 ч | 4 ч | 8 ч | 16 ч | |
Ложнооперированная | 2,40 ± 0,13 | |||
Контр. (ишемия) | 7,2 ± 1,04 | 14,7 ± 1,18 | 36,6 ± 3,05 | 36,2 ± 2,46 |
Контр. (ишемия + ингибитор) | 4,3 ± 0,34 | 5,0 ± 1,31 | 14,0 ± 1,56 | 19,6 ± 2,83 |
Опытная (ишемия+нефрофит) | 3,4 ± 0,23* | 8,5 ± 1,75* | 21,5 ± 1,10* | 29,1 ± 2,21 |
Исследование фармакотерапевтической эффективности
растительных средств
Исследование проведено с использованием моделей повреждения почек токсической, ишемической, лекарственной, иммунной и бактериальной этиологии. Введение животным водных растворов испытуемых средств осуществляли в соответствии с условиями эксперимента интрагастрально курсами в экспериментально – терапевтических дозах: нефрофит – 150 мг/кг, фитоуросепт – 50 мг/кг, эксабол – 100 мг/кг 1 раз в сутки в объеме 10 мл/кг. Препаратами сравнения служили леспенефрил и канефрон, которые вводили животным в изоэффективных дозах по аналогичным схемам. Установлено, что курсовое введение нефрофита в дозе 150 мг/кг при нефропатии ишемической этиологии оказывает выраженное нефропротекторное влияние (табл. 6.).
Как следует из данных таблицы 6, двусторонняя ишемия почек сопровождается развитием выраженной азотемии, снижением диуреза и СКФ, а также индукцией процессов СРО и снижением активности эндогенной антиокислительной системы.
Курсовое введение крысам нефрофита в экспериментально – терапевтической дозе 150 мг/кг сопровождалось существенным уменьшением выраженности азотемии во все сроки наблюдения. Наряду с этим, введение животным экстракта способствовало повышению СКФ и диуретической функции почек. Диурез у животных опытной группы на 1 и 3 сутки опыта возрос на% , а СКФ увеличивалась в 2 и 1,5 раза по сравнению с таковой у крыс контрольной группы. Введение нефрофита крысам оказывало также выраженное антиоксидантное действие. Так, на 1 и 3 сутки исследования концентрации ДК и ТБК-активных продуктов в крови, а также в гомогенате почек крыс, получавших испытуемый фитоэкстракт, снижались в среднем на% по сравнению с аналогичными показателями у крыс контрольной группы.
Таблица 6
Влияние нефрофита на показатели функционального состояния почек и активности процессов СРО при постишемической нефропатии у крыс
Показатели | Группы животных | |||
Интактная | Контрольная (ишемия) | Опытная 1 (ишемия + нефрофит) | Опытная 2 (ишемия + леспенефрил) | |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
1 сутки | ||||
Креатинин, сыв. кр. мкмоль/л | 87,9 ± 2,45 | 224,4 ± 26,02 | 131,9 ± 6,55* | 145,3 ± 11,5* |
Мочевина сыв. кр., ммоль/л | 7,5 ± 0,34 | 33,1 ± 3,43 | 14,8 ± 0,85* | 13,5 ± 1,25* |
СКФ, мкл/мин | 538,5 ± 48,00 | 108,8 ± 7,62 | 216,1 ± 14,85* | 232,0 ± 25,3* |
Диурез, мл/100г/ч | 0,37 ± 0,036 | 0,13 ± 0,002 | 0,23 ± 0,026* | 0,27 ± 0,016* |
МДА в гомог. почек, нмоль/г | 14,7 ± 0,83 | 38,6 ± 1,40 | 24,3 ± 1,11* | 23,5 ± 1,35* |
МДА в сыв. кр., мкмоль/мл | 2,10 ± 0,11 | 3,90 ± 0,16 | 2,40 ± 0,08* | 2,30 ± 0,13* |
