Этио-патогенетическая терапия эндометритов у коров (стр. 2 )

Установлено, что процент заболеваемости гнойно-катаральным эндо­метритом, изменяется с возрастом, максимальная заболеваемость выявлена у коров в возрасте старше 8 лет - 63,2%, что связано с возрастным снижением резистентности организма, а также у первотелок, у которых еще резистент­ность организма не стабилизирована. Высок процент осложнениний во время родов на почве крупноплодия, узости родовых путей, неправильного поло­жения, позиции, предлежания и членорасположения плода -51,8%, у коров моложе восьми лет заболеваемость составила -40,6%.

3.2. Разработка и фармако-токсикологическая оценка комплексного препарата

По данным проведенных микробиологических исследований вос­палительного экссудата из матки, у всех исследованных 36 коров больных острым послеродовым эндометритом выделена условно патогенная микро­флора с выраженной вирулентностью. При этом монокультуры изолированы у 29,7% животных, различные ассоциации микробов у 70,3% коров.

В числе выделенной микрофлоры, преобладающее место занимают стрептококки (Str. pyoqenes haemolyticus, faecalis, St. agalactiae), стафилококки (Staph. aureus, Staph. albus), энтеробактерии (E. coli, Ps. aeruginosa, Bact. proteus).

Материалы изучения этиопатогенеза ост­рого послеродового эндометрита у коров явились осно­вой усовершенствования лечебно-профилактических мероприятий при патологии послеродового периода. Для достижения этой цели, были поставлены задачи, разработать новый химиотерапевтический препарат для внутриматочного введения и обосновать по­казания к его применению.

При разработке препарата учитывали малотоксичность и безвредно­сть для животных и человека, удобного для применения в ветеринарной практике и с длительным сроком хранения. При выборе активно действуюших веществ (АДВ) к ним предъявляли следующие требования: вы­сокая антибактериальная активность, наличие противо­воспалительного, положительного влияния на реге­неративные процессы в слизистой матки и ее сократительную актив­ность. Подбор оптимальной основы препарата должен был обеспечить: равномерную адсорбцию и постепенное освобождение АДВ из носителя, а также получение лекарственной формы, устойчивой к воздействию хи­мических, физических и биологических факторов внешней среды.

В результате был разработан комплексный препарат пролонгированного действия комплексан.

Препарат представ­ляет собой низкомолекулярный полимер, содержащий резорцин, сульфаниламид и антибиотик.

Готовая лекарственная форма препарата комплексан – темно-коричневого цвета со слабым специфическим запахом, содержащая в качестве разбавителя 1,2 - пропиленгликоль. Комплексан характеризу­ется следующими физико-химическими свойствами: плотность – 1,383-1,395; рН - 8,0-10,0, содержание резорцина 1- 2%.

Препарат сохраняет свои качества (антимикробность, фунгицидность, местноанестезирующие, противовоспалительные и ранозаживляющие свойства) в течение одного года при температуре от 10 до 30°С в защищенном от света месте.

При определении противомикробной эффективности комплексана методом диффузии в агар с использова­нием в качестве тест-культур S. aureus, E. coli, P. vulgaris, С. albicans уста­новлено его выраженное бактериостатическое и фунгиостатическое дей­ствие. Зона задержки роста этих микроорганизмов составила 22-30 мм, что превосходило результаты применения препаратов сравнения (эндометромаг, лефуран и 5%-ная суспензия трициллина) в среднем на 6 - 7 мм.

Комплексан обладал высокой бактериальнойной и антигрибковой активностью в серийных разведениях. Минимальная бактериостатическая концентрация препарата по отношению к культуре золотистого стафи­лококка проявлялась при его разведении 1:64, к культурам кишечной и синегнойной палочек - 1:32, к протею вульгарному - 1:16. Его минималь­ная бактериостатическая концентрация к вышеназванным бактериям со­ставила 1:32-1:128. Минимальная фунгицидная концентрация комплексана к С. albicans обнаружена при разведении 1:16, а минимальная фунгистатическая- 1:32.

Нами не обнаружено изменения чувствительности тест-культур микроорганизмов к комплексану при их десятикратном пассажиро­вании с суббактериостатической и субфунгистатической концентрацией препарата.

