Клинико-фармакотоксикологическое обоснование применения препарата «ОВСАР» при токсических гепатозах птицы (стр. 2 )

3.2.Токсико-экологическое аудирование ПТФ «Березовская»

царство» Липецкой области

царство» специализируется на производстве мяса цыплят-бройлеров, которое поставляется на потребительский рынок России, ближнего и дальнего зарубежья.

Производственная мощность птицефабрики «Березовская» составляет 1 млн. 100 голов, помещения типовые, содержание клеточное.

На птицефабрике цыплят выращивают в клеточных батареях БКМ-3 до 42 дневного возраста. С 30 дня молодняк переводят в птичники (корпуса) для откорма, где и содержат до конца периода в клеточных батареях КБН, КБУ-3, КП-8, ККТ.

Для клинического осмотра был выбран птичник № 20, где одновременно находились 25 тыс. цыплят-бройлеров возрастом 30 дней. В ходе осмотра обращали внимание на внешний вид, подвижность, на прием воды и корма, на упитанность, состояние оперения, органов чувств, кожу и ее производные, носовые отверстия, нос и живот. В результате установлено: у исследуемого поголовья (12200 птиц, 48,8%) явно выражены клинические признаки заболеваний: общая слабость, сонливость, взъерошенное оперение, перо тусклое, скученность, незначительные расстройства кишечника.

На вскрытии у вынуждено убитых и павших птиц отмечали увеличение печени в 1,5-2 раза. Цвет печени варьировал от бурового до желто-коричневого с точечными кровоизлияниями. На разрезе печень тусклая. Консистенция органа рыхлая. Под капсулой печени отмечали наличие сероватых очажков. Желчный пузырь у некоторых особей был растянут желчью. При гистологическом исследовании печени установлено наличие жировой дистрофии гепатоцитов.

Для морфологического и биохимического исследования крови были отобраны из 10 разных точек по 10 голов. Взятые для проведения исследований животные были поделены на две равные группы по 50 голов. Для анализа брали по 15 голов каждой группы. Вследствие технологического стресса, погрешностей в кормлении обмен веществ протекает весьма напряженно. В результате биохимических исследований сыворотки крови была получена биохимическая картина, характеризующая статус организма птицы. Отмечается повышенное содержание АЛТ и АСТ. Уровень эритроцитов снижен. Гемоглобина недостаточно. Количество лейкоцитов выше нормы. Патологические изменения в перечисленных ранее показателях свидетельствуют о развитии токсической дистрофии печени. В связи с этим высокие уровни показателей резервной щелочности, общего белка, и щелочной фосфатазы. Также превышены предельно допустимые значения по кадмию и свинцу.

Из табл. 3 видно, что в органах цыплят-бройлеров содержатся тяжелые металлы в значениях близких к опасному.

С целью выявления контаминации внешней среды токсинами и их влияния на заболеваемость молодняка сельскохозяйственной птицы токсическим гепатозом был проведен ряд биохимических исследований крови. В процессе опыта проводили обязательное сравнение биохимических показателей двух групп цыплят: клинически здоровых и с признаками токсического гепатоза.

В органах птиц с выраженной патологией печени значения кадмия и свинца превышают аналогичные показатели условно здоровых птиц. Исходя из этого, можно сделать вывод, что при одинаковом уровне интоксикации организм некоторых высоко резистентных птиц способен не накапливать в жизненно важных органах критических уровней токсинов. При потере компенсаторных возможностей происходит накопление токсинов в организме, что влечет за собой развитие болезни.

Таблица 3

Содержание микро - и макроэлементов

Наименование пробы	Медь, мг/кг	Цинк, мг/кг	Марганец, мг/кг	Железо, мг/кг	Свинец, мг/кг	Кадмий, мг/кг	Ртуть, мг/кг
Содержимое зоба птицы	6,0± 0,35	18,6± 1,02	8,9± 0,36	101,19± 1,18	0,1± 0,02	0,06± 0,012	0,006± 0,001
Содержимое желудка кур	3,6± 0,12	6,72± 1,51	6,3± 1,20	49,02± 1,25	0,11± 0,03	0,016± 0,01	0,006± 0,0011
Почки	4,1± 0,12	7,48± 1,23	3,7± 0,21	291,15± 18,12	0,47± 0,012	0,15± 0,05	0,0073± 0,0014
Печень	2,9± 0,14	33,8± 2,3	2,5± 0,16	279,07± 15,48	0,36± 0,08	0,1± 0,014	0,007± 0,0003
Мышечная стенка желудка	2,6± 0,1	20,8± 1,2	0,46± 0,1	75,01 ±11,02	-	0,02± 0,001	-
ПДК в органах	5,0	70,0	-	-	0,5	0,05	0,03

