Работа № 5: иммунопрепараты по теме занятия
1. сыворотки видовые меченные ФИТЦ
2. глобулин кролика против глобулинов человека, меченный ФИТЦ.
3. видовые диагностикумы
4. АГС, меченная пероксидазой
5. комплемент
6. гемолитическая сыворотка
Подпись преподавателя__________________
Вопросы для самоконтроля:
1. Механизм реакции связывания комплемента.
2. Специфическая и индикаторная системы в РСК.
3. Особенности постановки РСК.
4. Требования к компонентам для РСК.
5. Возможные видимые результаты РСК.
6. Применение РСК.
7. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ), механизм.
8. Компоненты и особенности постановки прямой РИФ. Применение.
9. Компоненты и особенности постановки непрямой РИФ. Применение.
10. Твердофазные методы, особенности постановки.
11. Иммуноферментный анализ (ИФА), особенности постановки.
12. Компоненты ИФА, выявляющая система.
13. Применение ИФА.
14. Особенности постановки иммуноблотинга, применение
Дополнительная информация
ЗАНЯТИЕ №12
Практическое занятие:
АНТИГЕНЫ ВИРУСОВ. РЕАКЦИИ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДИАГНОСТИКЕ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ: РЕАКЦИЯ ТОРМОЖЕНИЯ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ (РТГА), РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ПО ТИПУ «ЦВЕТНОЙ ПРОБЫ».
Цель: изучить принцип постановки и учета результатов изучаемых реакций.
ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:
1. Антигены вирусов.
2. Особенности противовирусного иммунитета.
3. Серологические реакции, используемые в вирусологии: реакция торможения
гемагглютинации (РТГА): компоненты, механизм постановки, применение.
4. Реакция нейтрализации по типу «цветной пробы» (РН на культуре клеток).
Компоненты, механизм, постановка, применение.
5. Особенности применения других серологических реакций в вирусологии.
Домашнее задание: записать основные понятия, заполнить таблицы
Основные понятия по теме
Антигены вирусов
Факторы противовирусного иммунитета
Серологические реакции в вирусологии применяются для:
1. определения возбудителя _________________________________________
2. определения антител______________________________________________
При серодиагностике вирусных инфекций всегда используются парные сыворотки, взятые с 2-недельным интервалом, чтобы выявить нарастание уровня антител.
Диагностическим считается увеличение уровня антител в 4 и более раз.
Примеры серологических реакций:
Нейтрализации | выявление иммунного комплекса |
Лабораторный практикум:
СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ В ВИРУСОЛОГИИ:
РЕАКЦИЯ ТОРМОЖЕНИЯ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ ( РТГА),
РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ПО ТИПУ «ЦВЕТНОЙ ПРОБЫ».
.
1. Поставить реакцию торможения гемагглютинации (РТГА) на стекле для
определения типа вируса гриппа (идентификация вируса).
2. Учесть результат РТГА в парных сыворотках на определение антител при
серодиагностике гриппа, зарисовать, дать заключение.
3. Оценить готовый результат реакции нейтрализации - РН « цветная проба»
при идентификации вирусов полиомиелита, зарисовать.
4. Разобрать и записать постановку и учет РН «цветная проба» на определение
антител при серодиагностике полиомиелита.
5. Разобрать постановку и учет других серологических реакций, используемых
в диагностике вирусных инфекций
6. Описать иммунные препараты по теме занятия.
7. Уборка рабочего места.
8. Отчет по протоколу.
