Морфометрические особенности постнатального развития околоушной слюнной железы крыс в условиях питания диспергированной пищей (стр. 2 )

-  площади сечения ацинусов, просветов и стенок внутридольковых протоков, ядер и цитоплазмы сероцитов и эпителиоцитов внутридольковых протоков (мкм2);

-  эквивалентного диаметра ацинусов, просветов внутридольковых протоков и их диаметра, ядер сероцитов и эпителиоцитов (мкм);

-  количества клеток на площади сечения ацинусов, а также в стенке внутридольковых протоков на их поперечных срезах;

-  ядерно-цитоплазматического отношения (ЯЦО) сероцитов и эпителиоцитов внутридольковых протоков.

Определялись также вес животных, индивидуальное количество потребляемой пищи в граммах, длина тела, тонкого и толстого кишечника в сантиметрах. Полученные данные подвергали статистической обработке с помощью пакета прикладной компьютерной программы «Statistica 6.0» (StatSoft Inc., USA). При описании данных использовались основные показатели описательной статистики (, 2002). Сравнение выборок проводилось с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни. Поскольку в диссертации исследованы морфологические параметры органа животных разных возрастных групп, то проводился дисперсионный анализ Краскела-Уоллиса. Оценка прямолинейной зависимости параметров проводилась при помощи корреляционного анализа по методу Пирсона.

Результаты исследования и их обсуждение

Постнатальный морфогенез околоушной слюнной железы белых крыс

Ранние этапы постнатального морфогенеза околоушной слюнной железы белых крыс характеризуются статистически значимым уменьшением диаметра ацинусов с 16,92±0,12 мкм до 16,41±0,13 мкм, обуславливая тенденцию снижения их площади (табл. 2). При этом ЯЦО сероцитов последовательно увеличивается, а затем к 120-м суткам снижается и стабилизируется до 240-х суток. В более позднем периоде онтогенеза с 60-х по 240-е сутки происходит рост площади сечения и диаметра ацинусов, вероятно, обусловленный увеличением площади сечения цитоплазмы сероцитов, а в период возмужания (е сутки) увеличением их числа на площади сечения ацинуса.

Период с 60-х по 120-е сутки характеризуется статистически значимым увеличением площади сечения и диаметра просветов вставочных протоков, а также уменьшением их стенок и диаметра. Последнее, на наш взгляд, обусловлено снижением площади сечения ядер и цитоплазмы эпителиоцитов на фоне увеличения их количества в стенках протоков. В указанный период постнатального онтогенеза ЯЦО эпителиоцитов уменьшается (р<0,01). Последующему периоду (е сутки) свойственны как увеличение площади сечения стенок, так и просветов вставочных протоков, что сопровождается одновременным увеличением площади ядер и цитоплазмы эпителиоцитов и их числа на площади сечения протока, аналогично ацинусам. К концу периода возмужания (240-е сутки) величина ЯЦО эпителиоцитов вставочных протоков достоверно снижается (табл. 3). Возрастная динамика изменений морфометрических параметров исчерченных выводных протоков принципиально не отличается от таковой вставочных протоков.

Таким образом, в норме морфогенез околоушной слюнной железы в период с 21-х по 240-е сутки характеризуется увеличением в 1,5 раза площади сечения концевых отделов, в основе которого лежит увеличение как количества сероцитов на площади сечения ацинуса, так и размеров самих клеток. При этом, судя по ЯЦО, функциональная активность сероцитов отличается максимальной интенсивностью в пубертатном периоде (60-120-е сутки) постнатального онтогенеза. Изменения морфометрических параметров внутридольковых выводных протоков околоушной слюнной железы характеризуются двухэтапностью. Уменьшение площади сечения стенок вставочных и исчерченных протоков в раннем постнатальном онтогенезе сменяется их увеличением на более поздних этапах. Эти явления сопровождаются аналогичными изменениями размеров ядер и цитоплазмы эпителиоцитов. Функциональная активность эпителиоцитов внутридольковых выводных протоков наиболее интенсивно увеличивается на поздних этапах постнатального онтогенеза.

Особенности постнатального морфогенеза ацинусов околоушной
слюнной железы белых крыс при питании диспергированной
пищей

Препубертатный период характеризуется уменьшением площади сечения и диаметра ацинусов животных I опытной группы, что обусловлено статистически значимым снижением площади ядер и цитоплазмы сероцитов.