ДК в сыв. кр., усл. ед. | 1,40 ± 0,05 | 4,50 ± 0,38 | 2,70 ± 0,15* | 3,30 ± 0,28 |
Каталаза, мкат/л | 4,1 ± 0,31 | 2,1 ± 0,10 | 3,3 ± 0,20* | 2,9 ± 0,27 |
3 сутки | ||||
Креатинин сыв. кр., мкмоль/л | 87,9 ± 2,45 | 167,7 ± 18,30 | 122,0 ± 10,04* | 112 ± 8,33* |
Мочевина сыв. кр., ммоль/л | 7,5 ± 0,34 | 24,9 ± 4,42 | 11,9 ± 1,12* | 15,6 ±1,25* |
СКФ, мкл/мин | 538,5 ± 48,00 | 238,6 ± 21,14 | 348,4 ± 34,40* | 332,7 ± 25,4* |
Диурез, мл/100г/ч | 0,40 ± 0,036 | 0,13 ± 0,006 | 0,27 ± 0,016* | 0,23 ± 0,008* |
МДА в гомог. почек нмоль/г | 15,5 ± 1,09 | 31,0 ± 2,21 | 14,5 ± 0,83* | 18,0 ± 2,25* |
МДА в сыв. кр., мкмоль/мл | 2,41 ± 0,18 | 4,40 ± 0,21 | 2,95 ± 0,15* | 3,36 ± 0,28 |
ДК в сыв. кр., усл. ед. | 1,3 ± 0,06 | 4,6 ± 0,56 | 2,0 ± 0,07* | 3,2 ± 0,25* |
Каталаза, мкат/л | 4,1 ± 0,31 | 2,4 ± 0,10 | 3,8 ± 0,30* | 3,20± 0,33* |
7 сутки | ||||
Креатинин сыв. кр., мкмоль/л | 87,9 ± 2,45 | 114,6 ± 9,43 | 78,9 ± 2,46* | 90,5 ± 7,33 |
Мочевина сыв. кр., ммоль/л | 7,5 ± 0,34 | 28,0 ± 1,55 | 9,3 ± 1,08* | 11,4 ± 0,74 |
СКФ, мкл/мин | 538,5 ± 48,00 | 406,5 ± 36,60 | 537,0 ± 40,90* | 487,0 ± 34,40 |
Диурез мл/100г/ч | 0,40 ± 0,036 | 0,37 ± 0,01 | 0,41 ± 0,036 | 0,36 ± 0,040 |
МДА в гомог. почек, нмоль/г | 14,9 ± 0,75 | 14,5 ± 0,1,03 | 14,8 ± 0,61 | 13,7 ± 1,45 |
МДА в сыв. кр., мкмоль/мл | 2,4 ± 0,18 | 3,7 ± 0,32 | 2,4 ± 0,08* | 3,3 ± 0,35 |
ДК в сыв. кр., усл. ед. | 1,3 ± 0,06 | 2,6 ± 0,18 | 1,6 ± 0,09* | 1,8 ± 0,12* |
Каталаза, мкат/л | 4,1 ± 0,34 | 3,2 ± 0,30 | 4,0 ± 0,20* | 3,8± 0,23 |
Наряду с этим, наблюдали повышение активности антиоксидантной системы организма, на что указывало повышение каталазной активности сыворотки крови в среднем на 43 % по сравнению с показателями у крыс контрольной группы на 1 сутки эксперимента с нормализацией этого показателя на 3 сутки опыта. Патоморфологические исследования показали, что на фоне введения белым крысам нефрофита в почках наблюдаются менее выраженные дистрофические и некротические изменения структур нефронов по сравнению с контролем, характеризующиеся зернистой дистрофией клеток проксимальных канальцев, некрозом и десквамацией единичных эпителиальных клеток в просвет канальцев.
При этом испытуемый фитоэкстракт не уступал, а по некоторым показателям превосходил препарат сравнения - леспенефрил.
Исследование фармакотерапевтической эффективности нефрофита при нефропатиях, вызванных лекарственными препаратами (аминогликозидами, нестероидными противовоспалительными средствами, комплексом туберкулостатических средств, рентгенконтрастным веществом) показало, что независимо от механизма их повреждающего действия наблюдается развитие процессов СРО биомакромолекул, регистрируемых по динамике накопления их метаболитов в сыворотке крови и гомогенате почек животных. В таблице 7 представлены данные о влиянии нефрофита на течение нефропатии, вызванной канамицином.