Работа №1: реакция торможения гемагглютинации (РТГА)
для идентификации вируса гриппа
Компоненты: 1______________________________
2.________________________________________3_______________________
Постановка:
Механизм: ________________________________________________________
_________________________________________________________________
РТГА (+) ___________________________РТГА (-) _______________________
А1 А2 В
Результат:
Заключение:
Работа №2: РТГА в парных сыворотках на определение антител
при серодиагностике гриппа
Компоненты:1.______________________
2. _____________________________3__________________________________
Постановка:
Механизм: ________________________________________________________
__________________________________________________________________
РТГА (+) _____________________________РТГА (-) ______________________
Титр АТ в РТГА ____________________________________________________
 | | | | | | | | | |
1сыв
 | | | | | | | | | |
2 сыв
1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 КС КД КЭ
Результат: в 1 сыв. Титр АТ=__________, во 2 сыв. Титр АТ =________________
___________________________________________________________________
Заключение:
Работа №3: реакция нейтрализации по типу «цветной пробы»
при идентификации вируса полиомиелита
Компоненты: 1.___________________________ 2____________________________________
3 __________________________
4______________________________________
Постановка:
Механизм: _________________________________ ________________________
___________________________________________________________________
РН «ЦП» (+) ______________________РН «ЦП» (-)________________________
 | | |
I типа II типа III типа
Заключение:
Работа № 4: реакция нейтрализации по типу «цветной пробы»
на определение антител при серодиагностике полиомиелита
Компоненты: 1.____________________________
2______________________________________3________________________
4______________________________________
Постановка:
Механизм: _________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
РН «ЦП» (+) ______________________РН «ЦП» (-)________________________
Титр АТ в РН «ЦП» __________________________________________________
 | | | | | | | | | |
| | | | | | | | | |
1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/356 1/712 КК КС КД
Результат:
Заключение:
Работа № 5: Диагностические препараты, используемые для постановки изучаемых реакций
1. вирусные диагностикумы
2. противовирусные сыворотки
3.
Подпись преподавателя________________
Вопросы для самоконтроля:
1. Серологические реакции, применяемые в вирусологии.
2. Особенности определения уровня антител при вирусных инфекциях.
3. Реакции, основанные на нейтрализации вируса.
4. Вирусологические реакции, на выявления иммунного комплекса.
5. К какому типу иммунных реакций относится РТГА?
6. Компоненты РТГА для определения вируса и для определения антител.
7. Особенности постановки РТГА для идентификации вируса.
8. Особенности постановки РТГА для определения антител.
9. Положительный результат в РТГА при определении антител.
10. Особенности постановки реакции нейтрализации « цветной проба».
11. Компоненты реакции нейтрализации « цветной проба».
12. Механизм РН «цветная проба».
13. Положительный результат в реакции нейтрализации « цветной проба».
14. Применение реакции нейтрализации « цветной проба».
ЗАНЯТИЕ № 13
Практическое занятие:
ИММУНОПРЕПАРАТЫ: ВАКЦИНЫ, СЫВОРОТКИ,
ДИАГНОСТИКУМЫ, ИХ ПОЛУЧЕНИЕ И ПРИМЕНЕНИЕ
Цель: изучить принципы приготовления и применения иммунопрепаратов
различных групп
ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:
1. Вакцины: определение, классификация, применение.
2. Живые вакцины: получение, применение, достоинства и недостатки.
3. Инактивированные (корпускулярные) вакцины: получение, применение, достоинства и недостатки.
4. Субклеточные и субъединичные (химические) вакцины: получение,
применение, достоинства и недостатки. Роль адъювантов. Генно-инженерные вакцины,
5. Ассоциированные (комбинированные) вакцинные препараты. Достоинства.
6. Анатоксины: получение, очистка, титрование, применение.
7. Антитоксические сыворотки: получение, титрование, применение.
8. Препараты иммуноглобулинов: виды, получение, очистка. Применение.
9. Агглютинирующие сыворотки, их виды, получение, применение.
10. Моноклональные антитела, их получение и применение.
11. Диагностикумы, их виды, получение и применение.
. Домашнее задание: записать основные понятия, заполнить таблицы
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Оформить классификацию вакцин.
2. Записать календарь профилактических прививок.
3. Из культуры стафилококков приготовить убитую вакцину.
Записать правила приготовления и применения аутовакцин.
4. Описать иммунопрепараты из различных групп, знать методы их
приготовления, состав, применение.
5. Уборка рабочего места.
6. Отчет по протоколу.
