Комплексная оценка факторов, влияющих на особенности проявления и распространения лейкоза крупного рогатого скота, и совершенствование системы, обеспечивающей эпизоотическое благополучие (стр. 2 )

Система «Лейкоз» позволяет конечному пользователю, каким является предметный специалист из области ветеринарии и животноводства
, осуществлять контроль за эпизоотическими процессами при лейкозе КРС на заданной территории в широких пределах временных интервалов. При этом система представляет удобные и понятные формы для ввода входной информации, обеспечивая тем самым сбор, накопление и систематизацию информации. Анализ введенной информации, выполняемый как в автоматическом режиме, так и по запросу пользователя, позволяет представить как общую картину, так и важнейшие детали эпизоотического процесса отдельного хозяйства, района или области. Возможность выполнения анализа на любую дату, по которой в системе накоплена информация, обеспечивает осуществление сравнительного анализа различных периодов и выявление закономерностей, проявляющихся на длительных интервалах времени.

Наличие в системе графической части, реализованной с использованием ГИС-технологий, предоставляет пользователю возможность дополнительно включать любую фоновую пространственно-распределенную информацию (особые природные характеристики или ее аномалии, включая погодные параметры и др.) для выявления их скрытого влияния на возникновение или протекание эпизоотических процессов. С другой стороны, используемая графическая составляющая системы предоставляет многие конечные результаты в удобном для восприятия виде. Например, при выводе результатов по области пользователь одновременно может видеть дифференцированную картину эпизоотической ситуации по всем районам (в виде карты с круговыми диаграммами) и интегральные данные по всей области в виде табличной строки, приведенной в нижней части графического изображения.

Назначение и условия применения

Система информационно-аналитического обеспечения эпизоотологического мониторинга при лейкозе крупного рогатого скота предназначена для накопления, систематизации и последующего анализа эпизоотической и фоновой информации с целью познания закономерностей развития эпизоотических процессов, на основе которых будут выработаны управленческие решения по локализации и ликвидации лейкоза КРС с наименьшими экономическими и временными потерями.

Систему «Лейкоз» предполагается использовать в широкой производственной и научной практике, связанной с ветеринарной медициной: в службах ветеринарного надзора, в районных и областных органах управления сельскохозяйственным производством, на крупных животноводческих предприятиях, а также в научно-исследовательских организациях ветеринарного профиля.

Основные структурные единицы системы

Систему информационно-аналитической поддержки эпизоотологического мониторинга при лейкозе КРС можно представить двумя крупными подсистемами: подсистема «Хозяйство», реализованная в среде Delphi и подсистема «Регион», реализованная в среде MapInfo.

Подсистема «Хозяйство» накапливает информацию по различным хозяйствам, организует ее и обеспечивает использование обработанных данных таким образом, чтобы конечный пользователь без дополнительных преобразований информации и расчетов мог сформировать рациональные решения для внутрихозяйственной деятельности.

Подсистема «Регион» выполняет операции по подготовке картографической основы для контролируемых территорий и внедрению передаваемых данных в графическую базу данных, а также по проведению графического анализа. Эта подсистема обеспечивает отображение обобщенной информации по лейкозу КРС в удобном для восприятия виде. Являясь по своей сути геоинформационной системой (ГИС), подсистема «Регион» представляет пользователю картину развития эпизоотического процесса на двух уровнях: района и области. Тем самым обеспечивается возможность определения контуров или зон распространения заболевания лейкозом.

3.4. Иммунобиохимические показатели крупного рогатого скота,
спонтанно инфицированного вирусом инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи и вирусом лейкоза крупного рогатого скота
в моновариантах и при сочетанном течении инфекции ВЛКРС и ИРТ

Работа по оценке иммунобиохимического статуса крупного рогатого скота, инфицированного ИРТ, ВД и при сочетанном течении ВЛКРС и ИРТ, представлена в табл. 4.