Как следует из данных табл. 7, при введении крысам канамицина в максимальной терапевтической дозе развивается характерный симптомокомплекс, свойственный нефропатиям, который сопровождается активацией процессов СРО, снижением возможностей эндогенной антиоксидантной системы. Курсовое введение нефрофита на фоне канамицинового повреждения почек крыс оказывало выраженное нефропротекторное влияние, о чем свидетельствовало повышение диуретической, экскреторной и салуретической функций. Так, на 8 и 15 сутки опыта экскреция белка с мочой у животных уменьшалась на 68 % и в 3,2 раза соответственно; СКФ повышалась на 52 и 64 %; диурез на 32 и 55 %, концентрация катионов калия и натрия в моче повышалась в 1,9 и 3,2 раза соответственно по сравнению с аналогичными данными у животных контрольной группы. На фоне введения нефрофита наблюдали снижение выраженности процессов СРО и повышение активности ферментов антиоксидантной защиты.
Таблица 7
Влияние нефрофита на течение нефропатии у крыс, вызванной канамицином
Показатели | Группы животных | |||
Интактная | Контрольная (канамицин) | Опытная 1 (канамицин + нефрофит) | Опытная 2 (канамицин +канефрон) | |
3 сутки | ||||
Креатинин сыв. кр., мкмоль/л | 57,0±3,03 | 63,3±3,79 | 59,2±3,07 | 63,1±4,72 |
Мочевина сыв. кр., ммоль/л | 5,4±0,46 | 6,9±0,61 | 6,1±0,49 | 6,7±0,47 |
МДА в сыв. кр., мкмоль/мл | 5,2±0,33 | 8,7±0,81 | 5,9±0,73* | 7,3±0,45 |
ДК в сыв. кр., усл. ед. | 5,8±0,67 | 14,5±1,69 | 8,7±8,43* | 11,0±1,19 |
Каталаза, мкат/л | 8,8±0,69 | 10,0±0,61 | 12,1±0,73* | 11,2±1,85 |
МДА в гомогенате, нмоль/г | 2,4±0,15 | 4,6±0,51 | 3,1±0,29* | 4,0±0,38 |
СОД, мкмоль/л | 19,2±1,37 | 17,5±1,68 | 19,0±1,75 | 17,9±2,01 |
8 сутки | ||||
Креатинин сыв. кр., мкмоль/л | 54,0±5,12 | 87,5±2,03 | 69,5±3,44* | 84,0±4,19 |
Мочевина сыв. кр., ммоль/л | 5,2±0,28 | 9,1±0,92 | 6,2±0,81* | 6,7±0,94 |
СКФ, мкл/мин | 84,9±7,31 | 45,3±3,72 | 68,9±4,11* | 51,7±4,35 |
Диурез, мл/100г/ч | 0,71±0,06 | 0,54±0,03 | 0,72±0,025* | 0,69±0,03 |
Белок в моче, г/л | 1,02±0,52 | 3,49±0,43 | 1,12±0,17* | 1,83±0,17 |
МДА в сыв. кр., мкмоль/мл | 4,2±0,21 | 6,0±0,22 | 4,4±0,19* | 5,3±0,27 |
МДА в гомогенате, нмоль/г | 2,4±0,15 | 5,7±0,29 | 4,1±0,26* | 4,9±0,42 |
ДК в сыв. кр., усл. ед. | 5,9±0,48 | 12,6±1,34 | 8,5±0,81* | 10,1±0,95 |
Каталаза, мкат/л | 8,3±0,49 | 5,8±0,57 | 7,2±0,48* | 6,1±0,54 |
СОД, мкмоль/л | 27,0±1,50 | 19,3±1,52 | 24,9±1,31* | 17,8±1,64 |
15 сутки | ||||
Креатинин сыв. кр., мкмоль/л | 54,0±5,12 | 304,7±24,51 | 176,3±16,99* | 262,0±31,01 |
Мочевина сыв. кр., ммоль/л | 5,2±0,28 | 23,1±2,06 | 12,2±1,08* | 20,3±1,72 |
СКФ, мкл/мин | 84,9±7,31 | 13,9±1,49 | 22,9±3,78* | 16,8±1,67 |
Диурез, мл/100г/ч | 0,7±0,06 | 0,4±0,03 | 0,68±0,04* | 0,65±0,03 |
К+ в моче, мг/мл | 2,9±0,17 | 1,3±0,14 | 2,5±0,20* | 2,1±0,17 |
Na+ в моче, мг/мл | 1,0±0,08 | 0,24±0,04 | 0,77±0,07* | 0,51±0,08 |
Белок в моче, г/л | 1,0±0,52 | 4,5±3,85 | 1,4±0,08* | 4,0±3,20 |
МДА в сыв. кр., мкмоль/мл | 4,2±0,33 | 8,8±0,93 | 5,3±0,21* | 7,3±0,39 |
МДА в гомогенате, нмоль/г | 5,4±0,31 | 15,3±1,24 | 9,0±0,85* | 13,0±1,2 |
ДК в сыв. кр,. усл. ед. | 5,9±0,48 | 20,7±0,87 | 13,2±0,76* | 18,2±1,12 |
Каталаза, мкат/л | 8,3±0,49 | 3,6±0,17 | 5,5±0,21* | 4,7±0,19 |
СОД, мкмоль/л | 27,0±1,60 | 15,6±1,39 | 22,2±2,31* | 18,0±0,91 |