Сравнивая корреляционный уровень ионов тяжелых металлов в органах и тканях у условно здоровой птицы и птицы с клиникой токсического гепатоза, обратили внимание, что больший уровень свинца и кадмия зафиксирован в печени и почках. У птицы без ярко выраженной клиники патологии тяжелые металлы в больших количествах локализуются в мышцах. Т. к. печень депонирует часть свинца и кадмия их уровень в крови значительно ниже, чем у больной птицы. Основной причиной токсических гепатозов птиц на последней стадии откорма наш взгляд является нарушение обмена веществ и несбалансированное кормление. Происходит нарушение обменно-ферментативной функции печени, что приводит к дистрофии органа.

Повышенный уровень свинца, кадмия и нитратов в кормах оказывает на организм токсическое действие, тем более одновременная контаминация обеспечивает комбинированный хронический токсикоз. При поступлении тяжелых металлов с кормами происходит их кумуляция в организме. Доказано, что в случае недостаточного поступления микроэлементов токсины в большей степени проявляют свои конкурентные способности. Отмечается вытеснение меди, цинка и железа из органов и тканей. Кадмий обладает высоким коэффициентом кумуляции, вытесняет цинк из мышц, костей, волос. Кадмий приводит к нарушению не только обмена цинка, но и кальция, фосфора, железа и меди, снижается запас меди в печени.

Дефицит в рационе необходимых нутриентов, присутствие микотоксинов в кормах, высокие уровни ксенобиотиков, технологические стрессы приводят к развитию глубоких нарушений обмена веществ и обменно-ферментативной функции печени.

3.3.Получение, состав и физико-химические свойства препарата

«ОВСАР»

Многокомпонентное фармакологическое средство для фармакокоррекции токсических гепатозов и повышения продуктивности сельскохозяйственной птицы «ОВСАР» содержит в своем составе шрот расторопши, пророщенные зерна овса и фосфогипс при следующем содержании компонентов, мас.%,: пророщенные зерна овса - 40,0; фосфогипс - 10,0; шрот расторопши -50,0.

Все компоненты дополнительно измельчались (размер крупиц не должен превышать 2,5±0,5 мм) и перемешивались. Затем продукт сушился при температуре 40-45ºС с обязательной конвекцией и перемешиванием, до общей влажности не более 10-12%. Готовая смесь должна быть рассыпчатой консистенции.

В состав нашего препарата включены пророщенные зерна овса, т. к. они во многом превосходят проростки других злаков. Пророщенные зерна овса характеризуется оптимальным соотношением белков (9-20%), жиров (11%), углеводов (40%) и витаминов группы В.  Овес содержит растворимую клетчатку, витамины Е и К, кальций, железо, магний, серу, кремний, хром, цинк, фтор, йод. Проростки овса обладают обволакивающим, желчегонным и мочегонным действием. Они активизируют выведение токсинов. Часто проростки овса используют как тонизирующее, общеукрепляющее и противовоспалительное и антигипоксическое средство.

Фосфогипс содержит в своем составе дегидрат сульфат кальция (не менее 92%), кремнефторидов щелочных металлов (Na, K)2SiF6, фторидов кальция CaF2, фосфатов железа и алюминия [-PO4*2H2O; AlPO4*2H2O], фторапатита Ca5(PO4)3, нефелина (Na, K)AlSiO4*nSiO, силикатов Fe и Al.

Шрот расторопши относится к группе растительных гепатопротекторов, которые оказывают защитное и восстанавливающее действие на печень. Шрот представляет собой перемолотые семена расторопши, полученные в результате холодного отжима из них растительного масла. Действующими активными веществами расторопши являются силимарин и силибин.

В сериях проведенных нами лабораторных исследований, химическими методами определяли содержание тяжелых металлов в препарате. В результате проведенных токсикологических исследований содержания олова, мышьяка, свинца, ртути и кадмия в «ОВСАР» не превышало ПДК. Содержание тяжелых металлов в препарате показано в табл. 4.