Таблица 4 – Результаты иммунобиохимического исследования крупного рогатого скота,
инфицированного вирусом инфекционного ринотрахеита, вирусом диареи
и при сочетанном течении инфекции ВЛКРС и ИРТ

Показатель	1 группа (ИРТ)	2 группа (ВД)	3 группа (ВЛКРС)	4 группа (ВЛКРС+ИРТ)
M1	±	M1	M2	±	M2	M3	±	M3	M4	±	M4
1		2			3			4			5
Гемоглобин, г%	6,4	±	0,3	6,3	±	0,3	6,4	±	0,2	6,0	±	0,3
Эритроциты, млн/мкл	4,2	±	0,4	3,8	±	0,2	4,8	±	0,3	3,6	±	0,6
Сахар, мг%	96,8	±	4,4	84,8	±	5,2	87,5	±	6,5	93,4	±	7,5
Липиды, мг%	342,1	±	7,7	366,7	±	11,3	341,3	±	16,2	354,8	±	9,7
Холестерин, мг%	168,1	±	0,7	167,5	±	0,6	168,3	±	0,7	167,0	±	0,7
Гематокрит, %	28,8	±	0,7	30,5	±	0,5	28,5	±	0,7	30,6	±	0,5
Аланин, %	0,400	±	0,002	0,396	±	0,002	0,393	±	0,002	0,397	±	0,002
Аргинин, %	0,208	±	0,002	0,209	±	0,002	0,211	±	0,002	0,209	±	0,001
Аспарагин, %	0,738	±	0,001	0,736	±	0,001	0,737	±	0,001	0,737	±	0,001
Глицин, %	0,227	±	0,001	0,230	±	0,002	0,227	±	0,002	0,229	±	0,001
Глутамин, %	0,985	±	0,001	0,984	±	0,002	0,987	±	0,002	0,983	±	0,001

Окончание табл. 4

1		2			3			4			5
Гистидин, %	0,458	±	0,002	0,459	±	0,001	0,460	±	0,001	0,457	±	0,002
Изолейцин, %	0,225	±	0,001	0,227	±	0,001	0,227	±	0,001	0,226	±	0,002
Лейцин, %	0,723	±	0,004	0,727	±	0,004	0,734	±	0,002	0,722	±	0,003
Лизин, %	0,414	±	0,003	0,406	±	0,004	0,417	±	0,005	0,403	±	0,003
Метионин, %	0,056	±	0,0002	0,057	±	0,0005	0,057	±	0,001	0,056	±	0,0005
Фенилаланин, %	0,331	±	0,006	0,321	±	0,008	0,318	±	0,005	0,338	±	0,008
Пролин, %	0,546	±	0,002	0,543	±	0,003	0,540	±	0,002	0,541	±	0,004
Серин, %	0,261	±	0,012	0,205	±	0,012	0,222	±	0,017	0,219	±	0,011
Тирозин, %	0,154	±	0,003	0,152	±	0,003	0,149	±	0,003	0,149	±	0,005
Треонин, %	0,254	±	0,000	0,253	±	0,001	0,253	±	0,001	0,253	±	0,001
Валин, %	0,575	±	0,003	0,563	±	0,002	0,576	±	0,004	0,567	±	0,003
Витамин А, мкг/кг	28,7	±	0,2	28,7	±	0,2	28,9	±	0,3	28,7	±	0,2
Витамин Е, мг/кг	0,345	±	0,017	0,361	±	0,010	0,309	±	0,026	0,369	±	0,008
Натрий, г/л	2,438	±	0,047	2,403	±	0,043	2,493	±	0,085	2,437	±	0,047
Калий, г/л	0,477	±	0,001	0,477	±	0,001	0,477	±	0,002	0,477	±	0,001
Магний, г/л	0,033	±	0,002	0,037	±	0,002	0,038	±	0,003	0,038	±	0,003
Железо, мг/кг	253,2	±	5,0	250,8	±	9,4	247,0	±	5,7	241,2	±	5,5
Медь, мг/кг	0,494	±	0,044	0,477	±	0,031	0,476	±	0,054	0,521	±	0,053
Марганец, мг/кг	0,030	±	0,001	0,030	±	0,001	0,030	±	0,001	0,031	±	0,001
Цинк, мг/кг	1,739	±	0,053	1,883	±	0,070	1,768	±	0,050	1,746	±	0,055

В таблице 5 представлена достоверность разницы иммунобиохимических показателей у инфицированных в моновариантах ИРТ, ВД и при сочетанном течении ВЛКРС и ИРТ.

