ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ НА СОВРЕМЕННОМ ЭТАПЕ
Врачи-бактериологи лаборатории особо опасных инфекций
,
ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Омской области»
Холера, чума и сибирская язва, унесшие миллионы человеческих жизней, наряду с вирусными инфекциями, в настоящее время продолжают представлять особую опасность для России. На протяжении немного более 100 лет практически все континенты были охвачены шестью пандемиями, последняя из которых закончилась в 1926г.
В настоящее время принято считать, что, по крайней мере, 5-ая и 6-ая пандемии были вызваны V. cholerae О1 серогруппы классического биовара.
В 1905 г. на Синайском полуострове, на карантинной станции Эль-Тор, от больных диареей паломников выделяют холерные вибрионы О1 серогруппы, которые отличаются от классических по ряду фенотипических свойств. По названию станции эти вибрионы отнесли к новому биовару – эльтор.
В 1992 г. неожиданно в Индии и Бангладеш эпидемия холеры была вызвана холерными вибрионами не О1 серогруппы. Анализ этих вибрионов показал, что они принадлежат к ранее неизвестной О139-серогруппе — синоним "Bengal", с учетом происхождения этого штамма. Мощный эпидемический потенциал возбудителя новой серогруппы вызвал в то время опасения, что V. cholerae О139 может стать возбудителем следующей 8-ой пандемии холеры. Появление нового варианта возбудителя холеры для обеспечения эпидемиологического благополучия населения потребовало создания новых средств диагностики.
Несмотря на постоянное совершенствование материально-технической базы лабораторной диагностики, бактериологические исследования продолжают занимать ведущее место в диагностике холеры.
Классический бактериологический анализ трудоёмок и длителен. Исследования проходят ряд этапов, каждый из которых заканчивается определенным результатом. Идентифицируют с целью определения их принадлежности к роду Vibrio, виду Vibrio cholerae соответствующей серогруппе (О1, О139 или других), а также с целью определения биовара и эпидемической значимости.
Несмотря на значимость бактериологического метода, его возможности имеют существенные ограничения, что связано не только с правилами забора материала и используемых ингредиентов, но и в существенной степени зависит от особенностей патогенеза заболевания, с локализацией возбудителя, изменениями его антигенной структуры в процессе персистенции.
Серологические методы исследования, как правило, имеют дополнительное значение, но при проведении оперативного и ретроспективного эпидемиологического анализа их результаты могут быть решающими, их используют для выявления специфических антител в сыворотке крови больного и нарастания их титра в динамике. В основном это варианты агглютинационных тестов, наиболее широко распространенным среди которых являются РА и РНГА. Однако эти методы не используют для ранней диагностики.
К современным методам относятся молекулярно-диагностические исследования. Использование ПЦР в качестве метода специфической индикации рекомендуется проводить крайне осторожно. Следует учитывать, что выявление специфических генов холерных вибрионов в объектах окружающей среды не означает наличия в указанной пробе жизнеспособных вибрионов. Специфическая ДНК может находиться либо в составе погибших клеток, либо в виде некультивируемых форм возбудителя, неспособных вызвать заболевания. Кроме того, нельзя исключить наличие фрагмента генома вибрионов в составе различных фагов. В этом случае использование положительного результата ПЦР, без подтверждения выделением культуры возбудителя может привести к некорректным результатам.
Холерные вибрионы могут существовать в двух различных экологических нишах – в организме человека и в воде открытых водоемов. Выделенные из поверхностных водоемов и других объектах окружающей среды, не содержащие гена холерного токсина холерные вибрионы не О1/О139 серогрупп могут вызвать единичные заболевания холерой (вибрионосительство) и вспышки. Одно из ключевых мест при оценке и прогнозировании эпидемической обстановки по холере в России занимают сведения о выделении холерных вибрионов из объектов окружающей среды.
В целях обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения и предупреждения завоза, распространения холеры на территории Омской области ежегодно проводятся исследования в рамках Госработ за циркуляцией холерных вибрионов из стационарных точек на базе лаборатории особо опасных и природно-очаговых инфекций ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Омской области».
Бактериологическое исследование на холеру проб из объектов окружающей среды на территории страны осуществляют с учетом типов территорий. Омская область относится к территориям III типа подтипа Б, где существует опасность возникновения вспышек и распространения данной инфекции.
Места отбора проб воды для бактериологического исследования на наличие холерных вибрионов и количество точек определяется для каждого поверхностного водоёма, которые согласовываются с Управлением Роспотребнадзора. Еженедельно, в июле-августе, проводится отбор проб воды из 20 точек сельских районов области и из 10 стационарных точек г. Омска. На каждую стационарную точку специалистами службы составляется паспорт.
В эпидсезоне 2014 года при проведении эпидмониторинга за период с июля по август включительно было выделены и подтверждены 44 культуры V. cholerae не О1/О139. Культуры выделялись из 19 стационарных точек 5 открытых водоёмов Омской области, из них: 11 - вода из водоёмов I категории, используемых в качестве источников для питьевого и хозяйственно-бытового водоснабжения в зонах санитарной охраны водозаборах, 2 - места сброса хозяйственно-бытовых сточных вод, очистные сооружения, 4 - местах организованного рекреационного водопользования (пляжи), 2 - озера.
Результаты мониторинга не исключают возможности формирования эндемического очага в связи с изменением климатических условий (увеличение температурного режима, увеличения длительности теплого периода), создающих благоприятные условия для развития холерных вибрионов.
Опубликовано в журнале «Роспотребнадзор в Омской области», № 4 за 2015 год