Таблица 2

Морфометрические показатели ацинусов околоушной слюнной железы контрольных и опытных животных в разные периоды постнатального развития

Показатель Возраст (сутки), группа	Площадь ядер сероцитов (мкм2)	Диаметр ядер сероцитов (мкм)	Площадь сечения цитоплазмы сероцитов (мкм2)	ЯЦО (%) сероцитов	Количество сероцитов на срезе ацинуса	Площадь сечения ацинусов (мкм2)	Диаметр ацинусов (мкм)
21	9,06±0,06	3,39±0,01	56,81±0,73	17,53±0,18	4,01±0,04	263,78±3,42	16,92±0,12
60	Контроль	9,77±0,05X	3,52±0,01X	51,24±0,55X	19,49±0,23X	4,19±0,05	254,88±3,72	16,41±0,13X
Опыт I	9,14±0,06*	3,41±0,01*	53,72±0,78X	17,09±0,22*	3,96±0,05*	243,94±3,43X	16,24±0,12X
120	Контроль	8,53±0,05X	3,29±0,01X	59,00±0,73X	14,55±0,17X	4,31±0,04	294,61±4,46X	17,97±0,14X
Опыт I	9,08±0,06*	3,40±0,01*	60,78±0,86X	15,23±0,17X*	4,05±0,04*	279,15±3,36X	17,52±0,11X
180	Контроль	9,07±0,05X	3,40±0,01X	65,08±0,88X	14,51±0,19	4,38±0,05	326,34±4,15X	18,93±0,12X
Опыт I	8,88±0,05	3,36±0,01	56,77±0,81X*	16,27±0,23X*	4,54±0,05X	307,08±4,62X*	18,35±0,15X*
Опыт II	9,63±0,06*V	5,01±0,01*V	72,15±1,05*V	14,57±0,21V	4,35±0,05	352,94±4,95*V	19,73±0,14*V
240	Контроль	10,76±0,05X	3,67±0,01X	77,27±0,95X	14,28±0,17	4,82±0,05X	421,40±4,88X	21,59±0,13X
Опыт I	8,94±0,05*	3,38±0,01*	77,59±0,84X	11,65±0,16X*	4,64±0,05	419,94±5,76X	21,71±0,15X
Опыт II	9,92±0,05X*V	3,56±0,01X*V	74,15±0,71V	13,62±0,14X*V	4,77±0,05X	409,73±5,44X	21,15±0,13X

Примечание.
X - статистически значимые отличия от предыдущего возраста (р<0,01);
* - статистически значимые отличия от контрольных значений (р<0,01);
V - статистически значимые отличия от значений животных I опытной группы (р<0,01).

Пубертатный период, наоборот, характеризуется увеличением площади сечения ацинусов и повышением функциональной активности сероцитов, на которую указывает снижение их ЯЦО (табл. 2). В репродуктивный период происходит увеличение площади сечения ацинусов, в основе которого лежит существенное увеличение количества сероцитов на единицу площади сечения ацинусов. При этом площадь цитоплазмы сероцитов и их ЯЦО уменьшаются. Указанные показатели у 180-суточных животных составляют 56,77±0,81 мкм2 и 16,27±0,23 %. В период возмужания отмечается рост площади сечения ацинусов до 419,94±5,76 мкм2 за счет увеличения площади цитоплазмы сероцитов. При этом, судя по уменьшению значений ЯЦО, функциональная активность сероцитов повышается.

В период с 21-х по 120-е сутки отмечается уменьшение количества сероцитов на площади сечения ацинусов у животных I опытной группы по отношению к контрольным животным. Судя по ЯЦО, функциональная активность сероцитов у животных I опытной группы в препубертатный период выше, чем у животных контрольной группы. Наблюдающееся снижение размеров ацинусов 180-суточных животных I опытной группы обусловливается соответствующими изменениями площади цитоплазмы сероцитов
(рис. 1). Значения ЯЦО сероцитов 120- и 180-суточных животных I опытной группы превышают аналогичные показатели контрольных животных соответствующего возраста. Уменьшение размеров ацинусов околоушной слюнной железы обусловлено питанием предварительно измельченной пищей и, как следствие, сокращением продолжительности акта жевания. Раздражение рецепторов ротовой полости во время жевания является главным механизмом в регулировании синтеза белков слюны (Anderson D. J., Hector M. P., 1987; Ikawa M. et al., 1991; Johnson D. A., Cardenas H. L., 1993). Время нахождения в ротовой полости предварительно измельченной пищи сокращается, что ведет к угнетению физиологического рефлекторного процесса синтеза секрета околоушной слюнной железой (Mackie D. A., Pangborn R. M., 1990; C.-K. Yeh et al., 1990). Как следствие, наблюдается снижение объема ацинусов, которое обусловлено уменьшением объема сероцитов (Wilborn W. H., Schneyer C. A., 1970; Sreebny L. M. et al., 1971; Johnson D. A., Cardenas H. L., 1993; Scott J., Gunn D. L., 1994; Leal S. C. et al., 2003).