Таблица 5 – Достоверность разницы сопоставляемых показателей

Показатель	P1–Р2	Р1–Р3	P4–Р2	P4–Р3	P1–Р4
1	2	3	4	5	6
Гемоглобин, г%	0,828	0,906	0,638	0,396	0,486
Эритроциты, млн/мкл	0,432	0,288	0,777	0,131	0,450
Сахар, мг%	0,096	0,266	0,371	0,568	0,700
Липиды, мг%	0,097	0,967	0,440	0,501	0,328
Холестерин, мг%	0,471	0,886	0,550	0,212	0,225
Гематокрит, %	0,059	0,773	0,833	0,041*	0,048*
Аланин, %	0,284	0,053	0,946	0,285	0,336
Аргинин, %	0,591	0,319	0,966	0,559	0,545
Аспарагин, %	0,340	0,502	0,711	0,924	0,490
Глицин, %	0,172	0,971	0,611	0,380	0,297
Глутамин, %	0,857	0,358	0,507	0,149	0,358
Гистидин, %	0,820	0,321	0,453	0,177	0,612
Изолейцин, %	0,215	0,182	0,663	0,506	0,677
Лейцин, %	0,468	0,033	0,279	0,008	0,830
Лизин, %	0,114	0,640*	0,531	0,057*	0,007
Метионин, %	0,558	0,607	0,737	0,683	0,882*
Фенилаланин, %	0,389	0,124	0,176	0,065	0,457
Пролин, %	0,451	0,125	0,611	0,921	0,264
Серин, %	0,004	0,102	0,400	0,867	0,020
Тирозин, %	0,679*	0,222	0,596	0,972	0,408
Треонин, %	0,353	0,237	0,773	0,549	0,479

Окончание табл. 5

1	2	3	4	5	6
Валин, %	0,004	0,920	0,401	0,120	0,045
Витамин А, мкг/кг	0,937*	0,655	0,956	0,637	0,978
Витамин Е, мг/кг	0,417	0,280	0,558	0,081	0,225
Натрий, г/л	0,600	0,590	0,608	0,585	0,992
Калий, г/л	0,898	0,981	0,808	0,889	0,898
Магний, г/л	0,284	0,205	0,681	0,924	0,190
Железо, мг/кг	0,823	0,432	0,400	0,480	0,130
Медь, мг/кг	0,759	0,812	0,494	0,574	0,702
Марганец, мг/кг	0,759	0,904	0,604	0,509	0,394
Цинк, мг/кг	0,125	0,700	0,151	0,776	0,930

* Разница достоверна.

Достоверная разница установлена по уровню гематокрита при сопоставлении животных, инфицированных вирусом инфекционного ринотрахеита, и животных, инфицированных ВЛКРС; лизина (инфекция ВД и ВЛКРС), метионина (ВЛКРС+ИРТ) при сопоставлении с другими опытными группами, а также группе животных, спонтанно инфицированных вирусом инфекционного ринотрахеита.

По другим сопоставляемым показателям разница была недостоверной.

Механизм возникновения иммунодефицитного состояния у крупного рогатого скота, вызванного вирусом лейкоза, требует дополнительного изучения. Отечественными исследователями (, , и др., 2009) были изучены особенности влияния живых вакцин против респираторных и генитальных вирусных инфекций крупного рогатого скота на показатели иммунитета и эффективность серологической диагностики инфекции ВЛКРС у телят. Установлено, что иммунизация живой вакциной стимулировала гуморальный иммунный ответ у подопытных животных, который характеризовался достоверным увеличением титра антител к вирусам, входящим в ее состав. Однако уровень антител ко всем трем вирусам ИРТ (РН), ПГ-3 (РТГА) и ВД(РН) в сыворотке крови серопозитивных телят был существенно ниже в сравнении с аналогичными показателями, полученными на серонегативном поголовье.

Через месяц после иммунизации уровень антител снизился у всех серопозитивных животных, однако только на стадии раннего инфицирования. То есть положительно реагирующих в ИФА и отрицательно в РИД. Через месяц после вакцинации 5 из 6 телят с низким уровнем антител к ВЛКРС реагировали отрицательно. Таким образом, делается вывод, что иммунизация серопозитивных телят живой вакциной оказала иммуносупрессивное действие на синтез антител к ВЛКРС и появлению ложноотрицательных результатов в ИФА у ранее положительных животных с низким содержанием антител. Таким образом, есть основания предполагать по результатам представленных и ранее проведенных исследований (, 2004, А. В Кононова и др.), что возможна интерференция между ВЛКРС и вирусами ИРТ ВД в организме восприимчивых животных, что приводит к взаимному ингибированию специфического ответа и иммуносупрессии. Это особенно важно на начальной стадии антителообразования, при низком уровне антител к ВЛКРС.