Основные понятии по теме
Группы иммунопрепаратов:
1. для создания активного иммунитета –
2. для создания пассивного иммунитета -
3. для подавления размножения возбудителя в организме-
4. для диагностики заболеваний -
Вакцины –
Характеристика вакцин
виды вакцин | Достоинства | недостатки |
Аттенуировнные | ||
Инактивированные | ||
Субъединичные (химические) | ||
Молекулярные | ||
Генно-инженерные | ||
Ассоциированные |
Работа № 1: классификация вакцин
Бактериальные | Вирусные |
1. Аттенуированные (живые) | |
2. Инактивированные | |
Профилактические Лечебные: | |
Субъединичные (химические) | |
4. Молекулярные (анатоксины) | 5. Генно-инженерные (рекомбинанные) |
6. Ассоциированные | |
Работа №2: Календарь профилактических прививок от 01.01.2001Г.
Возраст | против инфекции | Вакцины | кратность введения | сроки ревакцинации |
Работа №3: приготовление убитой вакцины
Используют штамм стафилококка _____________________________________
Этапы приготовления:
1.посев на __________________________________________________________
2. проверка _________________________________________________________
3. приготовление ____________________________________________________
4.инактивация ______________________________________________________
5. контроль ________________________________________________________
6.стандартизация ___________________________________________________
7. применение ______________________________________________________
Работа №4: состав, получение и применение
других иммунопрепаратов
Анатоксины –
Схема получения:
очистка___________________, титрование_______________________________
сорбирование
Проверка
Применение:
Антитоксические сыворотки-
Схема получения
Очистка_______________________титрование___________________________
Сорбирование
Проверка
Применение:
Примеры:
Осложнения
Предупреждение осложнений
Метод Безредки:
Гамма-глобулины –
По получению:
По составу:
По назначению:
Получение иммуноглобулинов –
Очистка
Примеры:
Антибактериальные –
Противовирусные –
Моноклональные антитела МКА –
Получение –
Применение –
Преимущества –
Диагностические сыворотки -
(агглютинирующие, преципитирующие, меченные и др.) –
Получение
Применение
Гемолитическая сыворотка
Получение
Применение
Диагностические препараты
препарат | для выявления | реакция |
Диагностические сыворотки: 1.агглют. поливалентные 2.агглют видовые 3. преципитирующие сыворотки 4.монорецепт. против Ig G человека 5. АГС 6. видовая, меченная ФИТЦ 7. АГС, меченная ФИТЦ 8. АГС, меченная пероксидазой 9. гемолитическая 10. антитоксические 11. противовирусные | ||
Диагностикумы: 1.поливалентный (единый) 2. видовые 3. эритроцитарный видовой 4. вирусный 5. | ||
Комплемент | ||
Фаги видовые типовые | ||
Аллергены бактерий |
Подпись преподавателя___________________
Вопросы для самоконтроля
1. Препараты для создания активного иммунитета.
2. Препараты для создания пассивного иммунитета.
3. Препараты для определения возбудителя.
4. Препараты для определения антител.
5. Иммунобиологические препараты, вызывающие гибель возбудителя.
6. Принципы классификации вакцин.
7. Достоинства и недостатки аттенуированных вакцин.
8. Методы аттенуации возбудителя.
9. Примеры аттенуированных вакцин.
10. Достоинства и недостатки убитых вакцин.
11. Методы инактивации возбулителя при получении вакцин.
12. В каких вакцинах использованы дивергентные штаммы возбудителей?
13. Отличия аттенуированных вакцин от инактивированных?
14. Применение живых вакцин.
15. Применение убитых вакцин.
16. Получение рекомбинантных вакцин.
17. Примеры рекомбинантных вакцин.
18. Анатоксины: понятие, методы получения.
19. Необходимые условия для получения анатоксина.
20. Против каких инфекций можно получить анатоксины?
21. Примеры анатоксинов.
22. Применение анатоксинов.
23. Какой иммунитет формируется после введения анатоксинов?