Таблица 4

Содержание тяжелых металлов препарате, мг/кг

Показатели	Содержание
Свинец	Не более 0,5
Олово	Не более 0,3
Кадмий	Не более 0,29
Ртуть	Отсутствует
Мышьяк	Не более 0,45

3.4. Изучение токсикологических свойств препарата «ОВСАР»

3.4.1. Определение острой токсичности и класса токсичности

Помимо высокой эффективности новые лекарственные средства, препараты и кормовые добавки должны обладать безвредностью по отношению к животным и человеку. В связи с этим изучены токсикологические свойства и дана оценка экологической безопасности «ОВСАР». Через несколько минут после введения препарата, независимо от дозы, у грызунов наблюдали легкое угнетение, заторможенность в движениях, взъерошенность шерстного покрова, цианоз слизистых оболочек. Данные признаки являлись реакцией грызунов на введение препарата и уже через 20-40 минут после затравки не регистрировались. По истечении 14 дней после затравки гибели грызунов не зарегистрировано. По результатам данного опыта, а также согласно общепринятой классификации химических веществ (, 1964) препарат «ОВСАР» является малотоксичным и относится к 4 классу токсичности.

3.4.2. Хроническая токсичность препарата «ОВСАР»

Хроническую токсичность препарата «ОВСАР» изучали в эксперименте на белых крысах, которым скармливали в течение 45 дней «ОВСАР» в дозах: 1-ой группе - 2,5 г/кг массы тела; 2-ой группе - 5 г/кг массы тела; 3-ей группе препарат не скармливали и она служила контролем. Все животные содержались на едином рационе. В течение всего опыта за подопытными животными вели наблюдение, учитывали поедаемость корма, прием воды, состояние слизистых оболочек, волосяного покрова, поведение, взвешивали в начале и в конце эксперимента. В результате у грызунов не зарегистрировали гибели, не отмечали признаков интоксикации и заболеваний. Динамика прироста массы тела представлена в табл. 5. Таблица 5

Динамика живой массы тела крыс при применении «ОВСАР»

в течение 45 дней

№ группы	Доза препарата г/кг	Масса тела, г	Прирост массы тела, г
Начало опыта	Конец опыта
1 опытная 2 опытная 3 контроль	2,5 5,0 -	182,4±3,1 180,5±3,6 178,5±3,2	272,5±3,8 269,3±2,2 265,5±6,2	90,1±3,7 88,8±1,4 84,5±4,2

Из таблицы 5 видно, что применение «ОВСАР» в течение 45 дней способствовало увеличению массы тела испытуемых животных на 4,93 % в 1-й группе и на 4,91 % во 2-й группе по сравнению с контролем. Также было установлено, что «ОВСАР» при применении в дозах 2,5 и 5,0 г/кг в течение 45 дней не оказывал существенного влияния на морфологические и биохимические показатели крови белых крыс.

3.4.3. Субхроническая токсичность на цыплятах-бройлерах

Результаты изучения субхронической токсичности препарата в опытах на цыплятах-бройлерах показали, что ежедневное применение препарата в течение 28 дней в дозе 0,3 г/кг и 1,5 г/кг не вызывает функциональных изменений в организме птицы. Введение препарата не оказывает негативного влияния на организм цыплят-бройлеров, даже при дозе в 5 раз превышающей терапевтическую. Во всех группах, получавших лекарственный препарат, были отмечены более высокие, по сравнению с контрольной группой, привесы. Результаты исследования биохимии крови показали, что препарат не влияет отрицательно на показатели углеводного, белкового и жирового обменов. Следовательно, выбранную для лечения гепатоза цыплят-бройлеров дозу можно считать не токсичной.

3.4.4. Изучение кожно-резорбтивных и аллергенных свойств

У испытуемых крыс изменений кожи хвоста, случаев гибели и признаков интоксикации зарегистрировано не было. Тем самым нами было доказано, что исследуемый препарат «ОВСАР» не обладает каким-либо кожно-резорбтивным действием.

Раздражающее действие «ОВСАР» на слизистые оболочки изучали на морских свинках методом конъюнктивальных проб. Температура тела, частота пульса, количество дыхательных движений на всех этапах опыта находились в пределах нормы. Изменение кровенаполнения конъюнктивы, наличие лакримации и выделений не выявлено. Состояние роговицы и век без изменений.

