Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации
1.2. ГИГИЕНА, ТОКСИКОЛОГИЯ, САНИТАРИЯ.
Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов
Методические указания
МУ 1.2.2520-09
Москва
2009
Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей
и благополучия человека
1.2. ГИГИЕНА, ТОКСИКОЛОГИЯ, САНИТАРИЯ.
Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов
Методические указания
МУ 1.2.2520-09
Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов. Методические указания – М.: Федеральный Центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009 – 43 с.
1. Разработаны: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (), ГУНИИ питания РАМН (, , ), ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Почетного академика РАМН (, , ), Московский государственный университет им. (, , ), Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана Роспотребнадзора (, , , ), Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН (, , ), (, ).
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 01.01.01 г.)
3.Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Онищенко
05 июня 2009 г.
4.Введены в действие с 05 июня 2009 г.
5. Введены впервые.
Содержание
1.Область применения………………………………………………………... | 5 |
2.Нормативные ссылки………………………………………………………. | 6 |
3.Общие положения………………………………………………………….. | 7 |
4.Экспертный анализ и оценка данных, характеризующих заявленные свойства наноматериалов…………………………………………………….. | 13 |
5.Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов……. | 15 |
6.Схема проведения экспериментов по изучению общетоксического действия наноматериалов…………………………………………………….. | 18 |
7.Проведение исследований по изучению отдаленных эффектов действия наноматериалов………………………………………………………………... | 33 |
8.Иммунологические исследования и оценка потенциальной аллергенности наноматериалов………………………………………………. | 38 |
УТВЕРЖДАЮ
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный
врач Российской Федерации
_____________________
« 05 » июня 2009 г.
Дата введения « 05 » июня 2009 г.
1.2. ГИГИЕНА, ТОКСИКОЛОГИЯ, САНИТАРИЯ
Токсиколого-гигиеническая оценка
безопасности наноматериалов
Методические указания
МУ 1.2.2520-09
I. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
1.1. Настоящие методические указания устанавливают требования к проведению токсиколого-гигиенических исследований по оценке безопасности наноматериалов.
1.2. Требования, изложенные в настоящих методических указаниях, применяются при осуществлении государственной регистрации продукции, полученной с использованием нанотехнологий или содержащей наноматериалы, впервые разрабатываемой и внедряемой для промышленного изготовления на территории Российской Федерации на этапе ее подготовки к производству, а также впервые ввозимой и ранее не реализовывавшейся – до ее ввоза на территорию Российской Федерации.
1.3. Методические указания разработаны с целью обеспечения единой, научно-обоснованной системы токсиколого-гигиенической оценки безопасности наноматериалов.
1.4. Методические указания предназначены для специалистов органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы научно-исследовательскими организациями гигиенического профиля, медицинскими учебными заведениями и иными организациями и учреждениями, аккредитованными в установленном порядке.
II. НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ
2.1. Федеральный закон Российской Федерации от 01.01.01 года «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения».
2.2. Федеральный закон Российской Федерации от 01.01.01 года «О качестве и безопасности пищевых продуктов».
2.3. Федеральный закон Российской Федерации от 01.01.01 года «О техническом регулировании».
2.4. Федеральный закон Российской Федерации от 01.01.2001 года «Об охране окружающей среды».
2.5. Постановление Правительства Российской Федерации от 01.01.01 года № 000 «О государственном надзоре и контроле в области обеспечения качества и безопасности пищевых продуктов».
2.6. Постановление Правительства Российской Федерации от 01.01.01 года № 000 «О государственной регистрации новых пищевых продуктов, материалов и изделий».
2.7. Постановление Правительства Российской Федерации от 01.01.01 года № 000 «О подписании Российской Федерации Стокгольмской конвенции о стойких органических загрязнителях».
2.8. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 01.01.01 года № 54 «О надзоре за продукцией, полученной с использованием нанотехнологий и содержащих наноматериалы».
2.9. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 01.01.01 года № 79 «Об утверждении Концепции токсикологических исследований, методологии оценки риска, методов идентификации и количественного определения наноматериалов».
2.10. Приказ Министерства здравоохранения СССР от 01.01.01 года № 000 «О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных».