Рис. 1. Ацинусы (1) околоушной слюнной 180-суточных животных контрольной группы (А) и I опытной группы (Б). Окраска гематоксилин-эозином, увеличение ×1000.

К 240-м суткам площадь сечения ацинусов и цитоплазмы сероцитов, а также их количество на площади сечения ацинусов животных I опытной группы достигают значений контрольных животных. При этом у 240-суточных животных I опытной группы ЯЦО сероцитов оказывается ниже, чем у 240-суточных контрольных животных. Увеличение площади сечения ацинусов 240-суточных животных I опытной группы, вероятно, связано с потреблением большего количества пищи. В ходе исследования установлено, что к 240-м суткам животные I опытной группы потребляли пищи в 2,3 раза больше, чем животные контрольной группы (p<0,001). Последнее мы склонны связывать с более поздним наступлением преабсорбтивного (сенсорного) насыщения вследствие более позднего наступления рефлекторных раздражений от механорецепторов слизистой оболочки полости рта, обусловленных слабым раздражающим действием на них диспергированной пищи.

Таким образом, длительное питание диспергированной пищей вызывает изменения ацинусов околоушной слюнной железы беспородных белых крыс, которые в целом можно охарактеризовать как гипо- и атрофические. К концу периоду возмужания происходит увеличение морфометрических показателей ацинусов животных I опытной группы до значений контрольных животных.

Особенности постнатального морфогенеза внутридольковых
протоков околоушной слюнной железы белых крыс при питании диспергированной пищей

Период с 21-х по 180-е сутки характеризуется стабильными значениями площади сечения стенок и просветов вставочных протоков. При этом ЯЦО эпителиоцитов протоков, составляя у 21-суточных животных 31,84±0,61 %, существенно не изменяется у 60-суточных животных. К 120-м суткам ЯЦО уменьшается, затем этот показатель стабилизируется до 240-х суток. Период возмужания характеризуется увеличением площади сечения стенок и просветов вставочных протоков, что происходит за счет увеличения количества эпителиоцитов в стенках протоков (табл. 3 и 4).

Препубертатный период не сопровождается изменениями площади сечения стенок и диаметра исчерченных протоков, в то время как площадь сечения цитоплазмы эпителиоцитов уменьшается с 40,18±1,07 мкм2 у 21-суточных животных до 33,64±0,79 мкм2 у 60-суточных животных (р<0,001). При этом отмечается также увеличение ЯЦО эпителиоцитов с 29,12±0,62 % до 39,48±0,90 %. В пубертатный период площадь сечения и диаметр исчерченных протоков уменьшаются, однако площадь цитоплазмы эпителиоцитов и их количество на площади поперечного сечения исчерченных протоков сохраняют стабильные значения. ЯЦО эпителиоцитов уменьшается до
27,46± 0,57 %, не изменяясь до конца исследованного периода онтогенеза.

В репродуктивный период площадь сечения стенок и диаметр исчерченных протоков не изменяются на фоне увеличения количества эпителиоцитов в стенках исчерченных протоков. Площадь сечения и диаметр просветов, сохраняющие стабильные значения до 120-х суток, в репродуктивный период уменьшаются. Период возмужания характеризуется увеличением площади сечения стенок и просветов исчерченных протоков, что обусловлено увеличением площади цитоплазмы эпителиоцитов.

Период с 21-х по 180-е сутки характеризуется отсутствием различий в площади сечения стенок и диаметра внутридольковых протоков между животными контрольной и I опытной группы. Однако внутридольковые протоки 60-суточных животных I опытной группы имеют меньшую площадь цитоплазмы эпителиоцитов по сравнению с таковой 60-суточных контрольных животных (р<0,01). Репродуктивный период отличается большими значениями площади сечения и диаметра просветов внутридольковых протоков контрольных животных, чем соответствующие показатели животных I опытной группы. В период возмужания площадь сечения и диаметр просветов внутридольковых протоков животных, питающихся диспергированной пищей, увеличиваются, достигая значений соответствующих показателей животных контрольной группы, в то время как площадь сечения стенок внутридольковых протоков контрольных животных оказывается большей, чем у животных I опытной группы (р<0,01). Площадь сечения стенок внутридольковых протоков 240-суточных животных I опытной группы соответствует значениям, свойственным 21-суточным животным. В период с 21-х по 180-е сутки ЯЦО эпителиоцитов вставочных протоков животных контрольной и I опытной группы имеет сходные значения. Однако ЯЦО эпителиоцитов исчерченных протоков 60-суточных животных I опытной группы превышает таковое животных контрольной группы (р<0,01). В период возмужания ЯЦО эпителиоцитов внутридольковых протоков контрольных животных оказываются ниже, чем у животных I опытной группы (табл. 3).

