Тема 2

Тема 2.

1.  Для бактерий характерен гетеротрофный тип питания.

2.  Автотрофы и гетеротрофы

3.  Сапрофиты – гетеротрофы, источником питания у них являются мертвые органические вещества.

4.  Паразиты – гетеротрофы, живущие за счет живых тканей животных и растений.

5.  Фототрофы

6.  Хемотрофы ® хемолитотрофы и хемоорганотрофы

7.  АМК, пуриновые и пиримидиновые основания, липиды, витамины.

АМК ® клостридии (лейцин, тирозин) ® т. к ауксотрофы

Пур, Пир. ® стрептококки

Липиды ® стрептококки, микоплазмы (ауксотрофны по холестрину)

Витамины ® В1 – золотистый стафилококк, пневмококк; коринебактерии дифтерии – РР (НАД, НАДН).

8.  Аэробами и анаэробами

9.  М/о ассимилируют питательные вещества в виде небольших молекул, и им нужно предварительное расщепление экзоферментами.

а) пассивная диффузия ® Н2О, О2, СО2, N2

б) облегченная диффузия à с помощью мембранных белков-транслоказ.

в) активный транспорт à с помощью белков-пармеаз (каждая пармеаза переносит только одно соединение); при участии мембранных белков-транслоказ и фосфорилировании переносимой мембраны (глюкоза).

10.  Конститутивные ферменты всегда синтезируются в клетке в определен. концентрациях (гликолиз).

11.  Индуктивные (индуцибельные) ферменты, концентрация которых возрастает в зависимости от субстрата (b-лактомаза, b-галактосидаза)

12.  Для выделения микрофлоры из исследуемого материала, выращивания или культивирования.

13.  а) достаточное содержание питательных веществ; б) оптимальная для данного м/о реакция среды; в) абсолютная стерильность; г) изотоничность.

14.  а) простые (МПА, МПБ); б) сложные (шоколадный агар, среда Эндо etc); в) минимальные (только первичные предшественники веществ).

15.  а) жидкие; б) полужидкие (0,3-0,5%); в) плотные (1,5-3%) à от количества агар-агара

16.  МПА: мясной бульон (из свежего мяса) и 2-3% агар-агара

18.  среда Леффлера (75% сыворотки и 25% сахарного бульона) и среда Китта-Тароцци

19.  среда Эндо, Левина, Гисса

20.  Элективные – содержат вещества только для одного вида, остальные «гибнут»: среды Мюллера, Раппопорта.

21-22. Среда Эндо. лактоза, фуксин и 3% агар. Для м/о кишечной группы

23-24. Среда Левина. 0,5% метиленового синего, 2% эозина, лактоза, агар. Кишечно-тифозная группа.

25-26. Среды Гисса. полужидкий «пестрый» ряд с различными сахарами. М/о диагностика.

27. Игла, петля, шпатель, пастеровской пипеткой.

28. Чистая культура – та культура, которая содержит только один вид, штамм.

29. Прокаливание, кипячение, стерилизация сухим жаром в печи Пастера, стерилизация паром/паром под давлением.

32. Всю стеклянную посуду, вату, марлю, пипетки.

33. Дробная стерилизация – для материалов не переносящих t>100C (молоко, желатин). Три последовательные стерилизации при 100 С. Аппарат Коха.

36.  Тиндализация – дробная стерилизация для объектов не переносящих 100 С. 5-6 дней по 1 часу при 56-58С (первый день 2 часа). Водяная баня или специальные пробирки с терморегуляторами.

37-38.  Пастеризация – прогревание жидкости до 50-60С 15-30 минут или 70-80С 5-10 минут гибнут бесспоровые патогенные микробы, но остаются споры. Необходимо хранение на холоде.

39-40.  Фильтры используются тогда, когда материал не может быть подвергнут нагреванию (сыворотка, лекарства). Фильтры в виде инфузорной земли, асбеста (Зейца), фарфора, каолина. В виде цилиндрических свечей – фильтр Шамберлена.

41. Стерилизация текучим паром 3 дня подряд по 1 часу.

47. Метод разведения Дригальского, Пастера. посев на сетку Коха.

50, 54. По Цейсслеру à выращивание на КА и последующий пересев на среду Китта-Тароцци; По Вейнбергу – запаяной пастеровской пипеткой в трубки Виньяля с неостывшим МПА, с последующим их остыванием à высасывание колонии и пересев на среду Китта-Тароцци.

51. Изолированная колония – колония, которая разрослась из одной бактерии.

52. Факультативные и облигатные.