2.11. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 01.01.01 года № 000 «Об утверждении Правил лабораторной практики» (Зарегистрирован Минюстом России 25.06.2003 № 000).
2.12. Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 01.01.01 года № 000 «О санитарно-эпидемиологических экспертизах, обследованиях, исследованиях, испытаниях и токсикологических, гигиенических и иных видах оценок» (Зарегистрирован Минюстом России 20.07.2007 № 000).
III. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
3.1. Проведение настоящих исследований определяется правилами надлежащей лабораторной практики.
3.2. Требования к исследуемым наноматериалам.
3.2.1. Комплект документов на исследуемый наноматериал представляется заказчиком в соответствии с п. 4.1. настоящих методических указаний с обозначением условий и сроков хранения, данных по стабильности, информации о мерах по обеспечению безопасности работы с исследуемым наноматериалом, растворителей и процедуры растворения или диспергирования.
3.2.2. Наноматериалы для проведения токсиколого-гигиенических исследований представляются заказчиком.
3.2.3. Исследуемый наноматериал должен быть упакован для защиты при транспортировке от загрязнения или порчи.
3.2.4. Метод обнаружения, идентификации и количественного определения наноматериалов, позволяющий отличить их от аналогичных веществ в традиционной форме, представляется изготовителем.
3.2.5. Хранение исследуемых образцов наноматериалов осуществляется отдельно от веществ, реактивов, препаратов сравнения в соответствии с рекомендациями заказчика, с соблюдением условий хранения, указанных изготовителем на весь период срока годности.
3.2.6. Хранение и использование исследуемых наноматериалов осуществляется в соответствии с утвержденным протоколом исследования.
3.3. Требования к лабораторным животным и уходу за ними.
3.3.1. Все токсикологические исследования проводятся только на здоровых животных, прошедших карантин.
3.3.2. Все процедуры, связанные с уходом за лабораторными животными, подробно описываются в стандартных операционных процедурах в п.3.9 настоящих методических указаний.
3.3.3. Поступающих животных необходимо изолировать для оценки состояния здоровья. Источники их поступления, условия и дата поступления должны быть документально оформлены. Все мероприятия, принимаемые в случае ухудшения состояния здоровья животных и их гибели, не связанных с проведением исследования, осуществляются в соответствии с утвержденным протоколом исследования и должны быть документированы.
3.3.4. Для обеспечения индивидуального наблюдения в процессе выполнения исследования животные должны быть идентифицированы путем их маркировки. Все клетки, вольеры, контейнеры, предназначенные для содержания животных, также подлежат маркировке. Животные, предназначенные для исследования различных наноматериалов, изолируются друг от друга.
3.3.5. Места содержания животных и производственные помещения подвергаются периодической санитарной обработке, за исключением указанных в утвержденном протоколе исследования средств, способных оказать влияние на результаты исследования.
3.4. Требования к помещениям, кормам и инвентарю должны соответствовать правилам лабораторной практики.
3.4.1. Помещения, предназначенные для проведения токсиколого-гигиенических исследований наноматериалов, должны располагаться таким образом, чтобы обеспечить возможность выполнения проводимых исследований в полном объеме в соответствии с утвержденным протоколом исследования.
3.4.2. Помещения для лабораторных животных должны:
- обеспечивать изоляцию (карантин) поступающих животных, больных животных и животных, подозреваемых в носительстве инфекций;
- позволять осуществлять раздельное содержание различных видов животных и животных одного вида, являющихся объектом исследования различных наноматериалов;
- соответствовать санитарно-эпидемиологическим и ветеринарным требованиям.
3.4.3. Корма, оборудование и инвентарь для ухода за животными необходимо хранить в помещениях, изолированных от мест содержания животных. Помещения для проведения исследований наноматериалов, в том числе для работы с опасными для здоровья и жизни человека объектами исследования, должны соответствовать установленным санитарно-эпидемиологическим требованиям.
3.4.4. Корма и вода для животных должны обеспечивать пищевые потребности в соответствии с утвержденным протоколом исследования, быть свободными от патогенных микроорганизмов и вредных примесей и не должны влиять на результаты исследования.
3.5. Требования к используемому оборудованию.
