Этио-патогенетическая терапия эндометритов у коров (стр. 1 )

На правах рукописи

ГРОМЫКО

Евгений Васильевич

ЭТИО - ПАТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ

ЭНДОМЕТРИТОВ У КОРОВ

06.02.06 – ветеринарное акушерство и биотехника

репродукции животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Саратов – 2010

Работа выполнена на кафедре ветеринарного акушерства и хирургии

ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет»

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор,

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук,

профессор,

доктор ветеринарных наук, профессор,

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Воронежский государственный аграрный университет имени »

Защита состоится в «13.00» часов «24» сентября 2010 г. на заседании диссертационного совета Д 220.061.01 при ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. » РФ, 35.

Отзывы на автореферат просим выслать по адресу:

РФ, г. Саратов, Театральная площадь, 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет имени » РФ, 35.

Автореферат разослан « » августа 2010г. и размещен на сайте: www.sgau.ru.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор ветеринарных наук, доцент

1.  ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. Среди причин, сдерживающих рост поголовья крупного рогатого скота и снижающих его продуктивность, значительное место занимают заболевания половых органов воспалительного характера.

Из болезней органов размножения воспалительного характера у коров наибольший процент приходится на острые и хронические эндометриты (, 1968; , 1971; , 1971; , 1972; , 1974; , 1977; , 1987; , 1987; , 2004; , 2006; , 2007 и др.). Хронические эндометриты вызывают глубокие диструктивные изменения в тканях матки, что обусловливает длительное бесплодие и выбраковку маточного поголовья (, 1988; , 1988; , 1996; , 1997; , 1998; , 1999; , 2003; , 2009; , 2009 и др.).

С лечебной целью при указанных патологических процессах наиболее широко применяются химиотерапевтические препараты и в частности антибиотики, сульфаниламидные и нитрофурановые препараты.

Однако, как показала практика, нерациональное и длительное их применение, способствует приобретению микроорганизмами резистентности к этим лекарственным веществам и не обеспечивает ожидаемых результатов (,1985; , 2000; , , 2000; с соавт. 2007; с соавт. 2009 и др.).

В связи с этим, изыскание новых эффективных препаратов, оценка их основных фармако-токсикологических свойств, клиническое испытание, научное обоснование их применения и внедрение в практику животноводства, является актуальной задачей для ветеринарной науки и практики.

1.2. Цели и задачи исследования. Целью настоящей работы являлось, изучение, разработка и внедрение в ветеринарную практику комплексного этиотропного препарата пролонгированного действия комплексана и патогенетического средства поливета для лечения коров больных эндометритом.

Чтобы обеспечить достижение указанной цели к решению были поставлены следующие задачи:

- установить этиологию и закономерности распространения после-родового эндометрита у коров в условиях Краснодарского края.

- определить состав микрофлоры из выделяемого секрета от больных коров эндометритом и установить ее чувствительность к комплексану.

- выявить действие препарата пролонгированного действия комплексана на организм коров, больных эндометритом.

- разработать оптимальные терапевтические дозы и схему применения препаратов комплексана и поливета для лечения и профилактики коров, больных острым и хроническим послеродовым гнойно-катаральным эндометритом.

Исследования выполнены в соответствии с утвержденной научно-исследовательской программой Кубанского государственного аграрного университета гг. (№ гос. регистрации ).

1.3. Научная новизна. Разработан и научно обоснован комплексный препарат пролонгированного действия комплексан. Отработаны оптимальные терапевтические дозы этого препарата и схемы лечения. Определены его физико-химические и фармако-токсикологические характеристики. Установлена антимикробная активность препарата по отношению к лабораторным штаммам микроорганизмов, а также к микроорганизмам, выделенным из экссудата больных эндометритом животных. С целью повышения терапевтической эффективности комплексана, разработано сочетанное его применение с препаратом поливет, оказывающего общестимулирующее действие. Получен патент РФ № 000 на препарат поливет.

