Методические указания к лабораторным занятиям по дисциплине Биология индивидуального развития для студентов специальности 050607 – Биология (стр. 6 )

№7 Лабораторное занятие. Органогенезы у позвоночных животных

Препараты к занятию «Начало органогенеза птиц»

Препарат №1. Эмбрион курицы на стадии трех мозговых пузырей (30—33 ч инкубации): тотальный препарат

Задание. Рассмотрите тотальный препарат под бинокулярной 1упой или под малым увеличением микроскопа и зарисуйте его. Ча рисунке укажите уровень расположения передних кишечных 5орот, положение заднего невропора, структуры головного мозга i других формирующихся органов зародыша. Подсчитайте и запи­шете количество пар сомитов (рис. 61, А).На стадии трех мозговых пузырей передний невропор замыка­ется. Головная часть нервной трубки слабыми поперечными пере­тяжками подразделена три мозговых пузыря: первичный передний мозговой пузырь (prosencephalon), средний мозговой пузырь (mesencephalon), первичный задний мозговой пузырь (rhombence­phalon). При этом задний мозговой пузырь без видимых границ переходит в зачаток спинного мозга. Передний мозговой пузырь — самый большой, его боковые стенки являются зачатками нейраль-ных частей глаза (сетчатки, радужки и пигментного эпителия). Часто на этой стадии развития можно увидеть слабовыраженные дополнительные перетяжки в области первичного заднего мозго­вого пузыря — так называемые ромбомеры. Их всего восемь, при последующем развитии от ромбомеров отходят пятая—десятая пары черепных нервов. Задний невропор находится на уровне сформи­рованных сомитов.

Головная складка находится примерно на уровне среднего от­дела головного мозга, а передние кишечные ворота — каудальнее заднего мозгового пузыря или на уровне границы между голов­ным и спинным мозгом. Парные зачатки сердца на уровне пере­дних кишечных ворот объединяются, образуя общий сосуд (труб­ку), который изгибается в правую сторону.

На тотальных препаратах эмбриона курицы этой стадии разви­тия передние кишечные ворота визуально накладываются на фор­мирующуюся закладку сердца. Чтобы их увидеть на тотальном пре­парате, надо повернуть макровинт микроскопа и перейти в дру­гую оптическую плоскость (закладка сердца лежит вентральнее кишки зародыша).

Осевая мезодерма образует примерно 7—10 пар сомитов, при этом первая пара сомитов рассеивается.

На этом препарате, как и на тотальных препаратах стадии ней-руляции, хорошо заметен краниокаудальный градиент в развитии. Видимая морфологическая картина в задней части тела зародыша соответствует нейруляции, а на ранней стадии трех мозговых пу­зырей в самой каудальной части можно различить и структуру гензеновского узелка.

Препарат №2. Эмбрион курицы на стадии пяти мозговых пузырей (35—40 ч инкубации): тотальный препарат

Задание. Рассмотрите тотальный препарат под бинокулярной лупой и под малым увеличением микроскопа, зарисуйте его. На рисунке укажите уровень расположения передних кишечных во­рот, положение заднего невропора, структуры головного мозга и других формирующихся органов зародыша.

На стадии пяти мозговых пузырей передний пузырь (prosen-ephalon) преобразуется в два путем небольшого выпячивания воей передней стенки. Это передний мозг (telencephalon) — зача-ок больших полушарий. Основная масса клеток prosencephalon |бразует второй мозговой пузырь (diencephalon) — зачаток про-гежуточного мозга. Средний мозговой пузырь (mesencephalon) oc-ается без видимых изменений и является зачатком среднего моз-а. Задний мозговой пузырь (rhombencephalon) путем поперечной [еретяжки подразделяется на два: четвертый мозговой пузырь metencephalon) — зачаток мозжечка и варолиева моста и пятый юзговой пузырь (myelencephalon) — зачаток продолговатого мозга. 1а уровне среднего мозгового пузыря намечается первый изгиб ачатка мозга, направленный в сторону желтка. В области промежуточного мозга четко видны боковые выпя-:ивания — глазные пузыри. Они связаны с мозгом тонкими «глаз­ными стебельками». Глазные пузыри подрастают к покровной эк­тодерме.

В эктодерме над задним мозгом образовались два углубления — слуховые ямки, зачатки органа слуха.

Средняя часть сердечной трубки — зачатка сердца — выпячи­вается вправо и хорошо видна сбоку от головного мозга, это буду­щая желудочковая часть сердца. По краю area pellucida расположе­на хорошо сформированная сеть кровяных островков. Осевая ме­зодерма образует примерно 12—16 пар сомитов.

Головная часть туловищной складки находится на уровне зад­них отделов головного мозга, а передние кишечные ворота — на уровне границы головного и спинного мозга. Передние кишечные ворота на этой стадии развития находятся на уровне отхождения от закладки сердца желточных вен и накладываются на каудаль-ную стенку венозного синуса. Как и при зарисовке предыдущего препарата, чтобы их увидеть на тотальном препарате, надо повер­нуть макровинт микроскопа и перейти в другую оптическую плос­кость.

На этой стадии развития начинает формироваться головная складка амниона. На тотальном препарате она сначала видна как полумесяц спереди от тела зародыша, более темный, чем окружа­ющие его структуры зародышевого диска. В конце стадии пяти моз­говых пузырей, перед началом поворота, головная складка амниона покрывает всю область переднего мозга. Начинается формирова­ние задней и боковых частей туловищной складки.

