Фармакогностическое исследование некоторых видов рода stellaria и возможность их использования в медицинской практике (стр. 2 )

Элементный состав надземной части исследуемых видов по качественным характеристикам существенно не различается и представлен 41 химическим элементом. Высоким содержанием отличаются такие биоэлементы, как калий (от 21,75 до 49,00 мг/г), кальций (от 5,20 до 13,00), магний (от 1,96 до 4,20), натрий (от 0,21 до 5,20), железо (0,29 до 0,90), цинк (от 0,02 до 0,06) и кремний (от 0,09 до 0,55 мг/г).

С целью оценки влияния природно-климатических условий, проведено сравнительное исследование элементного состава надземной части з. средней, собранной в различных районах. Полученные данные свидетельствуют, что данный фактор не оказывает значимого влияния на диапазон концентраций химических элементов в растении.

Рассматривая полученные нами результаты фитохимического анализа четырех исследуемых видов, а также анализируя имеющиеся литературные данные, можно заключить, что наибольший интерес для дальнейшего изучения представляют полисахариды и сапонины з. средней, поскольку данное растение отличается наибольшим их содержанием по сравнению с тремя другими видами. К тому же указанные группы соединений з. средней практически не изучены.

Выделение и характеристика

полисахаридного комплекса звездчатки средней

Выделение полисахаридов проводили по схеме, представленной на рис. 1.

Рисунок 1 – Схема выделения полисахаридов из звездчатки средней

Методом последовательной экстракции и осаждения этиловым спиртом из воздушно-сухой надземной части растения получены три полисахаридные фракции: SM 1, SM 2 и SM 3, выход которых приведен в табл. 2.

Таблица 2 – Характеристика фракций полисахаридов звездчатки средней

Фракция	Выход, %1	Содержание, %2
GalA	Белок	Метоксилы	Glc	Gal	Man	Ara	Xyl	Rha
%	степень
SM 1	1,86	13,22	55,26	2,03	93,04	8,05	5,78	2,38	5,34	0,36	2,22
SM 2	0,09	19,41	22,54	2,30	71,80	12,46	8,51	2,77	4,79	0,79	2,51
SM 3	1,17	75,96	15,52	2,02	14,24	3,29	2,23	0,41	1,98	1,21	1,64

Примечание. 1 - выход рассчитан от массы воздушно-сухого сырья; 2 – массовые проценты.

Фракции SM 1 и SM 2, содержащие ВРПС, представляют собой аморфные порошки светло-коричневого цвета, растворимые в воде, в водных растворах кислот и щелочей, но нерастворимые в органических растворителях. После кислотного гидролиза фракций получены положительные реакции с реактивом Фелинга.

Фракция SM 3, содержащая пектиновые вещества (ПВ), представляет собой аморфный порошок светло-серого цвета, растворимый в воде с образованием вязкого раствора. ПВ из водного раствора осаждаются 1%-ным раствором сульфата алюминия с образованием пектатов.

Количественный моносахаридный состав фракций полисахаридов был определен методом ГЖХ после полного кислотного гидролиза образцов трифторуксусной кислотой с последующим ацетилированием полученных моносахаридов. Установлено, что углеводные цепи выделенных полисахаридов главным образом представлены остатками арабинозы (Ara), глюкозы (Glc) и галактозы (Gal), а в качестве минорных компонентов идентифицированы остатки рамнозы (Rha), ксилозы (Xyl) и маннозы (Man) (табл. 2).

В состав всех фракций полисахаридов входят остатки галактуроновой кислоты, содержание которой определено спектрофотометрически по реакции с 3,5-диметилфенолом в присутствии концентрированной серной кислоты с измерением величины оптической плотности при двух длинах волн – 400 и 450 нм. Установлено, что фракция SM 3 отличается высоким их содержанием (76%), что указывает на принадлежность к классу пектинов.