Таким образом, введение в оптимальном соотношении в рецептуру комплексана резорцина, а также сульфаниламида и антибиотика позволило получить этиотропное средство, обладающее выраженным антибактериальным и антимикозным действием, что выгодно отличает его от ряда известных препаратов.

Для определения в организме лактирующих коров остаточного количества резорцина, исследования выполняли после пятикратного внутриматочного введения комплексана в дозе 75 мл.

С целью количественного определения резорцина в венозной крови и молоке коров, пробы биоматериалов брали до введения комплексана, а затем через 1...3...6 суток после первой и спустя трое суток после последней те­рапевтической обработки. При этом резорцин не обнаружен в крови и молоке ко­ров в период введения препарата, так спустя трое суток после окон­чания эксперимента.

3.2.1. Токсикологические свойства препарата

Определение параметров «острой» токсичности суспензии комплексана проводили на белых крысах при пероральном однократном введении препарата с последующим наблюдением за животны­ми в течение 14 дней. Доза 2600 мг/кг живой массы тела, не вызывает гибель и является максимально переносимой дозой препарата (LD0). Доза 2900 мг/кг массы тела – является средне смертельной (LD50), а 3200 мг/кг абсолютно смертельной (LD100).

Клиническая картина отравления животных сопровождалась угнетением общего состояния, одышкой и остановкой дыхания. Патологоанатомическая картина павших животных характеризовалась отеком внутренних органов.

Субхроническую токсичность изучали на 30 белых крысах. Препарат задавали ежедневно в дозах от (LDмг/кг массы тела). (LD50) при многократном назначении препарата был равен 9540 мг/кг массы тела животного.

Коэффициент кумуляции (Кк) при многократном применении препарата равен 6,31.

Для оценки местного токсического действия препарата проводили его аппликации на тщательно выстриженную и неповреждениую кожу спины морских свинок на притяжении 10 дней, после чего за ними вели наблюдения в течение последующих двух недель. Накожное нанесение комплексана не вызвало у подопытных животных ги­перемии, отека, инфильтрации, сухости, расчесов и других видимых изменений обработанных участков кожи. Рост шерстного покрова был равномерным и плотным.

Определение сенсибилизирующего действия препарата проводили при его однократном введении в кожу наружной поверхности уха мор­ских свинок в дозе 0,02 мл. Выявление аллергии у животных производи­ли путем постановки кожных капельных проб, используя для тестирова­ния готовую лекарственную форму препарата и его разведения в 10 и 100 раз. При этом аллергическая реакция в виде эритемы, геморрагии и изъ­язвления кожи не обнаружена. Комплексан не вызывал у опыт­ных животных изменения поведенческих реакций.

Выяснение влияния препарата на муцины матки у коров с нормальным течением послеродового периода выполняли после однократного внутриматочного введения комплексана на 3-4 день после отела в дозе 75 мл. Со­держание мукополисахаридов в пробах выделений из матки до введения препарата было 15,5+0,9 мг%. Через три часа их концентрация оказалась равна 13,7±1,4 мг%. В последующем содержание муцинов несколько уве­личилось и составило через 6 и 24 ч - 16,8±0,8 мг% и 17,4±1,1 мг% соот­ветственно (Р< 0,2). При этом во всех исследованных пробах не об­наружено разрушения и осаждения муцинов под действием препарата.

Таким образом, комплексан является малотоксичным препаратом и не влияет отрицательно на содержание мукополисахаридов.

Положительные результаты опытов по определению специфиче­ской активности и безвредности нового препарата послужили основани­ем для его апробации в качестве лечебно-профилактического средства при послеродовом эндометрите у коров.

3.3. Терапевтическая эффективность внутриматочного введения препарата при эндометрите у коров

Определение наиболее эффективной терапевтической дозы комплексана при лечении коров с гнойно-катаральным воспалением эндо­метрия проводили в пяти опытных группах. Доза препарата для коров в первой опытной группе составила 45 мл, во второй - 50 мл, в третьей - 75 мл, в четвертой - 100 мл и в пятой – 125 мл. Внутриматочные введения проводили начиная с третьих суток после родов с интервалом 72 ч до клинического вы­здоровления.