53.посев уколом в агар; добавление редуцирующих веществ (Китт-Тароцци) и заливка маслом; удаление или замена О2; способ Виньяла-Виньона, Вейнберга; поглощение О2 раствором пирогаллола в особых приборах; способ Фертшнера (совместный рост анаэробов с поглощением О2 аэробами)

Тема 3. «Антибиотики».

1.  Симбиоз (факультативный и облигатный): комменсализм (нахлебничество&квартиранство), мутуализм (взаимовыгодные отношения) и паразитизм (факультативный и облигатный). Синтрофия – виды могут жить только вместе. Нейтрализм. Конкуренция (активная и пассивная). Хищничество (вибрионы рода Bdellovibrio).

2.  Мутуализм и синтрофия.

3.  Микробный антагонизм – (конкуренция) – микробы-антагонисты выделяют в среду метаболиты токсичные для конкурента.

4.  Конкуренция.

5.  в 1891 году доказал возможность воздействия лекарственного средства на возбудителя (хинин на малярийный плазмодий).

6.  1940 год. А. Флеминг.

7.  Актиномицеты, пенициллины, бактериальные, животного происхождения (грамицидин), растительного (фитонциды), синтетические.

8.

Антибиотики	Мишени
- пенициллины, цефалоспорины, циклосерин	- ингибирование синтеза клеточной стенки
- полиеновые, полимиксины	- нарушение функций цитоплазматич. мембраны
- аминогликозиды, тетрациклины, макролиды	- ингибирование синтеза белка на рибосоме
- рифамицины	- ингибирование ДНК-зависимой РНК-полимеразы

9.  Стрептомицин, тетрациклин, актиномицин, левомицитин

10.  Метод бумажных дисков. Метод серийных разведений.

11.  Те, которые действуют почти на все: фторхиналоны, цефалоспорины.

12.  Грибы рода Penicillum, Cephalosporium etc.

13.  Пенициллины, цефалоспорины и циклосерин.

14.  Пенициллин нарушает синтез клеточной стенки путем блокирования реакции транспептидирования синтеза муреина.

15.  Лечение животных и человека, профилактика, выделение чистой культуры, генная инженерия, консервирование продуктов.

17.  ЕД (единица действия) или мкг – кол-во вещества, содержащееся в 1 мл раствора.

18-19.  Антибиотики, нарушающие синтез ЦМ (нистатин, леворин)

20. Пенициллин, цефалоспорин, циклосерин.

21.  Токсические реакции, дисбактериоз, аллергия, феномен Геру-Геймара

23. Симбиоз – партнеры участвуют в урегулировании своих отношений с внешней средой.

24. получение высокопродуцированных штаммов – проверка – отделение культивируемой жидкости, очистка и концентрация – изучение химической природы – синтез.

25. < 2,5 см.

26. Наличие роста вокруг диска (0,7мм)

Тема 4. Бактериофаги.

1.  Вирусы.

2.  Головка (содержит ДНК/РНК) и отростка. 20-200 нм.

3.  Нуклеиновая кислота и белок.

4.  В – лактамаза

5.  Умеренные фаги (есть фермент рестриктаза) – встраиваются в хромосому

6.  Монофаги (видовые), типовые (штамм, тип), поливалентные

7.  Вирулентные, умеренные, покоящиеся

8.  Адсорбция – проникновение (путем инъекции ДНК через канал отростка) – репликация ДНК – самосборка и выход из клетки.

11. Классическая и лизогения

12. Трансдукция

13. лечение, профилактика, выделение чистой культуры, консервирование, генная инженерия (дефектные фаги).

14. Профаг – фаговая ДНК, ассоциированная с геномом хозяина.

15. Изменение t, рН, снижение иммунитета, наличие некоторых АМК на поверхности.

Тема 5. Генетика м/о.

1.  ДНК в виде кольцевой «хромосомы», которая образует нуклеоид + плазмиды + транспозоны и IS-последовательности. Или двойная или одноцепочечная молекула ДНК/РНК.

2.  Трансформации – изменение свойств путем проникновения чужого генетического материала. Тут нужны клетки, воспринимающие донорскую ДНК, - компетентные. Трансдукции – передача генетического материала от одних бактерий к другим с помощью фагов. а) неспецифическая – какой-нибудь случайный компонент, фаг – дефектный. б) специфическая – строго определенные гены может переносить. в) абортивная – перенесенный фагом фрагмент не встраивается, а располагается в цитоплазме и может функционировать. Лизогенная конверсия – изменение свойств лизогенной бактерии в приобретении способности продуцировать токсин, изменять морфологию. Связано с внесением информации. Коньюгация – перенос генов при скрещивании бактерий. Нужно наличие F+ и F - плазмид. Мутации. Модификации.