Идентификацию галактуроновой кислоты во фракциях полисахаридов проводили ферментативным гидролизом образцов a-1,4–полигалактуроназой с последующим анализом гидролизата методом бумажной хроматографии (БХ) в системе растворителей н-бутанол-пиридин-вода (6:4:3) и детекцией пятен кислым фталатом анилина.

Степень метилэтерифицирования остатков галактуроновой кислоты определяли спектрофотометрическим методом по реакции с 2,4-пентандионом и калибровочному графику, построенному для метанола, при длине волны 412 нм. Установлено, что часть остатков галактуроновой кислоты полисахаридов всех выделенных фракций метилэтерифицирована. Полисахариды фракций SM 1 и SM 2 являются высоко метилэтерифицироными (степень метилэтерификации 93% и 72%, соответственно), тогда как полисахариды фракции SM 3 имеют низкую степенью метилэтерифицирования карбоксильных групп остатков галактуроновой кислоты (степень метилэтерификации 14%). Содержание метоксильных групп в полисахаридах представлено в табл. 2.

В состав всех фракций входит значительное количество белка, содержание которого составляет от 15 до 55% (табл. 2).Для определения степени гомогенности выделенных образцов полисахаридов, использовали метод ионообменной хроматографии (ИОХ) на DEAE-целлюлозе с элюентами от 0,01 М/л до 1 М/л NaCl.

При этом установлено, что выделенные фракции (SM 1, SM 2 и SM 3) гетерогенны: состоят из смеси полисахаридов, отличающихся содержанием галактуроновой кислоты (от 2,17 до 72,12%) и белковых компонентов (от 17,3 до 92,8%). Выход полученных фракций приведен в табл. 3.

Таблица 3 – Характеристика полисахаридов звездчатки средней после разделения на DEAE-целлюлозе

Фракция	Элюент NaCl, М/л	Выход, %1	Содержание2
GalA	Белок	Rha	Ara	Xyl	Man	Glc	Gal
SM 1	0,01	5,70	2,17	41,63	1,12	18,81	1,40	8,65	13,65	10,77
0,1	36,56	13,20	60,25	3,31	6,43	1,05	0,93	4,06	8,13
0,2	21,58	13,16	68,77	2,96	3,43	0,46	0,86	4,75	4,35
0,3	6,71	9,75	75,44	1,71	2,29	0,38	0,83	5,68	2,57
0,4	3,11	7,40	80,26	1,1	3,55	0,69	0,03	3,42	3,13
1	8,14	1,58	89,78	0,16	0,57	сл	сл	1,52	0,31
SM 2	0,01	9,09	2,95	76,27	1,10	2,52	0,63	1,40	8,58	4,11
0,1	20,42	35,94	49,21	1,09	5,51	0,72	0,78	1,45	5,15
0,2	25,14	35,61	47,59	1,12	6,33	0,78	1,34	2,38	3,48
0,3	2,81	11,87	77,22	0,82	2,82	0,86	0,03	3,11	2,48
0,4	1,88	8,76	85,46	0,33	1,48	0,25	0,24	0,54	0,91
1	4,77	1,94	92,81	0,18	0,83	сл	сл	0,87	0,48
SM 3	0,01	1,53	23,39	55,64	6,33	4,43	1,29	0,35	2,26	5,24
0,1	22,01	29,64	61,79	1,47	1,91	0,20	0,21	1,13	2,13
0,2	26,84	63,34	30,92	0,80	1,13	0,22	0,15	0,75	0,98
0,3	19,14	70,68	24,97	0,43	1,33	0,33	0,09	0,24	1,20
0,4	2,38	72,12	17,29	3,96	1,74	0,72	0,50	1,57	1,90
1	3,91	3,97	85,95	0,96	0,17	сл	сл	0,09	0,13

Примечание. 1 - выход рассчитан от массы воздушно-сухого сырья; 2 – массовые проценты; сл – следовые количества.