Аллергенные свойства препарата «ОВСАР» изучали на белых крысах методом накожных аппликаций и на кроликах методом конъюнктивальных проб. В ходе эксперименте было установлено, что 20-ти кратная аппликация препарата не вызывает явлений сенсибилизации.

3.4.5. Эмбриотоксическое и тератогенное действие препарата «ОВСАР»

При проведении исследований обращали внимание на раннюю и позднюю резорбцию плода, общую плодовитость, количество желтых тел беременности, живых и мертвых эмбрионов, проводили обмер и взвешивание плодов. В конце опыта у животных всех групп каких-либо отличий по данным показателям не регистрировали. Внешним осмотром и вскрытием плодов наличия уродств и отклонений от нормального развития у плодов не выявлено. В результате проведенных исследований было определено, что «ОВСАР» не оказывал влияния на течение и продолжительность беременности. Масса, двигательная активность, выраженность исследовательского рефлекса, эмоциональность крысят матери, которых получали «ОВСАР», не отличалась от показателей животных контрольной группы на протяжении всего периода наблюдения. Таким образом, подтверждается отсутствие негативного влияния «ОВСАР» на постнатальное развитие крысят.

3.5. Фармакотерапия токсического гепатоза индюков-бройлеров

препаратом «ОВСАР»

Эффективность препарата «ОВСАР» испытывали на индюшатах-бройлерах. Для этого были взяты по две группы самцов по 100 голов возрастом 119 дней (17 недель). Опытным группам вводили в рацион препарат «ОВСАР» в дозе 0,5 г/кг массы тела в течение 28 дней (до конца откорма). Аналогичная по численности и возрасту группа птиц была отрицательным контролем и не получала никаких добавок. В течение всего периода опыта наблюдали за птицей. Учитывали продуктивность, проводили биохимическое исследование крови. В результате биохимических исследований сыворотки крови была получена биохимическая картина, характеризующая статус организма. Значительно снижен уровень гемоглобина, количества эритроцитов, общего белка сыворотки крови, резервной щелочности крови. Повышенное содержание АЛТ и АСТ. Также превышены предельно допустимые значения по кадмию и свинцу. Патологические изменения в перечисленных ранее показателях свидетельствуют о развитии токсической дистрофии печени. Изменение биохимических показателей благоприятно отразилось на продуктивном здоровье птиц (табл. 6):

Таблица 6

Влияние препарата «ОВСАР» на показатели крови индюшат-бройлеров

Показатели	Группа
Норма	Контрольная	Опытная
Эритроциты, 1012/л	3,28 ± 0,23	2,65 + 0,23	3,27 ± 0,14*
Лейкоциты, 109/л	27,11 + 2,03	36,42 + 2,12	27,18 ± 1,10*
Гемоглобин, г/л	97,22 + 3,14	81,22 + 1,14	96,96 ± 1,12*
Резервная щелочность, об.% СО2	53,17 + 3,12	46,21 + 2,45	54,3 ± 2,11*
Общий белок, г/л	55,46 + 2,54	48,46 + 2,54	54,93 ± 2,13*
Общие липиды, г/л	3,16 + 0,12	3,21 + 0,14	3,14 ± 0,06
Кальций общий, ммоль/л	3,17 + 0,21	3,07 + 0,19	3,12 ± 0,20
Фосфор неорг., ммоль/л	2,13 + 0,10	2,56 + 0,10	2,31 ± 0,16
Соотношение кальция и фосфора	1,5 : 1,0	1,2 : 1,0	1,4 : 1,0
ЩФ, ммоль/ч. л	3,16 + 0,31	3,17 ± 0,31	3,15 ± 0,10
Кадмий, мг/кг	0,18 + 0,03	0,19 + 0,02	0,14 ± 0,02*
Свинец, мг/кг	1,66 + 0,12	1,68 + 0,14	1,24 ± 0,08*
Ртуть, мг/кг	0,025 + 0,001	0,023 + 0,001	0,009 ± 0,001
АлАТ, ммоль/ч. л	2,92 + 0,013	3,95 + 0,0142	2,98 + 0,012*
АсАТ	2,96 + 0,015	3,4 + 0,013	2,98 + 0,013*

* - Р < 0,01 – 0,001 по сравнению с контролем