24. Достоинства и недостатки ассоциированных вакцин.
25. Виды ассоциированных вакцин.
26. Получение диагностических сывороток.
27. Виды диагностических сывороток.
28. Меченные сыворотки, их виды, применение.
29. Антиглобулиновые сыворотки, виды, получение применение.
30. Монорецепторные сыворотки против глобулинов человека:
получение, применение.
31. Гемолитическая сыворотка: получение, применение.
32. Получение лечебных сывороток.
33. Виды лечебных сывороток.
34. Моноклональные антитела, особенности, получение.
35. Какой иммунитет создают лечебные сыворотки?
36. Виды иммуноглобулинов.
37. Получение и применение гомологичных иммуноглобулинов.
38. Диагностикумы: виды, состав, применение.
39. Состав и применение аллергенов.
40. Применение пробиотиков, механизм действия.
ЗАНЯТИЕ № 14
Контрольное практическое занятие:
АНТИГЕНЫ БАКТЕРИЙ И ВИРУСОВ,
ИХ ИЗУЧЕНИЕ И ПРИМЕНЕНИЕ
Цель: оценить степень усвоения теоретического материала и практических
навыков по ПРОЙДЕННОМУ РАЗДЕЛУ
ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ: смотри вопросы занятий №№ 9 -13
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:
1. Ответить на 20 вопросов по теме.
2. Самостоятельно поставить и оценить одну из перечисленных реакций
иммунитета: агглютинации (РА) на стекле, р. Асколи, РТГА на стекле.
3. Дать заключение по готовым демонстрациям:
- реакция нейтрализации токсина РН на белых мышах для определения
токсина,
- развернутая реакция агглютинации (РА) для определения неизвестного
микроба и определения антител;
- реакция преципитации (РП) на определение токсигенности культур,
реакция Манчини,
- реакция связывания комплемента (РСК) на определение антител,
- реакция торможения гемагглютинации (РТГА) на определение антител в
парных сыворотках,
- реакция нейтрализации (РН) по типу « цветной пробы» при идентификации
вируса,
- реакция нейтрализации (РН) по типу « цветной пробы» на определение
антител в парных сыворотках,
- иммуноферментный анализ (ИФА) в парных сыворотках,
- иммуноблотинг
- прямая иммунофлюоресценция (ПИФ) для определения возбудителя
- непрямая РИФ для серодиагностики
4. Охарактеризовать состав, получение и применение 1-2 иммунопрепаратов.
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА:
1. Борисов, микробиология, вирусология, иммунология:
учебник / . - М.: информационное агентство»,
20с.
2. Вирусология: в 3-х т. /под ред Б. Филда, Д. Найна. – М.: Мир, 1989.
3. Клиническая иммунология и аллергология: учеб. пособие / Под ред.
– М.: Медицинское информационное агентство,
2002. – 651 с.
4. Медицинская микробиология / под ред. , . -
М.:ГОЭТАР МЕДИЦИНА, 1999.-1200 с.
5. Медицинская микробиология: учеб. пособие / под. ред.
и . - СПб.,19с.
6. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология: учебник.
/ под ред , . - М.: Медицина, 19с.
7. Микробиология: учебник. / А..А. Воробьев [и др.]; под ред. А..А. Воробьева. –
М.:Медицина, 19с.
8. Петров /.-М.:Медицина,19с.
9. Плейфер Дж. Наглядная иммунология: пер. с анг. /Дж. Плейфер. –
М.:ГЭОТАР МЕДИЦИНА,199с.
5. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии,
вирусологии, иммунологии / под ред. . - М.:Медицина,
1993.-240 с.
6. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам
исследования / под. ред. . - М.:Медицина, 19с.
СОДЕРЖАНИЕ
Стр.
1. Занятие 9. Практическое занятие: Инфекция и ответные реакции
организма. гуморальные и клеточные факторы защиты…
2. Лабораторный практикум: методы диагностики инфекционных
заболеваний - биологический и аллергический. 7
3. Работа №1: методика заражения и вскрытия лабораторного животного.