1.4. Практическая значимость. На основании полученных результатов исследований, рекомендовано широкое применение комплексных препаратов комплексана и поливета для профилактики и лечения коров, больных послеродовым гнойно-катаральным эндометритом. Применение указанных препаратов позволило повысить эффективность ветеринарных мероприятий и профилактику симптоматического бесплодия у коров.

1.5. Апробация и реализация результатов исследований. Основные положения диссертации доложены, обсуждены и одобрены на научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов Кубанского государственного аграрного университета ( гг.), ученых Советах факультета ветеринарной медицины Кубанского ГАУ ( гг.), на международной научно-практической конференции посвященной 35-летию факультета ветеринарной медицины Кубанского государственного аграрного университета (г. Краснодар – 2009).

Основные положения работы представлены в виде методических рекомендаций «Лечение и профилактика эндометритов у коров», изданных нами в 2008 году используются в учебном процессе для студентов и слушателей повышения квалификации.

Разработаны Временные инструкции по применению комплексана и поливета (утвержденные Управлением ветеринарии Краснодарского края 14 октября 2009 г.). Результаты исследований прошли апробацию и применяются в ряде передовых животноводческих хозяйств.

1.6. Публикации. Основные материалы диссертации опубликованы в восьми научных статьях, в том числе, три в рецензируемом научном издании, рекомендованном ВАК России – «Труды Кубанского государственного аграрного университета» Серия: Ветеринарные науки №1 (ч.2.), 2009 г.

1.7. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 154 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, экономической эффективности, заключения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы, включающего 254 наименований, в том числе 61 иностранных авторов и приложения. Работа иллюстрирована 29 таблицами и 1 рисунком.

1.8. Основные положения, выносимые на защиту:

- обоснование совершенствования лечебно-профилактических мероприя - тий при симптоматическом бесплодии, обусловленным гнойно-катаральным эндометритом у коров;

- разработка состава и технологии получения препарата;

- результаты экспериментальной и клинической эффективности препарата комплексана при эндометритах у коров;

- материалы по оценке терапевтической эффективности применения комплексана и внутрибрюшинного введения препарата поливета при эндометритах у коров;

- результаты профилактической эффективности совместного применения препаратов комплексана и поливета при эндометритах у коров.

2.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена в гг. на кафедре ветеринарного акушерства и хирургии Кубанского государственного аграрного университета.

Необходимые лабораторные исследования проводились в крайветлаборатории и горсанбаклаборатории, а также в условиях «Дружба» Калининского района, Коневского района и «Русь» Тимашевского района Краснодарского края на коровах черно-пестрой породы 3-8 летнего возраста с массой кг, со среднегодовой молочной продуктивностью от 3500 до 6950 кг.

Для изучения степени распространения воспаления слизистой оболочки матки у коров в условиях хозяйств Краснодарского края и определения возможных параметров применения, лечебных и профилактических препаратов для нормализации их воспроизводительной функции выполнены специальные клинико-гинекологические исследования по оценке функционального состояния органов половой системы у бесплодных животных, включающие ректальное исследование, согласно « Методическим указаниям по диагностике, лечению, профилактике акушерско-гинекологических болезней и ветеринарному контролю за воспроизводительной функцией коров» (1986).

Микробиологические исследования стерильно полученных маточных выделений осуществляли по методике с соавт. 1967, с последующим определением состава микрофлоры путем посева на МПА, МПБ, кровяной агар, МПА с 1% раствором глюкозы, среды Эндо, Кода, Сабуро и др.