3.5.1. Организации, проводящие токсиколого-гигиенические исследования наноматериалов, должны быть оснащены необходимым оборудованием, прошедшим метрологический контроль и калибровку в установленном порядке.
3.5.2. Эксплуатация оборудования проводится в соответствии с техническим паспортом и инструкцией по применению. Результаты проведения калибровки и текущего ремонта оборудования фиксируются в специальном журнале, доступном в любое время сотрудникам, эксплуатирующим оборудование или обеспечивающим его обслуживание.
3.6. Планирование и проведение исследований.
3.6.1. Токсиколого-гигиенические исследования наноматериалов проводятся по утвержденному плану с ведением протокола и составлением отчета, в который заносятся все результаты исследований.
3.6.2. Токсикологические исследования наноматериалов на животных проводятся в соответствии с установленными правилами. Исполнителем должен быть обеспечен контроль за соблюдением правовых и этических норм использования лабораторных животных при проведении исследований наноматериалов в соответствии с утвержденным протоколом.
3.6.3. Токсиколого-гигиенические исследования по оценке безопасности наноматериалов проводятся в соответствии с утвержденным протоколом. Протокол исследования утверждается руководителем организации, проводящей исследования, и включает: цель и задачи исследования, имеющиеся сведения об исследуемом наноматериале (физические, химические, биологические, токсикологические свойства), условия хранения и использования исследуемых наноматериалов, сведения о контрольном материале традиционной степени дисперсности (если таковой имеется), схему исследования и обоснование избранной схемы исследования, методы исследования, способы и пути введения исследуемого и контрольного образцов, критерии оценки безопасности исследуемого наноматериала, результаты исследований, статистическую обработку результатов исследования, заключение, список используемой литературы.
Вносимые в протокол исследования изменения утверждаются руководителем исследования, а отклонения от протокола (незапланированные события, непредвиденные обстоятельства и т. д.) записываются, пронумеровываются, подписываются руководителем исследования, датируются в приложении с указанием причин.
3.7. Требования к оформлению отчета.
3.7.1. По окончании проведенных токсиколого-гигиенических исследований оформляется отчет, в котором должны быть представлены: название, адрес организации-исполнителя, даты начала и завершения исследований, цель и задачи исследования; описание исследуемого наноматериала, включая имеющиеся сведения о физических, химических, биологических, токсикологических свойствах; вид, возраст, количество животных в каждой группе, пол, показатели массы тела, источник питания; режим дозирования, форма, кратность и путь введения исследуемого наноматериала; схема проведения исследования наноматериала; описание методов статистической обработки результатов, результаты исследования, представленные в виде обобщающих таблиц, рисунков с соответствующей статистической обработкой, и комментариев к ним, обсуждение результатов, выводы, список использованной литературы.
3.7.2. Отчет о результатах проведенного исследования составляется ответственным исполнителем, утверждается руководителем организации и скрепляется печатью организации.
3.8. Система обеспечения качества токсиколого-гигиенических исследований по оценке безопасности наноматериалов.
3.8.1. Контроль за качеством проведения токсиколого-гигиенических исследований наноматериалов включает в себя оформление перечня исследований, проводимых в организации, с указанием для каждого исследования руководителя и заказчика, названия исследуемого наноматериала, даты начала и состояния каждого исследования на текущий момент времени, оценку протоколов и методов исследования на соответствие правилам лабораторной практики, мониторинг текущих исследований, отчет о проведенных проверках и рекомендации по устранению недостатков.
3.8.2. Для осуществления контроля качества руководство организации, проводящей токсиколого-гигиенические исследования по оценке безопасности наноматериалов, назначает, в соответствии с правилами надлежащей лабораторной практики, ответственных лиц за мониторинг исследования из числа сотрудников, не участвующих в исследовании.
3.9. Стандартные операционные процедуры.
3.9.1. Стандартные операционные процедуры разрабатываются организацией, проводящей исследования наноматериалов, на все производственные операции, в том числе поступление, идентификацию, маркировку, обработку, отбор проб, использование и хранение исследуемых веществ; обслуживание и калибровку измерительных приборов и оборудования для контроля окружающей среды; приготовление реактивов, кормов; ведение записей, отчетов и их хранение; обслуживание помещений; при необходимости обезвреживание или утилизацию наноматериалов; осуществление программы по обеспечению качества, и утверждаются руководителем организации.