Так, через 8 и 15 суток отмечалось снижение концентрации ДК в сыворотке крови на 33 и 36 %, концентрации ТБК-активных продуктов в крови и гомогенате почек белых крыс - на 26 и 40 % и на 28 и 41 %, соответственно, по сравнению с показателями у крыс контрольной группы. На 8 сутки наблюдения активность каталазы и СОД в крови повышалась по сравнению с контролем на 23 и 29 % соответственно; при введении нефрофита через 15 суток – на 54 и 42 %. Патоморфологические исследования показали, что при курсовом введении нефрофита в корковом слое почек отсутствовали очаги вакуольной и гидропической дистрофии. В цитоплазме клеток канальцев выявлялась лишь зернистая дистрофия, значительно снижалась круглоклеточная инфильтрация, не просматривались участки кальцинозов в отличие от таковых показателей у животных контрольной группы. При этом установлено, что фармакотерапевтическая эффективность нефрофита при канамициновом повреждении почек значительно превосходит таковую у канефрона.
Аналогичное влияние нефрофита в дозе 150 мг/кг отмечено при лекарственных нефропатиях у крыс, вызванных введением бруфена, комплекса противотуберкулезных средств (изониазида, рифампицина и пиразинамида) и в/в введением урографина. Курсовое введение этого средства способствовало восстановлению функционального состояния почек на более ранних сроках патологического процесса, ингибированию процессов СРО и повышению потенциала эндогенной антиоксидантной системы организма.
Исследование фармакотерапевтической эффективности нефрофита при гепаторенальном синдроме показало, что его курсовое введение в дозе 150 мг/кг оказывало выраженное нефропротекторное влияние во все сроки эксперимента. Так концентрация мочевины и креатинина в сыворотке крови животных опытной группы была достоверно ниже, чем в контроле. Наблюдали повышение СКФ от 2 до 20 раз и диуреза соответственно от 1,5 до 2,0 раз по отношению к контролю. К окончанию эксперимента (21 сутки) у крыс опытной группы показатели функциональной состоятельности почек соответствовали физиологической норме, тогда как у животных контрольной группы СКФ и диурез оставались достоверно сниженными. Наряду с этим, введение крысам нефрофита сопровождалось уменьшением выраженности нарушений функциональной состоятельности печени животных, о чем свидетельствовало статистически значимое снижение активности трансаминаз, щелочной фосфатазы в сыворотке крови и повышение концентрации гликогена в печени на фоне уменьшения интенсивности СРО. Так, на 7 сутки опыта концентрации ДК и ТБК-активных продуктов у белых крыс, получавших испытуемое фитосредство, снижались в среднем на 20 %, а активность каталазы крови на 54% возрастала по сравнению с аналогичными показателями у животных контрольной группы. На 21 сутки опыта у животных опытной группы наблюдали практически нормализацию указанных показателей ПОЛ, тогда как у крыс контрольной группы эти показатели были достоверно выше, чем у интактных животных. При патоморфологическом исследовании почек белых крыс установлено, что под влиянием нефрфофита структурные изменения характеризуются менее выраженной, чем в контроле дилатацией капсулярного пространства клубочков и просвета канальцев, очаговой гидропической и белковой дистрофией клеток проксимальных и дистальных канальцев, десквамацией щеточной каймы в просвет канальцев.