Идентификацию изолированных микроорганизмов проводили с учетом их морфологических, культуральных, тинкториальных и биохимических свойств по общепринятым методикам. Видовую принадлежность бактерий устанавливали, руководствуясь «Кратким определителем бактерий Берги» (1980), грибов – согласно методике (1964). Изучение патогенности микроорганизмов осуществляли при внутрибрюшинном заражении белых мышей одномиллиардной взвесью смытой суточной агаровой культуры в дозе 0,2-0,5 мл (200-500 млн. микробных клеток). Чувствительность микрофлоры к антимикробным препаратам определяли методом бумажных дисков в соответствии с «Методическими указаниями по определению чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом диффузии в агар с использованием дисков» (1983) и методом лунок в МПА.

С учетом полимикробной контаминации гениталий у коров при остром послеродовом воспалении слизистой оболочки матки и резистентности микро­флоры к широкоприменяемым в акушерско-гинекологнческой практике этиотропным средствам разработан новый химиотерапевтический препарат комплексан, предназначенный для внутриматочного введе­ния.

Лабораторные исследования физико-химических свойств препарата: цвета, запаха, консистенции и плотности (ареометром), а также подлинности составных компонентов с использованием общеизвестных химических методов согласно ТУ 10. проводили на кафедре органической и физколлоидной химии Кубанского ГАУ при техническом содействии кандидата химических наук, доцента Дмитриевой Ирины Генадиевны.

Фармакологические исследования по экспериментальной оценке комплексана включали в себя определение стабильности, срока годности,

антимикробной активности, фармакокинетики, токсичности, раздражающего и сенсибилизирующего действий, влияние на муцины эндометрия.

Определение стабильности и установление срока годности препа­рата проводили по изменению внешнего вида, физико-химических свойств, антимикробной активности при его различных режимах и сро­ках хранения.

Антибактериальные и антимикозные свойства комплексана изучали методом диффузии при помощи лунок на твердых питательных средах и методом последовательных серийных разведений в МПБ с использованием в качестве тест-культур клинических штаммов микроорганизмов.

Фармакокинетику комплексана изучали на коровах с послеро­довым эндометритом путем определения в крови и молоке резорцина и антибиотиков, при пятикратном внутриматочном введении пре­парата в дозе 75 мл. Содержание резорцина в крови исследовали на полярографе ТА-1 по ГОСТ , в молоке - методом инверсионной вольт-амперометрии.

Изучение острой токсичности препарата проводили на белых мы­шах и крысах в соответствии с «Методическими указаниями по опреде­лению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» (извлечения из нормативных и методических докумен­тов, утвержденных МЗ РФ, ВАСХНИЛ и ГУВ Госагропрома). Выбор изучаемых доз и расчет среднесмертельной дозы осуществ­ляли по (1970).

Оценку местного раздражающего действия комплексана вы­полняли на морских свинках методом накожных аппликаций. Его сенси­билизирующую способность устанавливали по методу и (1981) на морских свинках.

При выяснении влияния препарата на муцины маточной слизи ко­ров с неосложненным послеродовым периодом использовали методику , (1989).

При постановке научно-производственных опытов, коров распре­деляли в опытные и контрольные группы с учетом принципа аналогов по возрасту, упитанности, продуктивности, клиническому статусу, усло­виям кормления и содержания.

Оптимальную терапевтическую дозу комплексана определяли на коровах, больных острым послеродовым эндометритом при введении препарата животным 5 опытных групп в объеме 45, 50,75,100 и 125 мл.

С целью определения характера заболевания пользовались аналитиче­скими, клиническими и лабораторными данными, руководствуясь при этом классификацией по .

При лечении коров с острым гнойно-катаральным эндометритом учи­тывали количество (процент) излеченных животных, сроки излечения по ис­чезновению ранее обнаруженных клинических признаков воспаления, перио­ду бесплодия, индексу осеменения, количеству осложнений после лечения.

Методика проведения опытов изложена в соответст­вующих главах диссертации.

В процессе выполнения настоящей работы помимо проведенных клинических иссле­дований животных, осуществляли морфо и биохимические исследования крови.