Препарат №3. Эмбрион курицы на стадии поворота (48—56 ч инкубации): тотальный препарат

Задание. Рассмотрите тотальный препарат под бинокулярной лупой и зарисуйте его. Тотальный препарат эмбриона курицы этой стадии развития имеет толщину более 1 мм, поэтому, если для задания используется не бинокулярная лупа, а микроскоп, то сле­дует соблюдать особую осторожность и пользоваться только самым малым увеличением. На рисунке укажите правую и левую стороны зародыша, уровень расположения передних кишечных ворот, струк­туры головного мозга и других формирующихся органов.

Го­ловной мозг изогнут и видна выступающая вперед его часть — mesencephalon.

Поворот начинается в краниальной области и распространяет­ся в каудальном направлении. В конце вторых суток инкубации начинается образование первого мозгового изгиба в области сред­него мозга.

Препараты к заданию «Формирование внезародышевых оболочек у птицы»

Препарат №1. Эмбрион курицы на стадии поворота: поперечный срез зародыша на уровне сердца

Задание. Рассмотрите препарат под малым увеличением мик­роскопа и зарисуйте его. На рисунке укажите амнион, хорион, стенку желточного мешка, а также зародышевые листки, их со­ставляющие (эктодерму, энтодерму, париетальную и висцераль­ную латеральную мезодерму). Укажите амниотическую полость и полость экзоцелома. В области тела зародыша подпишите структу­ры, относящиеся к формирующимся внутренним органам, в со­ответствии со схемами, показанными на рис. 62, Б.

На данной стадии развития (около 55 ч) срез на уровне сердца проходит краниальнее уровня прохождения поворота. На препа­рате тело эмбриона полностью отделено от желтка, лежит на боку между пластом хориона и пластом стенки желточного мешка. Бо­ковые части стенки тела зародыша резко переходят в стенку ам­ниона, крупная закладка сердца оказывается лежащей вне тела в полости экзоцелома и его предсердие соединяется с зародышевой областью дорсальной брыжейкой. На некоторых препаратах срез проходит через U-образную сердечную трубку таким образом, что желудочек выглядит как лежащий отдельно в полости экзоцелома тонкостенный пузырь.

В стенке желточного мешка, в состав которой входит висце­ральная латеральная мезодерма, видны крупные кровеносные со­суды (ветви желточных вен и артерий). Стенка хориона более тон-Кая и состоит практически из двух слоев клеток: слоя эпителизи-Рованной эктодермы и париетальной мезодермы, состоящей из одного слоя вытянутых клеток.

Препарат №2. Эмбрион курицы на стадии поворота:поперечный срез зародыша на уровне смыкания амниотических складок

Задание. Рассмотрите препарат под малым увеличением мик­роскопа и зарисуйте его. На рисунке укажите амниотические склад­ки, стенку желточного мешка, а также зародышевые листки, их составляющие (эктодерму, энтодерму, париетальную и висцераль­ную латеральную мезодерму). Укажите полость экзоцелома. В обла­сти тела зародыша подпишите структуры, относящиеся к форми­рующимся внутренним органам, в соответствии со схемами на рис. 62, Г.

На данной стадии развития срез на уровне смыкания амнио­тических складок приходится на уровень прохождения поворота. На препарате дорсовентральная ось тела эмбриона наклонена по отношению к стенке желточного мешка (и плоскости зародыше­вого диска) под углом примерно 45°, кишка эмбриона не замкну­та. Соматоплевра образует две амниотические складки, которые сближаются, накрывая тело зародыша. В стенке желточного мешка лежат крупные сосуды. Самые большие из них, на границе заро­дышевой и внезародышевой области, — желточные вены. В заро­дышевой области вентральнее хорды лежит крупный непарный кровеносный сосуд — дорсальная аорта, которая, как и сердце, образовалась в результате слияния парной сосудистой закладки.

Препарат №3. Эмбрион курицы на стадии поворота: поперечный срез через туловищный отдел

Задание. Рассмотрите препарат под малым увеличением мик­роскопа и зарисуйте его. На рисунке укажите места образования боковых туловищных складок, соматоплевру и спланхноплевру, зародышевые листки, их составляющие (эктодерму, энтодерму, париетальную и висцеральную латеральную мезодерму), а также амниотические складки. Укажите полость целома. В области тела зародыша подпишите структуры, соответствующие формирующим­ся внутренним органам в соответствии со схемами, приведенны­ми на рис. 58 и 62, Д.

На данной стадии развития срез через туловищный отдел за­родыша проходит каудальнее уровня распространения поворота и дорсовентральная ось тела зародыша лежит перпендикулярно к плоскости зародышевого диска. Разделения на зародышевую и внезародышевую часть в этой области еще нет и кишка эмбриона не замкнута. В дорсальной части тела зародыша кроме нервной трубки можно различить несколько клеток — остаток нервного гребня. Хорошо видно разделение сомитов на дерматом, миотом и склеротом. Вентральнее хорды лежат два крупных сосуда — два ствола дорсальной аорты, которая в каудальной части эмбриона в возрасте 55 ч развития еще представлена парной закладкой. По бокам от стволов дорсальной аорты располагается область нефро-тома. В ней различимы структуры канальцев мезонефроса, а также проток мезонефроса (вольфов канал).