3.5. Показатель относительного количества антител
у инфицированного крупного рогатого скота
разных возрастных групп, в том числе пренатально
инфицированных телят, а также до и после введения
животным ППД туберкулина

Ряд исследователей высказывают предположение о том, что определенное влияние на результаты диагностических исследований оказывают индивидуальные особенности организма, воздействие факторов биотического и абиотического происхождения. Однако опубликованные данные крайне немногочисленны и противоречивы.

С целью изучения данного феномена нами были проведены исследования по определению в ИФА относительного количества антител у инфицированных ВЛКРС коров в возрасте от 2 до 8 лет (табл. 6).

Таблица 6 – Относительное содержание антител (EU) в сыворотке крови
инфицированных ВЛКРС коров разных возрастных групп

№ группы животных	Возраст животных	Максимальное значение в группе	Минимальное значение в группе	Среднее значение в группе
1	8 лет (n=50)	109,70	103,55	105,67
2	5–7 лет (n=50)	102,81	99,39	101,19
3	3–4 года (n=50)	109,07	100,22	104,67
4	2 года (n=50)	109,50	100,00	104,1

Максимальные средние значения определены у животных в возрасте 8 лет – 109,70 EU; далее у животных в возрасте 2 лет – 109,50; 3–4 лет – 109,07 и 5–7 – 102,81 EU.

Наибольшая вариабельность максимальных и минимальных показателей оптической плотности зарегистрирована у животных 3–4 лет – 100,22 и 109,07. Минимальный – у коров 5–7 лет – 99,39 и 102,81 EU соответственно.

Таким образом, разница показателей относительного содержания антител у инфицированных ВЛКРС взрослых животных разных возрастных групп несущественна и не влияет на специфичность и чувствительность диагностических исследований в РИД и ИФА, и не требует дифференцированного подхода в интерпретации результатов исследований с учетом возраста.

Далее, до первой выпойки молозива, были исследованы в ИФА телята, полученные от больных лейкозом коров-матерей. Они представляли научный интерес, как иммунотолерантные. Результаты исследований были суммированы и определены средние значения относительного количества антител по каждой группе телят в возрасте от 1 до 6 мес (табл. 7).

Таблица 7 – Результаты диагностических исследований в ИФА (в динамике)
телят в возрасте 1–6 мес, пренатально инфицированных ВЛКРС

Животные, возраст	Количество животных	Показатель ИФА (средний по группе), EU	Диагноз
Телята 1 мес	10	18,08+4,6	Инфекция ВЛКРС
Телята 2 мес	10	16,42+3,9	Инфекция ВЛКРС
Телята 3 мес	19	19,30+4,2	Инфекция ВЛКРС
Телята 4 мес	19	20,12+5,1	Инфекция ВЛКРС
Телята 5 мес	18	16,92+4,3	Инфекция ВЛКРС
Телята 6 мес	18	22,10+4,8	Инфекция ВЛКРС
М+м		18,82+4,4
Телята, спонтанно инфицированные ВЛКРС (n=контроль) М+м	20	67,31+2,4	Инфекция ВЛКРС

Результаты ежемесячных диагностических исследований пренатально инфицированных ВЛКРС телят показали, что уровень относительного количества антител у животных в возрасте от 1 до 6 мес варьировал незначительно, находясь в пределах 16,42+4,6– 22,10+4,8 EU, и по результатам шестикратных исследований в среднем составлял 18,82+4,4 EU.

При исследовании в динамике у трех телят в возрасте 2 мес, у двух – в возрасте 5 мес и у двух – в возрасте 6 мес, средние по группам значения показателей оптической плотности, оценивались как отрицательные на инфекцию ВЛКРС и находились ниже уровня 10–12 EU. Эти телята представляли наибольший интерес, как иммунотолерантные.