Установлено, что оптимальной терапевтической дозой комплексана является 75 мл. В этом объеме препарат обеспечивал выздоров­ление 83,7% животных при курсе лечения 11,7±2,25 дня и кратности вве­дения 4,3±0,19 раза. При введении комплексана в количестве 50 мл было излечено 74% коров; курс лечения и кратность введения составили соответственно – 14,4±3,37 дня и кратность введения - 6,2±0,14 раза; происходило увеличение периода от отела до оплодотворения на 6,7 дня по сравнению с его на­значением в объеме 75 мл. Использование комплексана в дозах 100-125 мл не повышало лечебного действия и по сравнению с его применением в объеме 75 мл.

3.3.1. Разработка комплексного метода лечения коров

при остром и хроническом гнойно - катаральном эндометрите

Опыт выполняли на 120 больных эндометритом коровах, из которых были сформированы две опытные с острым и хроническим эндометритом и две контрольные группы (30 коров с острым и 30 – с хроническим эндометритом). Для внутриматочного введения животным первой и второй опытных групп использовали комплексан в оптимальной дозе (75 мл) по схеме: один раз в начале лечения, а затем с интервалом 72 ч, до клинического выздоровления: в кон­трольных группах назначали эндометромаг согласно наставлению по его применению. Кроме этого, животным контрольных групп для повышения сократительной активности матки однократно вводили 2 %-ный раствор синэстрола по 2 мл внутримышечно, а в даль­нейшем 4-5 кратно - окситоцин по 40-50 ЕД.

С целью повышения резистентности использовали средства патогенетической терапии. В опытных группах 60 больным коровам трехкратно, внутрибрюшинно, c правой стороны в центре «голодной» ямки с интервалом 24 часа в дозе 120 мл вводили теплый (370С) стерильный раствор поливета. В 1-ой контрольной группе внутримышечно инъецировали 7%-ный раствор ихтиола на 40%-ном растворе глюкозы, трехкратно с интервалом трое суток в дозе 20 мл. Во 2-ой контрольной группе - тканевый препарат из печени и селезен­ки по подкожно, в тех же параметрах.

По данным клинических исследований при лечении коров по схеме 1 были получены самые высокие результаты (табл.2).

Таблица 2- Комплексное лечение коров с острым послеродовым

гнойно - катаральным эндометритом

	Группа коров и схема лечения
Показатели	1 Комплексан + раствор поливета при остром эндометрите (n = 30)	2 Комплексан + р-р поливета при хроническом эндометрите (n = 30)	3 Эндометромаг + тканевой препарат при остром эндометрите (контроль) (n = 30)	4 Эндометромаг + ихтиол при хроническом эндометрите (контроль) (n=30)
Излечено коров,%	29/96,7	28/93,3	26/86,7	25/83,3
Кратность введения, раз	3,2 ±0,14	4,1 ±0,25	6,9 ±0,31	7,1±0,45
Курс лечения, дней	9,7 ±0,33	9,3 ±0,31	13,6 ±0,40	14,1±0,67
Срок от отела до проявления стадии возбуждения, дней	51,7 ±1,32	57,9 ±1,96	69,4±2,45	72,1±3,15
Оатодотворилось, гол/%	28/93,3	27/90,1	25/83,3	25/80,1
Период от отела до оплодотворения, дней	58,3 ± 3,27	63,4 ±2,89	79,5 ±3,9	83,1±2,7
Индекс оплодотворе­ния	1,67 ±0,15	1,73 ±0,18	2,32 ±0,25	2,41±0,32

Так, выздоровление у животных в первой опытной группе с острым эндометритом происхо­дило в 96,7% случаев; по сравнению с контролем регистрировали досто­верное сокращение кратности внутриматочных введений и всего курса лечебных процедур на 1,7 раза соответственно, а также уменьшение срока от отела до проявления стадии возбуждения полового цикла на 11,5 дня, периода от отела до оплодотворения на 21,2 дня: вос­становление репродуктивной способности отмечено у 93,3% подвергну­тых лечению коров; индекс оплодотворения оказался минимальным и составил 1,67±0,15.

Терапевтическая эффективность сочетанного применения комплексана и раствора поливета при хроническом эндометрите была равна 93,3% при снижении числа внутриматочной обработки на 1,7 раза и курса лечения на 3,9 дня; про­исходило сокращение периода от отела до оплодотворения на 16,1 дня и увеличение оплодотворяемости на 10,6% по сравнению с контролем.