3.9.2. Соблюдение стандартных операционных процедур осуществляется в целях обеспечения качества, достоверности и воспроизводимости результатов исследования.
3.9.3. Отклонения от стандартных операционных процедур должны быть документально оформлены и согласованы с руководителем исследования.
3.9.4. Организация, проводящая исследование наноматериалов, должна:
- иметь утвержденный порядок приема и учета поступления наноматериалов;
- проводить учет наноматериалов при поступлении, расходовании, возврате заказчику или их утилизации;
- принимать меры по обеспечению идентификации исследуемых веществ (указание на упаковке названия, химической формулы, номера серии, даты выпуска, условий хранения и сроков годности) и их стабильности на протяжении всего исследования.
3.10. Меры конфиденциальности.
3.10.1. Сотрудники, принимающие участие в проведении токсиколого-гигиенических исследований наноматериалов, обязаны соблюдать конфиденциальность в отношении любых данных, полученных в ходе исследования, в соответствии с законодательством Российской Федерации.
3.10.2. Организация, проводящая исследования наноматериалов, должна обеспечить конфиденциальность результатов исследований в рамках принятых ею обязательств и в соответствии с законодательством Российской Федерации.
IV. Экспертный Анализ и оценка данных, характеризующих заявленные свойства наноматериалов
4.1. Общая характеристика наноматериалов включает анализ информации, представленной заявителем:
- область применения и рекомендуемые уровни внесения;
- торговое, химическое наименование наноматериала;
- точное название, адрес, реквизиты изготовителя;
- метод получения;
- состав наноматериала (название и формула(ы) вещества или веществ, входящих в его состав, его (их) молекулярная масса);
- сведения об идентичности представленного образца выпускаемой продукции;
- нормативно-техническую документацию на отечественную продукцию, включая все конструкционные элементы;
- протоколы отдельных разделов токсиколого-гигиенических испытаний на безопасность продукции (если таковые имеются), выполненных в аккредитованных лабораториях;
- специфический метод определения наноматериалов в продукции;
- для оценки многокомпонентных материалов, если наноматериал находится в растворителе или на носителе, подробная рецептура композиции;
- реквизиты импортной продукции дополнительно должны содержать: сертификаты фирмы-производителя о безопасности продукции, протоколы испытаний в аккредитованных лабораториях (центрах) зарубежных стран;
- физические характеристики наноматериалов (размер и распределение по размеру частиц, форма частиц, площадь поверхности, пористость, агрегатное состояние);
- физико-химические характеристики наноматериалов (растворимость в воде и биологических жидкостях, заряд частиц, кристаллическая структура, адсорбционная емкость, устойчивость к агрегации, гидрофобность, адгезия наночастиц к поверхности, химическая активность (в том числе способность генерировать свободные радикалы), способность к биодеструкции;
- молекулярно-биологические характеристики (взаимодействие с ДНК, РНК, клеточными мембранами, белками);
- цитологические характеристики (цитотоксичность, способность к накоплению в клетках, влияние на протеомный и метаболомный профиль);
- токсикологические характеристики (потенциальные пути проникновения в организм, острая токсичность, подострая токсичность, хроническая токсичность, кумулятивное действие, местнораздражающее действие, отдаленные эффекты (мутагенность, эмбриотоксичность, тератогенность, канцерогенность), иммунотоксичность, аллергенность, накопление в органах и тканях, проницаемость барьеров организма для токсикантов, проникновение через барьеры организма);
- разрешение уполномоченных органов страны-изготовителя на использование наноматериалов в странах-импортерах.
Все данные должны быть представлены на русском языке, а сведения о химическом составе материала - в соответствии с систематической номенклатурой IUPAC.
4.2. Анализ результатов оценки безопасности наноматериалов проводится на основании данных ранее проведенных исследований (если такие исследования проводились) и литературных данных, представленных заявителем.
4.3. Предварительная оценка степени потенциальной опасности наноматериалов проводится в зависимости от класса их опасности.
4.4. Объем проводимых исследований наноматериалов определяется в зависимости от степени их потенциальной опасности.