Относительное количество антител у животных, используемых в эксперименте, было существенно ниже, чем у телят в возрасте 6 мес, спонтанно инфицированных ВЛКРС. Так, относительное количество антител спонтанно инфицированных телят в возрасте 6 мес более чем в 3 раза превосходило показатель по группе телят, пренатально инфицированных ВЛКРС

Полученные данные дают основание рекомендовать для первичного исследования телят возрасте 6 мес тест-систему ИФА, обладающую высокой чувствительностью.

Подтвержден феномен выпадения (нереагирования) в ИФА у 7 телят в возрасте 2, 5, 6 мес. Исследования методом ПЦР подтвердили наличие вируса в биоматериале исследуемых животных.

Проблема, связанная с изучением влияния на результаты диагностических исследований живых вакцин из слабо агглютиногенного штамма B. abortus, сывороток, лекарственных препаратов, остается дискуссионной. Предполагают, что применение ППД туберкулина, как иммунопровокатора, может влиять на особенности реагирования животных при диагностических исследованиях, в том числе на инфекцию ВЛКРС. В таблицах 8, 9 приведены результаты диагностических исследований животных, инфицированных ВЛКРС, до и после введения ППД туберкулина.

Таблица 8 – Результаты диагностических исследований в РИД
и ИФА и относительное количество антител к ВЛКРС
у животных до введения ППД туберкулина

№ животных п/п	Результат РИД	Результат ИФА	Относительное количество антител, EU
1	–	+	36,02
2	+	+	127,53
3	–	+	21,394
4	+	+	123,79
5	+	+	119,00
6	+	+	100,67
7	–	+	18,24
8	–	–	14,07
9	+	+	133,17
10	+	+	128,73
11	+	+	112,56
12	+	+	138,14
13	+	+	104,32
14	+	+	32,28
15	–	+	17,36
16	–	+	18,00
17	+	+	106,48
18	–	+	74,32
19	–	+	99,32
20	+	+	117,10
	12(+)	19(+)

Результаты исследований сыворотки крови животных в РИД и ИФА до введения туберкулина показали, что у 12 из 20 животных, исследованных в РИД и ИФА, результаты совпали. В тест-системе ИФА антитела к ВЛКРС выявлены у 19 животных. Таким образом, у 8 животных (№ пп. 1, 3, 7, 8, 15, 16, 18 и 19) установлено «выпадение» реакции иммунодиффузионной преципитации. Следует отметить, что относительное количества антител к ВЛКРС у таких животных не превышало значений 14,0774,32EU. Максимальные значения относительного количество антител (более 100 EU) определены у коров (№ п. п. 2, 4, 5, 9, 10, 11, 12, 13, 17, 20). Минимальные показатели менее 100 EU определены у животных (№ 8, 15, 16, 7, 3, 1, 18, 19), до 104,32 EU (№ 000). Минимальные показатели (менее 100 EU) определены у животных № 000, 2150, 1900, 2152, 2162, 2159, 1953, 2121 и варьировали от 1734 (инв. № 15) до 18,24 EU (№ 19).

Результаты повторного исследования крупного рогатого скота в РИД и ИФА, проведенного через 4 дня после обработки ППД туберкулином, представлены в табл. 9.

Результаты диагностических исследований, проведенных после введения туберкулина, показывают, что из 20 исследованных в РИД реагировало 11, в ИФА – 19 животных. У 5 животных содержание антител возросло от

Таблица 9 – Результаты диагностических исследований в РИД и ИФА и относительное
количество антител к ВЛКРС у животных после введения ППД туберкулина

№ животных п. п.	РИД	ИФА	Относительное количество антител, EU
1	–	+	17,50*
2	+	+	130,53
3	–	+	17,41*
4	–	+	19,80*
5	+	+	119,00
6	+	+	29,61*
7	–	+	16,99
8	–	–	8,01*
9	–	+	29,60*
10	+	+	120,730
11	+	+	124,31
12	+	+	124,31
13	–	+	36,21
14	+	+	29,45
15	–	+	12,90*
16	+	+	18,11
17	+	+	105,32
18	+	+	76,24
19	–	+	101,23
20	+	+	118,22
	11(+)	19(+)	М+

74,52 до 130,53 EU. У 7 животных зарегистрировано понижение количества антител от 16,99 до 29,60 EU. У других животных двух опытных групп показатели оставались на относительно равном уровне. Однако следует отметить определенную вариабельность (как повышение, так и понижение) уровня антител у некоторых животных после введения ППД туберкулина.