За опытными животными осуществляли систематические клиниче­ские наблюдения. До, в процессе и конце лечения выборочно проводили ге­матологические, биохимические, иммунологические, микробиологические исследования больных коров, а также изучали цитограмму окрашенных маз­ков-отпечатков маточных выделений. При этом установили следующее: у коров опытных групп, подвергнутых лечению комплексной схемой с комплексаном, в сравнении с коровами контрольной группы, угасание заметных признаков воспаления эндометрия отмечалось на 7-10 и более дней быстрее. В частно­сти у коров опытных групп кратковременное (в первые 1-2 суток после на­чала лечения) усиление экссудации сменялось постепенным уменьшением маточных выделений; экссудат утрачивал неприятный запах, становился гус­тым, приобретал вид слизи. Выделения из матки экссудата прекращались при остром эндометрите - к 6-8-му дню, при хроническом эндометрите - к 7-12-му дню после начала лечения; при этом из матки исчезла ранее выделявшая­ся микрофлора. В мазках-отпечатках экссудата из матки в указанные сроки обнаруживали постепенное заметное уменьшение бактерий, появились полибласты различной формы при одновременном ис­чезновении вакуолизированных полибластов и эритроцитов. Уже в первые дни после начала лечения и в последующем усилива­лась регидностъ матки, рога которой постепенно перемещались из брюшной полости в тазовую полость.

Исчезновение выраженных клинических признаков воспаления эндо­метрия сопровождалось нормализацией гематологического статуса, биохимического состава сыворотки крови, активизацией защитных сил организма. Эти изменения были более выраженными у коров опытной группы, чем у ко­ров контрольной группы, подвергнутых лечению препаратом, отмечено: 1) снижение СОЭ на 9,1-18,3 %, (таблица 3 и 4) возрастание содержания в кро­ви гемоглобина, в сравнении с исходным уровнем, в среднем на 6,1-9,05%, а также эритроцитов - на 3,5-13,2 % при одновременном достижении количест­ва лейкоцитов и соотношения их форм физиологических границ; 2)увеличение содержания в сыворотке крови общего белка (в основном за счет альбуминов и гамма-глобулинов) в среднем на 9 %, каротина - на 10,2-20 %, щелочного резерва - на 3,7-3,8%, снижение коэффициента К:Са с 2,2-2,5 до 2,0-2,2;

Таблица 3- Влияние комплексного лечения на показатели крови у коров при остром гнойно-катаральном эндометрите (М+m)

Сроки исследований	Группы коров	СОЭ мм час	Hв г/л	Эр 12 10/л	Л 9 10/л		Лейкограмма, % (м)
					Б	Э	Ю	П	С	Л	Мn
До на­чала лече­ния	опытная n = 6	0,60 ±0,01	123,7 ±3,7	5,3 ± 0,03	12,05 ±1,39	0,5	2,5	1,0	14,0	39,5	40,5	2,0
	контроль n = 6	0,59 ±0,03	124,4 ±2,04	5,5 ± 0,05	12,17 ±1,78	0,5	2.0	1,0	12,0	39,0	43,5	2,0
Через 3 сут. от нач. леч.	опытная n = 6	0,57 ±0,02	128,1 ±1,09	5,6 ± 0,08	9,41 ±1,12	0,5	3,0	0	8,0	42,0	43,0	3,5
контроль n = 6	0,56 ±0,03	123,4 ±2,47	5,4 ± 0,04	9,01 ±2,02	0	2,5	0,5	11,0	39,0	45,0	2,0
Через 10 сут. от нач. леч.	опытная n = 6	0,55 ±0,01	131,2 ±3,05	6,0 ± 0,06	9,03 ±1,53	0,5	4,5	0	5,0	31,0	54,5	4,5
контроль n = 6	0,50 ±0,01	129,7 ± 5,37	5,7 ± 0,05	9,54 ±2,19	0	3,0	0	7,5	38,0	49,0	2,5

3) возрастание бактерицидности крови - на 23,7-25,5%, в срав­нении с исходным уровнем(Р<0,05).
Аналогичные изменения обнаруживали и у коров кон­трольной группы, но они были менее выражены. К концу курса лечения гемоцитологический показатель (ГЦП) при ост­ром эндометрите возрос у коров опытной группы в 2,04 раза, у коров контрольной группы - в 1,3 раза, а при хроническом эндометрите он снизился у коров опытной группы в 1,21 раза, в контроле - в 1,1 раза (Р<0,05).