Исследование фармакотерапевтической эффективности нефрофита при экспериментальном гломерулонефрите у крыс показало, что его введение крысам опытной группы в дозе 150 мг/кг оказывает выраженное нефропротекторное влияние, заключающееся в снижении концентрации креатинина и мочевины в сыворотке крови на 12 и 49% соответственно, увеличении диуреза в 2,7 раза и скорости клубочковой фильтрации на 118%, снижении протеинурии на 39%, количества лейкоцитов и эритроцитов в моче в 2 и 5,3 раза соответственно по сравнению с показателями в контрольной группе. Под влиянием испытуемого средства у животных наблюдали нормализацию липидного состава крови: содержания ТГ и ЛПНП снижались соответственно на 30 и 43%, а ЛПОНП - более чем в 2 раза, содержание ЛПВП повышалось на 55%, в результате чего коэффициент атерогенности был ниже чем в контрольной группе почти в 2 раза. Также под влиянием испытуемого средства у животных достоверно снижается активность окислительных процессов, на что указывало снижение содержания продуктов пероксидации в сыворотке крови и гомогенате коркового слоя почек более чем в 2 раза, повышение содержания восстановленного глутатиона и активности каталазы в сыворотке крови. Также отмечено иммуномодулирующее действие нефрофита с нормализацией показателей гуморального и клеточного звеньев иммунного ответа организма. У животных опытной группы наблюдали снижение содержания IgМ, IgG и IgA соответственно на 34,7, 19,2 и 22,5 %, уменьшение количества циркулирующих иммунных комплексов в крови – в 1,6 раза и повышение фагоцитарной активности нейтрофилов в среднем на 21,0 % по сравнению с аналогичными показателями в контроле.
Курсовое введение нефрофита крысам в дозе 150 мг/кг на фоне сулемовой нефропатии сопровождалось достоверным снижением уровня азотистых метаболитов в сыворотке крови и уменьшением протеинурии во все сроки наблюдения. Также под влиянием испытуемого средства наблюдали статистически значимое повышение диуреза, салуреза и скорости клубочковой фильтрации. Анализ динамики накопления продуктов пероксидации липидов показал, что введение нефрофита крысам сопровождается значительным снижением концентраций ДК и ТБК-активных продуктов, повышением активности каталазы по сравнению с данными в контрольной группе животных. При патоморфологическом исследовании на фоне введения нефрофита наблюдали увеличение площади и гиперклеточность клубочков, обусловленные умеренной пролиферацией и набуханием эндотелиальных клеток, присутствием нейтрофилов в просвете капиллярных петель, незначительной пролиферацией мезангиальных клеток. Морфометрические исследования показали, что средний размер клубочков на фоне введения животным нефрофита уменьшается на 12 %, количество мезингиальных клеток в клубочке - на 15 % по сравнению с таковыми у животных контрольной группы. Площадь мочевого пространства клубочка не отличалась от таковой у животных интактной группы.
При этом нефропротекторное влияние нефрофита по многим показателям превосходило таковое у препарата сравнения леспенефрила.
Исследование фармакотерапевтической эффективности фитоуросепта было проведено с использованием моделей повреждения почек ишемической, бактериальной этиологии и при гепаторенальном синдроме у крыс. Данные о влиянии испытуемого средства на функциональное состояние почек при колибациллярном пиелонефрите у крыс приведены в таблице 8.
Как следует из данных, приведенных в таблице, 8 курсовое введение фитоуросепта в экспериментально – терапевтической дозе 50 мг/кг сопровождается повышением диуреза на 7 сутки эксперимента на 30 % по сравнению с контролем и восстановлением данного показателя до уровня физиологической нормы на 14 сутки, тогда как у крыс контрольной группы диурез оставался достоверно ниже, чем у интактных животных. Также, на 14 сутки опыта у животных опытной группы отмечалась нормализация содержания азотистых метаболитов в сыворотке крови и достоверное уменьшение протеинурии. Под влиянием фитоуросепта наблюдали торможение процессов СРО и активацию эндогенной антиокислительной системы, о чем свидетельствует снижение содержания ТБК-активных продуктов, повышение активности каталазы в крови животных опытной группы.