Таблица 3

Морфометрические показатели внутридольковых протоков околоушной слюнной железы контрольных и опытных животных в разные периоды постнатального развития

Показатель

21

Контроль-60

Опыт I-60

Контроль -120

Опыт I-120

Контроль -180

Опыт I-180

Опыт II-180

Контроль -240

Опыт I-240

Опыт II-240

S ПР

ВП

13,70±0,51

13,01±0,50

12,43±0,80

15,40±0,47X

14,02±0,79

21,16±0,96X

14,48±0,84*

23,82±1,15

26,29±0,89X

28,24±1,40X

21,79±0,73*V

ИП

34,69±1,46

35,96±1,63

39,53±1,84

43,34±1,63X

43,36±1,70

49,14±1,51X

35,87±1,23X*

46,88±1,23

56,82±1,57X

60,49±1,94X

63,76±2,13X

D ПР

ВП

4,16±0,08

4,01±0,08

3,91±0,12

4,38±0,07X

4,13±0,12

5,10±0,12X

4,20±0,12*

5,37±0,14V

5,72±0,10X

5,83±0,14X

5,14±0,08*V

ИП

6,75±0,15

6,62±0,14

6,98±0,16

7,19±0,12X

7,29±0,14

8,09±0,15X

6,76±0,12X*

8,45±0,15V

9,23±0,19X

9,28±0,19X

8,82±0,14

КЭСП

ВП

6,26±0,08

6,28±0,09

6,42±0,14

6,62±0,06X

6,29±0,09*

6,57±0,09

6,47±0,10

6,82±0,08V

6,91±0,06X

6,94±0,09X

7,01±0,01X

ИП

9,14±0,10

8,99±0,10

9,03±0,12

9,01±0,08

8,79±0,08

9,28±0,10

9,22±0,10Х

9,38±0,09

9,83±0,10Х

9,57±0,10

9,47±0,10

S ЯЭ

ВП

11,71±0,11

9,02±0,09Х

8,77±0,14X

8,15±0,07X

8,99±0,11*

9,43±0,08X

9,15±0,12

10,10±0,11*V

10,21±0,08X

9,70±0,10X*

9,84±0,07*

ИП

11,13±0,09

9,55±0,08X

9,47±0,10X

8,25±0,05X

8,92±0,07X*

8,87±0,06X

9,58±0,07X*

9,85±0,05*V

10,16±0,06X

9,96±0,06X

9,81±0,05*

D ЯЭ

ВП

3,85±0,02

3,38±0,02Х

3,32±0,03Х

3,21±0,01Х

3,37±0,02*

3,49±0,02 Х

3,41±0,02*

3,58±0,02*V

3,61±0,01Х

3,51±0,02Х*

3,54±0,01*

ИП

3,76±0,02

3,48±0,01Х

3,47±0,02Х

3,24±0,01Х

3,34±0,01Х*

3,35±0,01Х

3,36±0,01

3,52±0,01*V

3,62±0,01Х

3,62±0,01Х

3,64±0,01Х

S ЦЭ

ВП

36,42±0,81

37,83±0,88

33,64±0,78*

31,04±0,62X

33,68±0,87

34,24±1,02

32,85±0,95

34,10±0,82

44,32±1,02X

36,28±0,95*

37,67±0,86*

ИП

40,18±1,07

37,82±0,69

33,64±0,79X*

31,08±0,56X

31,82±0,50

33,12±0,62

33,21±0,58

35,19±0,50*V

45,88±0,87X

38,65±0,64X*

38,79±0,75X*

ЯЦО Э

ВП

31,84±0,61

30,32±0,57

33,15±1,18

27,24±0,58Х

27,31±0,60Х

28,16±0,54

27,93±0,74

30,11±0,74

23,83±0,22Х

27,98±0,60*

27,82±0,54*

ИП

29,12±0,62

36,05±0,59Х

39,48±0,90Х*

27,62±0,46Х

27,46±0,57Х

28,45±0,49

29,35±0,59

29,27±0,52

23,43±0,39Х

27,94±0,45*

25,99±0,38Х*V

Примечание. ВП – вставочный проток; ИП – исчерченный проток; S - площадь сечения (мкм2); D – диаметр (мкм); ПР – просвет; КЭСП – количество эпителиоцитов на площади поперечного сечения стенки протока; ЯЭ – ядра эпителиоцитов; ЦЭ – цитоплазма эпителиоцитов; X - статистически значимые отличия от предыдущего возраста (р<0,01); * - статистически значимые отличия от контрольных значений (р<0,01); V - статистически значимые отличия от значений животных I опытной группы (р<0,01).