4.

5.

6.

7.  ПЦР – группа молекулярно-генетических методов, которые обеспечивают амплификацию in vitro нуклеиновых кислот, с использованием базового принципа достройки олигонуклеотидной затравки и термостойкой ДНК-полимеразы. Все это обеспечивает возможность денатурации полученной ДНК без существенного изменения активности.

Универсальность, чувствительность, специфичность, быстрота.

Смесь: праймер правый и левый, буфер, dntp, матрица, вода. вазелин

Нормофлора человека

1.  Облигатная, транзиторная, факультативная, персистирующие патогенные м/о.

2.  Особенно много в «бессолнечных» местах и в сально-фоликульных устьях: Staphilococcus epidermidis & sarcophiticus, Candida.

3.  Основная масса 99% зеленящий стафилококк + нейсерии и стафилококки.

4.  Дрожжи, грибы, сарцины, лактобактерии (30 видов), но нет гнилостных

5.  Лактобактерии, бифдумбактерии и E. colli. Их размножению препятствует наличие желчи и IgA

6.  а) строгие анаэробы: G+: семейство Bifidobacterium 85%; G-: семейство Bacteriodacea. всего 96-99%.

б) факультативные анаэробы: G+: E. colli; G-: Enterococcus всего 1-4% + Lactobacillus

в) остаточная микрофлора (стафилококки, пептококи, пептосрепы, грибы Candida) 0,01-0,001%

7.  М\о практически нет за исключением некоторого кол-ва стафилококков, дифтероидов.

8.   

9.  Менее обильна, но очень разнообразна: стафилококки, стрептококки и т. д. Во влагалище – молочнокислые палочки Додерлейна. Полость матки, пузырь, трубы – нет м/о.

10.  а) факторы естественной резистентности организма

б) стимулирует лимфопоэз

в) процессы пищеварения

г) обеспечение витаминами группы В, К, РР.

Дисбактериоз.

1)  отягощение течения заболевания

2)  заселение патогенными м/о

3)  нарушение пищеварение

4)  сдвиг рН в щелочную сторону

5)  нарушение всасывания

6)  снижение уровня дезинтоксикации

7)  подавление регенерации слизистой

8)  торможение перистальтики

9)  гиповитаминозы

Тема 1.

4.  а) бактериологический (чистые культуры); б) микроскопический; в) аллергический; г) иммунологический; д) биологический; е) молекулярно-генетический

10.Раздавленная капля. Висячая капля

11.  а) приготовление мазка; б) высушивание; в) фиксация; г) микроскопия

15.  Кокки, палочки, извитые

16.  сарцины, тетракокки, стафилококки, стрептококки, диплококки

17.  Streptococcus pyogenes

18.  Стрептобактерии, коринебактерии, фузобактерии, диплобактерии, бактерии

19.  спириллы, актиномицеты, боррелии, лентоспиры, вибрионы

24.  по Граму, Цилю-Нильсену, Бурри

25.  Окраска по Граму: генцианвиолет – люголь – спирт – вода – фуксин.

26.  темно-фиолетовый

27.  красный

28.  генцианвиолет образует в протоплазме соединение, удерживаемое после обесцвечивания спиртом

29.  Окраска по Цилю-Нильсену: карболовый фуксин Циля – подогрев до пара 2-3 раза – промывка водой – обесцвечивание 5%раствором серной кислоты – промывка водой – докрашивание метиленовой синей.

30-31.  Кислотоустойчивые бактерии (рубиново-красные)

32. Связана с наличием миколевой кислоты и большим количеством липидов.

34-36. Окраска зерен волютина по Нейсснеру: для обнаружения дифтерийной палочки (зерна Бабеша-Эрнста). Уксускосиняя 1мин – вода – Люголь 20-30 сек – везувин 10-15сек – вода, сушка. Волютин окрашивается в темно-синий, черный.

37.  Способ Ожешки: густой мазок – 0,5% раствор HCL (протрава), подогрев 2 мин – карболовый фуксин Циля – обесцвечивание 5% раствором серной кислоты – метиленовый синий 5 мин. Споры – ярко-красные.

38.  Способ Гинса – из палочки Фридлендера приготовляют препарат (по Бурри) – фиксация на пламени – фуксин 1:3. Бактерии красные, капсулы неокрашенные. Капсулы черные.