Таблица 8
Влияние фитоуросепта на функциональное состояние
почек при колибациллярном пиелонефрите у белых крыс
Показатели | Группы животных | |||
Интактная | Контрольная (пиелонефрит) | Опытная 1 (пиелонефрит+ фитоуросепт) | Опытная 2 (пиелонефрит+отвар толокнянки) | |
7 сутки | ||||
Диурез, мл/100 г/ч | 0,45±0,03 | 0,27±0,01 | 0,35±0,02* | 0,35±0,03* |
Na+ в моче, мг/мл | 0,56±0,09 | 0,36±0,09 | 0,41±0,02 | 0,41±0,03 |
K+ в моче, мг/мл | 2,1±0,35 | 1,9±0,12 | 1,9±0,09 | 1,9±0,09 |
Мочевина в сыворотке, ммоль/л | 4,6±0,32 | 7,7±0,55 | 5,1±0,46* | 5,3±0,38* |
Креатинин в сыворотке, мкмоль/л | 48,3±3,66 | 90,0±8,25 | 63,5± 5,80* | 70,6±6,25 |
Белок в моче, г/л | 0,6±0,04 | 1,3±0,09 | 0,9±0,06 | 1,1±0,06 |
МДА, мкмоль/мл мин | 1,1+0,09 | 2,1±0,16 | 1,7±0,098* | 1,9 ± 0,09 |
ДК, ед. ОП | 1,2±0,15 | 3,8±0,28 | 3,2±0,24 | 3,2 ± 0,12 |
Каталаза, мкат/л | 4,5 ± 0,35 | 2,7 ± 0,18 | 3,5 ± 0,26* | 3,0 ± 0,25 |
14 сутки | ||||
Диурез, мл/100 г | 0,32±0,02 | 0,21±0,02 | 0,31±0,02* | 0,30±0,03* |
Мочевина в сыворотке, ммоль/л | 4,6±0,32 | 6,2±0,55 | 5,1±0,26 | 5,2±0,38 |
Креатинин в сыворотке, мкмоль/л | 48,3±3,66 | 68,2±5,70 | 49,3± 2,80* | 52,6±3,25* |
Белок в моче, г/л | 0,6±0,05 | 1,7±0,15 | 1,1±0,06 | 1,3±0,08 |
МДА, мкмоль/мл мин | 1,1+0,09 | 3,5±0,14 | 2,5+0,18* | 3,0 ± 0,31 |
ДК, ед. ОП | 1,2+0,15 | 4,1±0,38 | 3,2+0,34* | 3,5 ± 0,25 |
Каталаза, мкат/л | 4,1 ± 0,33 | 2,5 ± 0,23 | 3,4 ± 0,26* | 3,0 ± 0,23 |
21 сутки | ||||
Диурез мл/100 г | 0,32±0,02 | 0,29±0,01 | 0,34±0,03 | 0,35±0,03 |
Мочевина в сыворотке, ммоль/л | 4,6±0,32 | 5,1±0,32 | 4,9±0,32 | 4,9±0,38 |
Креатинин в сыворотке, мкмоль/л | 48,3±3,66 | 51,9±2,12 | 46,9±2,11 | 50,8±2,82 |
Белок в моче, г/л | 0,6±0,04 | 0,9±0,07 | 0,5±0,05 | 0,5±0,06 |
МДА, мкмоль/мл мин | 1,1+0,09 | 2,1+0,13 | 1,1+0,15* | 1,3 ± 0,01 |
ДК, ед. ОП | 1,2±0,15 | 2,1±0,17 | 1,4+0,09* | 1,4 ± 0,01* |
Каталаза, мкат/л | 4,1 ± 0,33 | 3,2 ± 0,32 | 3,9 ± 0,34 | 3,4 ± 0,25 |
Кроме того, введение испытуемого средства крысам оказывало выраженное антибактериальное действие, на что указывает снижение степени инфицированности левой почки у крыс опытной группы до 1××103 микробных тел на 1 см2 среза почки, правой до 1×102, причем в 2 случаях из 8 «высева» кишечной палочки не наблюдалось как в левой, так и в правой почках, тогда как в контроле инфицированность левой и правой почек составляла 1·105 и 1·104 микробных тел соответственно. На 21 сутки у крыс опытной группы лишь в одном случае отмечали рост бактерий, при этом в правой почке роста E. coli не отмечено ни в одном случае, тогда как в контрольной группе животных в 3 случаях отмечен рост колоний кишечной палочки.
