Работа № 5: определение лизоцима в биологических жидкостях
методом титрования
Компоненты:
1.
2.
Инкубация в термостате
Механизм: __________________________________________________
____________________________________________________________
 | | | | | |
 | | | | ||
1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 КК КС
Результат
Титр лизоцима
Работа №6: кожно-аллергические пробы (КАП)
с инфекционными аллергенами
Компоненты:
Постановка
Учет _____________________
Механизм: ________________________________________________________
_________________________________________________________________
КАП (+)___________________________ КАП ( -) _________________________
Заключение:
Применение:
Подпись преподавателя__________________
Вопросы для самоконтроля:
1. Что такое инфекция?
2. Факторы, обуславливающие развитие инфекционной болезни.
3. Чем характеризуется инфекционная болезнь?
4. Периоды инфекционной болезни.
5. Свойства микроорганизма, обусловливающие инфекционную болезнь.
6. Свойства макроорганизма, обусловливающие инфекционную болезнь.
7. Патогенность и вирулентность микробов.
8. С чем связана вирулентность микроорганизмов?
9. Факторы агрессии, связанные с морфологией возбудителя.
10. Факторы агрессии, связанные с физиологией возбудителя.
11. Характеристика экзотоксинов микробов.
12. Характеристика эндотоксинов микробов.
13. Из каких токсинов можно получить анатоксины и почему?
14. Классификация токсинов по механизму действия.
15. Чем отличаются экзогенные и эндогенные инфекции?
16. Формы инфекций в зависимости от локализации.
17. Повторное проявление инфекционного заболевания.
18. Когда происходит размножение возбудителя в крови?
19. Что такое рецидив, реинфекция, суперинфекция, микстинфекция?
20. Возврат клинических проявлений без повторного заражения.
21. Что значит аутоинфекция?
22. Классификация инфекций по кругу хозяев.
23. Что необходимо для развития эпидемического процесса?
24. Классификация инфекций по путям передачи.
25. Спорадические заболевания, эпидемии, эндемии, пандемии.
26. Что такое конвенционные заболевания?
27. Неспецифическая резистентность организма.
28. Общие факторы неспецифической резистентности.
29. Клеточные факторы неспецифической резистентности.
30. Гуморальные факторы неспецифической резистентности.
31. Защитная функция кожи и слизистых оболочек.
32. Фагоцитоз, стадии.
33. Фагоцитирующие клетки.
34. Макрофаги: фиксированные и подвижные, их роль.
35. Причины незавершенного фагоцитоза.
36. Характеристика и функции нормальных киллеров (NK).
37. Система комплемента: химическая структура, организация.
38. Где синтезируются белки комплемента?
39. Пути активации комплемента, их отличия.
40. Активаторы комплемента по классическому пути.
41. Активаторы комплемента по альтернативному пути.
42. Значение комплемента для развития воспаления.
43. Конечный итог активации комплемента.
44. В каких реакциях участвует комплемент?
45. Лизоцим: химическая структура, биологическая роль.
46. Какие клетки синтезируют лизоцим?
47. Система пропердина: химическая структура, биологическая роль.
48. Интерфероны: химическая структура, биологическая роль.
49. Виды интерферонов, их отличия.
50. Функции лейкоцитарного и иммунного интерферонов.
51. Острофазные белки, их участие в неспецифической резистентности.
52. Отличия неспецифических реакций резистентности от специфических.
53. Механизмы антбактериального иммунитета.
54. .Клеточные факторы антибактериального иммунитета.
55. Что выявляют с помощью кожно-аллергических проб?
56. Факторы антитоксического иммунитета.
57. Факторы противогрибкового иммунитета.
58. Факторы противопаразитарного иммунитета.
Дополнительная информация
ЗАНЯТИЕ №10
Практическое занятие:
АНТИГЕНЫ БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ И РЕАКЦИИ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА
Цель: изучить постановку и учет результатов реакции агглютинации ( РА)
и реакции преципитации (РП) в различных модификациях,
уметь давать правильное заключение по готовым результатам
ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:
1. Антигены, их основные свойства. Антигены бактериальной клетки.
2. Реакция агглютинации: компоненты, механизм, способы постановки.
3. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА): компоненты, механизм,
постановка, применение.
4. Реакция преципитации, компоненты, механизм, постановка, применение.
5. Методы приготовления и применения агглютинирующих адсорбированных
сывороток.
Домашнее задание: записать основные понятия, заполнить таблицы
Основные понятия по теме
Антигены-
Гаптены –
Основные свойства АГ:
Антигены бактериальной клетки –
1. 2.
3. 4.
5.
Серологические реакции –
Стадии: 1)специфическая
2)неспецифическая
Реакция агглютинации –
Варианты использования:
1. Для определения возбудителя -
2. для определения антител -
Варианты постановки РА:
1. ориентировочная -
2. развернутая -
Реакция преципитации (РП) –
варианты РП | применение |
В пробирках: | |
В геле: | |
Лабораторный практикум:
КОМПЛЕМЕНТ НЕЗАВИСИМЫЕ СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ.
РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ (РА), ЕЕ МОДИФИКАЦИИ,
РЕАКЦИИ ПРЕЦИПИТАЦИИ (РП).
1. Поставить ориентировочную РА на стекле для определения неизвестной
культуры (при диагностике дизентерии). Сделать вывод, зарисовать.
2. Разобрать постановку и учет результатов развернутой РА для определения
неизвестного микроба ( при диагностике дизентерии), зарисовать.
3. Изучить и сделать вывод по готовой РА при определении антител в
диагностике бруцеллеза (реакция Райта).
4. Оценить готовую реакцию непрямой ( пассивной) гемагглютинации
(РНГА): описать схему постановки, учесть результаты, дать заключение
5. Разобрать и записать схему постановки реакции Кумбса (по таблице).
6. Поставить реакцию Асколи для выявления сибиреязвенного антигена,
оценить результат, дать заключение.
7. Дать заключение по определению токсигенности дифтерийной палочки
(готовая демонстрация). Зарисовать.
8. Записать схему постановки реакции Манчини и зарисовать результаты.
9. Описать диагностические препараты, используемые для постановки
изучаемых реакций.
10. Уборка рабочего места.
11. Отчет по протоколу.
Работа № 1: ориентировочная реакция агглютинации (РА)
для определения неизвестной культуры
Компоненты: 1. культура
2. диагностические агглютинирующие сыворотки -
Механизм:
Учет
дизентерийная Зонне Флекснера
поливалентная
Результат:
Заключение:
Работа №2: развернутая реакция агглютинации (РА) при определении
неизвестной культуры
Компоненты:
1. культура _____________________________________________________
2. аггл. сыворотка _______________________________________Титр=
Инкубация в термостате_________________
Механизм: _________________________________________________________ ___________________________________________________________________
 | | | | | | | |
1/100 1/200 1/400 1/800 1/1600 1/3200 КС КК
Результат:
Заключение:
Работа № 3: Реакция агглютинации (РА) при определении антител
А) Ориентировочная – при бруцеллезе реакция Хеддльсона -
Компоненты:
1. сыворотка______________________________________________________
2. диагностикум___________________________________________________
Инкубация ______________________
Механизм: ________________________________________________________
0,1мл 0,2мл 0,4 мл КД
Результат:
Заключение:
Б) развернутая – при бруцеллезе реакция Райта.
Компоненты: 1. сыворотка
2. диагностикум
Инкубация -
Механизм: _______________________________________________________
Титр АТ в РА _____________________________________________________
 | | | | | | | |
1/100 1/200 1/400 1/800 1/1600 1/3200 КС КД
Диагностический титр (ДТ) –
Результат: титр АТ= ДТ=
Заключение:
Работа № 4: Реакция непрямой или пассивной гемагглютинации (РНГА-РПГА) при серодиагностике инфекций
Компоненты:
Инкубация
Механизм: _______________________________________________________
_________________________________________________________________
РНГА ( + ) – РНГА
Титр АТ в РНГА -___________________________________________________
 | | | | | | | |
 | | ||||||
1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280 КС КД
Учет: Титр АТ= ДТ=
Заключение:
Работа № 5: реакция Кумбса на выявление неполных антител
Реакция двухфазная.
1-я фаза –
2-я фаза
Механизм: __________________________________________________________
_____________________________________________________________________
Работа №6: реакция Асколи при выявлении сибиреязвенного антигена
Компоненты:
Учет
Результат:
Заключение:
Работа №7: определение токсигенности дифтерийной палочки
реакцией преципитации в геле
Компоненты:
Учет
 |
Результат:
Заключение:
Работа №8: реакция преципитации в геле для определения уровня
иммуноглобулинов - метод радиальной иммунодиффузии Манчини
Компоненты: 1._____________________________________________________
2._____________________________________________________ 3._____________________________________________________
| | |
 | |
Результат:
Заключение:
Работа № 9: диагностические препараты, используемые
для постановки изучаемых реакций
1. агглютинирующие сыворотки:
• поливалентные
· видовые
· монорецепторные.-
Способ получения агглютинирующих адсорбированных сывороток -
2. преципитирующие сыворотки
3. сыворотки антиглобулиновые (АГС)
4. сыворотки монорецепторные против иммуноглобулинов (G, M,A) человека
5. сыворотка противодифтерийная антитоксическая
6. диагностикумы видовые
7. диагностикумы эритроцитарные
Подпись преподавателя___________________
Вопросы для самоконтроля
1. Понятие об антигене.
2. Условия, определяющие антигенные свойства различных веществ.
3. Характерные свойства антигенов.
4. Что такое антигенность, с чем она связана?
5. Что такое валентность антигена?
6. Как можно повысить антигенность?