4. Работа № 2: капсульные микроорганизмы в мазках-отпечатках из органов. .8
5. Работа № 3 Микроскопия мазков с незавершенным фагоцитозом.. 8
6. Работа №4: реакция нейтрализации in vivo на белых мышах при
диагностике ботулизма…
7. Работа № 5: определение лизоцима в биологических жидкостях методом
титрования9
8. Работа №6: кожно-аллергические пробы (КАП) с инфекционными
аллергенами
9. Вопросы для самоконтроля 10
10. Занятие№10. Практическое занятие: антигены бактериальной
Клетки и реакции антибактериального иммунитета.. …2
11. Лабораторный практикум: комплемент независимые серологические
реакции. Реакция агглютинации (РА), ее модификации, реакции
преципитации (РП). . … …. .. . …
12. Работа № 1: ориентировочная реакция агглютинации (РА) для
определения неизвестной культуры.…. . . ….. . . …14
13. Работа №2: развернутая реакция агглютинации (РА) для определения
неизвестной культуры.. …
14. Работа № 3: Реакция агглютинации (РА) при определении антител
15. Работа № 4: Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)
при серодиагностике инфекций. . . …16
16. Работа № 5: реакция Кумбса на выявление неполных антител
17. Работа № 6: реакция Асколи при выявлении сибиреязвенного антигена
18. Работа №7: определение токсигенности дифтерийной палочки
реакцией преципитации в геле … … . ...17
19. Работа №8: реакция преципитации в геле для определения уровня
иммуноглобулинов - метод радиальной иммунодиффузии Манчини
20. Работа № 9: диагностические препараты, используемые для
постановки изучаемых реакций. . . …
21. Вопросы для самоконтроля … 18
21. Занятие № 11. Лабораторный практикум: комплемент зависимые
серологические реакции: связывания комплемента (РСК),
иммобилизации (РИБТ). Реакции с меченными антителами:
иммунофлюоресценции (РИФ), имуноферментный анализ (ИФА),
радиоиммунологический анализ (РИА)…
22. Работа 1: реакция связывания комплемента (РСК) при определении
антител в сыворотке больного.
23. Работа № 3: Реакция иммунофлюоресценции (РИФ.
24. Работа №4: иммуноферментный анализ (ИФА) для определения
Антител в парных сыворотках . .. . …
25. Работа № 5: Диагностические препараты, используемые для
постановки изучаемых реакций.. . .. 23
26. Вопросы для самоконтроля 4
27. Занятие №12. Практическое занятие: антигены вирусов…
28. Лабораторный практикум: реакции, используемые в диагностике
вирусных инфекций: реакция торможения гемагглютинации (РТГА),
реакция нейтрализации по типу «цветной пробы» и др. . … .
29. Работа №1: реакция торможения гемагглютинации (РТГА)
для идентификации вируса гриппа….… . ……… .. 26
30. Работа №2: РТГА в парных сыворотках на определение антител
при серодиагностике гриппа..… . . . …….. ….… . ..27
31. Работа №3: реакция нейтрализации по типу «цветной пробы»
при идентификации вируса полиомиелита… …
32. Работа №4: реакция нейтрализации по типу «цветной пробы»
для определения антител при серодиагностике полиомиелита.. . 28
33. Работа №5: Диагностические препараты, используемые
для постановки изучаемых реакций.. .. ….. . …
34. Вопросы для самоконтроля
35. Занятие № 13. Практическое занятие: иммунопрепараты: вакцины,
сыворотки, диагностикумы, их получение и применение
36. Работа № 1: классификация вакцин…
37. Работа №2: Календарь профилактических прививок. 32
38. Работа №3: приготовление убитой вакцины.. 32
39. Работа №4: состав, получение и применение других иммунопрепаратов
40. Вопросы для самоконтроля 5
41. Занятие № 14 Контрольное практическое занятие: антигены бактерий
и вирусов, их изучение и применение. . … . . 36
42 Рекомендуемая литература.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 |