При постишемической нефропатии у крыс установлено, что курсовое введение фитоуросепта в экспериментально-терапевтической дозе существенно уменьшало выраженность азотемии: концентрация креатинина в сыворотке крови опытных животных снижалась по сравнению с показателями у животных контрольной группы на 16%, содержание креатинина в моче повышалось на 34%. На 3 сутки наблюдения у животных, получавших испытуемый фитоэкстракт, концентрация креатинина в сыворотке крови снижалась на 40%, а на 7 сутки этот показатель соответствовал уровню физиологической нормы. Наряду с этим, введение животным фитоуросепта повышало диурез на 1 и 3 сутки опыта в среднем на% по сравнению с данными у крыс контрольной группы. Установлено также, что введение испытуемого средства оказывало выраженное антиоксидантное действие, снижая концентрацию продуктов пероксидации липидов как в сыворотке крови, так и в гомогенате почек животных опытной группы: на 1 сутки исследования концентрации ДК и МДА в крови, а также МДА в гомогенате почек крыс, получавших испытуемый фитоэкстракт, были в среднем на 30% меньше, чем в контроле, к 7 суткам эксперимента у животных опытной группы наблюдалось снижение указанных показателей ПОЛ до уровня физиологической нормы. Наряду с этим, у животных опытной группы отмечалось повышение активности антиоксидантной системы организма, на что указывает усиление каталазной активности сыворотки крови в среднем на 40 % по сравнению с показателями у крыс контрольной группы на 1 сутки опыта и нормализация этого показателя на 3 сутки наблюдения.
Исследование фармакотерапевтической эффективности фитоуросепта при гепаторенальном синдроме у крыс показало, что его курсовое введение в экспериментально-терапевтической дозе оказывает благоприятное влияние на течение сочетанного повреждения печени и почек, оказывая как нефро- , так и гепатопротекторное действие. Так, введение фитоуросепта сопровождается достоверным снижением азотемии, повышением диуреза, салуреза, СКФ. Под его влиянием наблюдали нормализацию показателей функционального состояния печени. Гепатозащитная активность фитоуросепта обусловлена выраженным мембраностабилизирующим действием на ранних сроках патологического процесса благодаря уменьшению выраженности цитолиза, о чем можно судить по динамике изменения активности АсТ и АлТ в сыворотке крови крыс. Кроме того, исследуемое средство повышает холерез, а также стимулирует гликогенсинтетическую функцию печени. Введение фитоуросепта способствовало снижению активности свободнорадикальных процессов при данной патологии, что подтверждается снижением содержания продуктов пероксидации липидов в сыворотке крови, гомогенате почек, а также повышением активности каталазы.
Исследования фармакотерапевтической эффективности эксабола показали его выраженное нефропротекторное влияние при повреждениях почек у лабораторных животных ишемической, токсической, иммунной этиологии и при субтотальной нефрэктомии.
В таблице 10 представлены результаты исследования фармакотерапевтической эффективности эксабола при его курсовом интрагастральном введении крысам в дозе 100 мг/кг при хроническом гломерулонефрите у крыс. Как следует из приведенной таблицы, под влиянием антигенного комплекса у животных развивается картина классического гломерулонефрита: азотемия, олигурический синдром, выраженная протеинурия. Курсовое введение эксабола крысам приводит к улучшению показателей функционального состояния почек, что выражается в увеличении диуреза в 2,5 раза, СКФ в 2,6 раза, снижении содержания белка в моче на 55%. Под влиянием данного экстракта нормализовались показатели липидного состава крови, снижались содержания ОХ на 21%, ТГ и ЛПНП на 25 и 53%, соответственно, а ЛПОНП - на 23%, повышалось содержание ЛПВП на 34% со снижением атерогенности более чем в 2 раза по сравнению с аналогичными данными у животных контрольной группы. Введение эксабола оказывает также антиоксидантное действие, о чем свидетельствует снижение концентрации ТБК – активных продуктов в сыворотке крови и гомогенате ткани почек у животных опытной группы в 2,4 и 1,6 раза, повышение активности каталазы и содержания восстановленного глутатиона в крови в 4,9 и 3,3 раза, соответственно, по сравнению с данными в контроле.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 |