При проведении гематологических исследований определяли в крови ко-личество гемоглобина с помощью фотоэлектроколориметра (, , 2004), эритроцитов и лей­коцитов (путем подсчета в счетной камере с сеткой Горяева), а также интен­сивность СОЭ (капиллярным способом с помощью аппарата Панченкова с наклоном в 600 по методике , , 1965) и ха­рактера лейкограммы (микроскопированием мазков крови, окрашенных по Романовскому-Гимза с исчислением гемо-цитологического показателя (ГЦП) по и (, 1959), отражающего со-отношение лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов.

Биохимические исследования сыворотки крови включали определение содержания: общего белка - рефрактометрически (ИРФ-22); белковых фракций - методом электрофореза на бумаге при помощи аппарата ЭФА-1, общего кальция - по де-Варду, неорганического фосфора - по Бригсу и Юделовичу в модификации , щелочного резерва в плазме крови - диффузным методом по с соавт. (2004).

Общую неспецифическую иммунобиологическую реактивность организма изучали путем установления бактерицидной активности сыворотки крови (по , , 1956) и фагоцитарной активности лейкоцитов (нейтрофилов) крови (по , 1950). Уровень опсоно-фагоцитарной реакции лейкоцитов определяли по фагоцитарной активности нейтрофилов (проценту нейтрофильных лейкоцитов, принявших участие в фагоцитозе микробов) и опсоно-фагоцитарному числу (количеству микробных тел, захваченных в среднем одним нейтрофилом).

Расчет экономической эффективности проводили по (2001) с учётом «Методики определения экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ» (М., Колос, 1988).

Экспериментальный материал обрабатывали методом вариационной статистики с определением средних арифметических (M), их стандартных отклонений (m) и доверительных границ. Вычисляли среднеарифметический показатель, её ошибку, показатели варьирования признаков, аргумент Стьюдента и достоверную разницу между сравнительными величинами. Разница считалась достоверной при Р < 0,05. Полученный цифровой материал обрабатывали при помощи программы Microsoft Office Excel.

3. Результаты собственных исследований

3.1. Распространение гнойно-катарального эндометрита у коров в

хозяйствах Краснодарского края

По данным ветеринарной отчетности и акушерско-гинекологической

диспансеризации в хозяйствах Краснодарского края, в течение последних трех лет удельный вес симптоматического бесплодия варьировал в пределах 35- 65%, на долю неспецифического воспаления матки приходилось 27,1- 37,2%.

Установлено, что самая высокая заболеваемость коров острым гной­но-катаральным эндометритом отмечается с конца февраля по май - 61,8% когда значительно снижается резистентность организма, в результате неудовле­творительных условий содержания и кормления. Минимальная заболеваемость коров эн­дометритом регистрировалась с августа по ноябрь - 39,1 %.

Таблица 1. Заболеваемость коров по месяцам года.

Месяц	Обследовано отелившихся коров,(гол.)	Всего	Из них заболело эндометритом, (гол.) (	%
	2007г.	2008г.	2009г.
Январь	193	183	198	574	203	35,4
Февраль	217	243	259	719	358	49,8
Март	258	273	249	780	467	59,8
Апрель	193	241	205	639	309	48,3
Май	169	219	210	598	207	34,6
Июнь	134	254	215	603	196	32,5
Июль	165	205	191	561	149	26,5
Август	141	187	213	550	218	33,5
Сентябрь	167	256	239	792	203	25,6
Октябрь	182	215	206	619	148	23,9
Ноябрь	176	193	216	585	167	28,5
Декабрь	198	275	297	770	245	31,8

Возникновение острого послеродового эндометрита у коров также зависит от интенсивности отелов, связанной с планирован­ным ведением воспроизводства. Так в тех хозяйствах, где этому вопросу не уделяется должного внимания, даже в благоприятные летне-осенние месяцы отмечается возрастание заболеваемости, вследствии перенапряжения нагрузки ро­дильных отделений, снижения их санитарного уровня при массовых отелах.