7. Адъюванты, химическая природа, роль.
8. С чем связана специфичность антигенов?
9. Что такое эпитопы, их строение, виды, свойства.
10. От каких факторов зависит иммуногенность антигенов?
11. Свойства антигена, обусловливающие его иммуногенность.
12. Типы антигенной специфичности.
13. Специфичность антигенов: видовая, групповая, типовая, патологическая.
14. Экзо - и эндоантигены.
15. Отличия полноценных антигенов от гаптенов.
16. Условия перехода гаптена в полноценный антиген.
17. Антигены бактериальных клеток.
18. Почему экзотоксины бактерий являются полноценными антигенами?
19. Особенности иммунитета при бактериальных инфекциях.
20. Основные участники антибактериальной защиты.
21. Какими факторами обусловлен противогрибковый иммунитет?
22. Особенности противопаразитарного иммунитета.
23. Механизм противоопухолевого иммунитета.
24. Что лежит в основе серологических реакций?
25. Реакция агглютинации (РА): понятие, механизм, варианты постановки.
26. Компоненты ориентировочной и развернутой РА для выявления антигена.
27. Компоненты ориентировочной и развернутой РА для выявления антител.
28. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА): понятие, механизм.
29. Компоненты РНГА, особенности постановки, положительный результат.
30. Реакция Кумбса: компоненты, механизм.
31. Понятие и механизм реакции преципитации.
32. Варианты постановки реакции преципитации
33. Необходимые условия постановки РП.
34. В основе каких реакций лежит РП?
35. Примеры реакции преципитации в геле.
36. Особенности реакции Манчини.
Дополнительная информация
ЗАНЯТИЕ № 11
Лабораторный практикум:
КОМПЛЕМЕНТ ЗАВИСИМЫЕ СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ: СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА (РСК), ИММОБИЛИЗАЦИИ (РИБТ).
РЕАКЦИИ С МЕЧЕННЫМИ АНТИТЕЛАМИ:ИММУНОФЛЮО-РЕСЦЕНЦИИ (РИФ), ИМУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ (ИФА),
РАДИОИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ (РИА).
Цель: научиться ставить, учитывать результаты и давать оценку изучаемым
серологическим реакциям.
ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:
1. Реакция связывания комплемента: компоненты, механизм, постановка,
применение.
2. Реакция иммобилизации. Механизм, постановка и применение РИБТ.
3. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ): компоненты, механизм, постановка,
Применение.
4. Иммуноферментный анализ (ИФА): компоненты, механизм, постановка,
применение. Иммуноблотинг.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Учесть результат и сделать вывод при постановке РСК на определение
антител в сыворотке больного.
2. Разобрать и записать схему постановки, компоненты реакции
иммунофлюоресценции (РИФ) прямой и непрямой варианты.
3. Разобрать постановку и учет результатов ИФА на определение антител в
парных сыворотках, дать заключение.
4. Изучить и записать иммунопрепараты по теме занятия.
5. Защита протокола.
6. Уборка рабочего места.
Домашнее задание: записать основные понятия, заполнить таблицы
Работа 1: реакция связывания комплемента (РСК)
при определении антител в сыворотке больного
Компоненты: специфическая система –
индикаторная система –
Условия постановки
Схема.
Специфическая система индикаторная система
АГ АТ К ЭБ ГС
РСК (+) РСК ( - )
Механизм: __________________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
 | | | | | | | | |
1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 КС КД КЭ
Титр АТ в РСК - ___________________________________________________
Результат: Титр АТ = ДТ=
Заключение:
Реакция иммобилизации (РИБТ )_____________________________________
Назначение:
Компоненты:
Механизм:
 |  |
 | |
опыт контроль
Учет:
Заключение:
Реакции с использованием меченых антител (реже антигенов)
название реакции | Метка | выявление метки |
РИФ – | ||
ИФА – | ||
РИА - |
Работа № 3: Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)
Прямая РИФ (ПИФ) позволяет выявить _____________________________
Компоненты: 1. ______________________________________________________
2.__________________________________________________________________
ФИТЦ – это
Постановка:
Механизм:
Учет:
РИФ ( + ) – РИФ ( - ) –
Непрямая РИФ – двухфазная: 1-я фаза _______________________________
2-я фаза____________________________________________________________
1вариант – для выявления возбудителя -
Компоненты: 1.
2. .
3.
Механизм:
2 вариант – для выявления антител –
Компоненты: 1.
2.
3.
Механизм:
Иммуноферментный анализ (ИФА)- сэндвич-метод
Компоненты:
Постановка:
Механизм:
ИФА (+)________________________ ИФА (-) ___________________________
Работа №4: иммуноферментный анализ (ИФА)
для определения антител в парных сыворотках
Компоненты:
 | | | | | | | | | |
1 сыв
2 сыв
1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1КС КД
Титр АТ в ИФА
Результат:
Заключение:
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 |