V. ТОКСИКОЛОГО-ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА безопасности НАНОМАТЕРИАЛОВ
5.1. Перечень и объем токсиколого-гигиенических исследований определяются экспертными (учеными) советами соответствующих аккредитованных испытательных центров Российской Федерации на основании анализа представленных материалов и оценки степени потенциальной опасности наноматериалов.
5.2. Гигиенические исследования наноматериалов включают определение показателей качества и безопасности:
- содержание основного вещества;
- содержание примесей;
- содержание растворителей или носителей (если они использовались);
- при необходимости содержание токсичных элементов, пестицидов, радионуклидов, микробиологические и другие показатели.
5.3. Токсикологические исследования наноматериалов проводятся в эксперименте на здоровых половозрелых животных, прошедших карантин в течение не менее 10 дней.
5.4. Токсикологические исследования можно проводить как на линейных (крысы линий Wistar, Sprague-Dawley и др.; мыши линий СВА, С57В1/6 и др.), так и нелинейных животных. В случае использования линейных животных необходимо указать линию животных.
5.5. Количество животных в группе зависит от целей исследования, но не должно быть менее 10 особей в группе.
5.6. Разброс по исходной массе тела животных в группе не должен превышать ± 10 %.
5.7. В течение всего эксперимента животные должны иметь свободный доступ к корму и питьевой воде.
5.8. Для унификации исследований животные на протяжении всего эксперимента получают полусинтетический рацион. Продуктовый набор рациона представлен в таблицах 1-4.
Таблица 1
Состав полусинтетического рациона
Компоненты | Масса ингредиентов (г на 100 г диеты) |
Казеин | 20 |
Крахмал маисовый | 63,5 |
Масло растительное (подсолнечное) | 5 |
Лярд | 5 |
Солевая смесь | 3,5 |
Сухая смесь водорастворимых витаминов | 0,9 |
Смесь жирорастворимых витаминов (масляный р-р) | 0,1 |
Микрокристаллическая целлюлоза | 2,0 |
Таблица 2
Смесь жирорастворимых витаминов
Витамины | Объем (мл на 100 мл смеси) |
Витамин Е (токоферол 50 мг/мл) | 10 |
Витамин А (ретинол-100000 и. е./мл) | 1,4 |
Витамин D (эргокальциферол 50000 и. е./мл) | 1,4 |
Рыбий жир | 87,2 |
Таблица 3
Смесь водорастворимых витаминов
Витамины | Содержание, мг/100 г смеси |
Тиамин гидрохлорид | 500 |
Рибофлавин | 500 |
Пиридоксин гидрохлорид | 500 |
Никотинамид | 2000 |
Кальция пантетонат | 2000 |
Фолиевая кислота | 200 |
Биотин | 10 |
Викасол, 1% | 100 |
Цианкобаламин | 1,5 |
Сахароза | До 100 г |
Таблица 4
Смесь солевой смеси
Минеральные соли | Содержание, г/100 г смеси |
Кальций фосфорнокислый, Ca3(PO4)2 | 50 |
Натрий хлористый, NaCl | 7,4 |
Калий лимонокислый моногидрат, C6H5O7K3 ´ H2O | 22 |
Калий сернокислый, K2SO4 | 5,2 |
Магний окись, MgO | 2,4 |
Марганец углекислый, (Mn 43-48%) | 0,35 |
Железо лимоннокислое, С6H5O7Fe (Fe 16-17%) | 0,6 |
Цинк углекислый, ZnCO3 (Zn 70%) | 0,16 |
Медь углекислая, (Cu 53-55%) | 0,03 |
Йодистокислый калий, KIO3 | 0,001 |
Селенистокислый натрий Na2SeO3 | 0,001 |
Хромовокалиевые квасцы, CrK(SO4)2´12H2O | 0,058 |
Сахароза (высокоочищенная) | 11,8 |
5.9. Данные исследования проводятся с целью установления уровней воздействия, при которых не наблюдаются вредные эффекты (NOAEL или NOEL), которые могут быть использованы для обоснования допустимого суточного поступления, допустимых пределов содержания наноматериалов в пищевых продуктах, воде и воздухе.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 |
