Фармакокоррекция иммунотоксических эффектов аверсекта-2 при обработке животных в экспериментальных и производственных условиях (стр. 3 )

У крыс,  однократно  интоксицированных  препаратом  в дозах 20 и 40 мг/кг, регистрируются следующие структурные изменения. В тимусе отмечается  уменьшение в объеме долек, при этом границы корковой и мозговой зон не нарушены. При патоморфологическом исследовании селезенки у  крыс с дозой 20 мг/кг регистрировали снижение количества лимфатических фолликулов. Они не имели четкой границы маргинальной зоны, выраженных герминативных центров. Количество периартериальных лимфоидных муфт  у этих животных было уменьшено по сравнению с контролем. Другие же крысы этой группы, напротив, имели большее, чем в контрольной группе количество лимфатических фоликулов с четким зональным делением и выраженными маргинальными зонами и герминативными центрами. Количество периартериальных лимфоидных муфт в этом случае было приблизительно одинаково в опыте и контроле. У некоторых крыс, интоксицированных Аверсектом-2 в дозе 40 мг/кг, через 40 суток после введения препарата выявляли признаки редуцирования белой пульпы, в частности за счет отсутствия В-зависимых структур (лимфатических фолликулов)  и преобладания площади красной пульпы.  Вместе с тем у большинства животных регистрировали  увеличение числа лимфатических фолликулов с герминативными центрами, при этом была хорошо выражена маргинальная зона. Брыжеечные лимфатические узлы при вскрытии у опытных крыс не имели отличий от таковых в группе контроля. Микроскопические изменения у всех опытных крыс носили однонаправленный характер и заключались в сужении границы коркового вещества с уменьшением в нем общего числа и размеров лимфатических фолликулов. Паракортикальная зона не имела четких границ. Границы мозгового вещества были расширены, мозговые лимфатические  синусы увеличены в объеме, плотно заполнены клеточными элементами. Печень опытных крыс не увеличена в размерах, темно-коричневого цвета и плотной консистенции. При гистоисследовании у крыс с дозами затравки 20 и 40 мг/кг  были установлены признаки развития токсической жировой дистрофии. После интоксикации Аверсектом-2 в дозе 40 мг/кг отмечали разрастание соединительной ткани в паренхиме печени и наличие часто встречающихся лейкоцитарных инфильтратов.

Иммунная реактивность крыс при моделировании условий противопаразитарной обработки крупного рогатого скота Аверсектом-2

У крыс опытной группы через 1 и 4 суток снижалось процентное и абсолютное содержание сегментоядерных нейтрофилов вплоть до развития острой нейтропении (табл.1), что свидетельствует об угнетении гранулоцитарного ростка кроветворения.

Таблица 1- Абсолютное содержание лейкоцитов в крови  крыс при однократном введении Аверсекта-2 в дозе 0,2 мг/кг, Ч109/л  (M±m), n=5

Группы	Общее колич-во лейко-в	Эозино-филы	Нейтрофилы	Лимфо-циты	Моно-циты	Клетки Боткина - Гумпрехта
П	С
Через 24 часа после введения Аверсекта-2
Контроль	13,98±0,66	0,99±0,10	0,09±0,04	3,36±0,25	9,18±0,32	0,05±0,03	0,32±0,07
Опыт	10,53±0,80*	0,40±0,08 **	0,04±0,02	1,56±0,21 **	7,99±0,70	0,06±0,03	0,49±0,06
Через 4 суток после введения Аверсекта-2
Контроль	12,94±0,57	0,41±0,04	0,07±0,03	3,18±0,13	8,98±0,56	0,00±0,00	0,30±0,13
Опыт	7,84±0,61 **	0,18±0,07 *	0,02±0,02	1,44±0,9 **	5,92±0,51 **	0,03±0,03	0,26±0,08
Через 8 суток после введения Аверсекта-2
Контроль	5,46±0,36	0,13±0,02	0,07±0,02	2,65±0,37	5,46±0,36	0,00±0,00	0,26±0,05
Опыт	4,93±0,91	0,10±0,04	0,04±0,02	3,18±0,51	4,93±0,91	0,00±0,00	0,36±0,02

Примечание: достоверность различий относительно контроля: * -  (р≤0,05)  ** -  (р≤0,01).

О выраженном гематотоксическом действии Аверсекта-2 говорит  достоверное увеличение процентного содержания клеток Боткина-Гумпрехта через 1 сутки после введения препарата (4,80±0,73 против 2,20±0,27%, р≤0,05)  и снижение доли эозинофилов (3,8±0,73 против 7,00±0,44, р≤0,05).  Качественные изменения клеток лейкоцитарного ростка отмечали через  4 и 8 суток после первого введения препарата. В этот период преобладали клетки с рыхлым, петлистым, кружевным характером  хроматина ядра, что свидетельствует о незрелости выбрасываемых костным мозгом клеток.

Таблица 2-Абсолютное содержание лейкоцитов в  крови крыс при повторном введении Аверсекта-2 в дозе 0,2 мг/кг, Ч109/л  (M±m), n=5

Группы	Общее колич-во лейко-цитов	Эозино-филы	Нейтрофилы	Лимфо- циты	Моно- циты	Клетки Боткина - Гумпрехта
П	С
Через 8 суток  после введения Аверсекта-2
Конт-роль	6,69±0,38	0,06±0,02	0,10±0,03	2,07±0,18	4,34±0,62	0,00±0,00	0,11±0,07
Опыт	9,17±0,33 **	0,07±0,04	0,09±0,00	3,90±0,52 **	4,81±0,70	0,00±0,00	0,30±0,07
Через 14 суток после введения Аверсекта-2
Конт-роль	9,35±0,36	0,06±0,02	0,08±0,02	2,23±0,14	6,88±0,30	0,00±0,00	0,11±0,03
Опыт	11,09±0,35*	0,09±0,02	0,20±0,07	2,09±0,28	8,02±0,33 *	0,00±0,00	0,53±0,03 **
Через 21 сутки после введения Аверсекта-2
Конт-роль	8,00±0,34	0,23±0,06	0,11±0,04	1,89±0,07	5,56±0,33	0,02±0,02	0,21±0,09
Опыт	5,86±0,80 *	0,03±0,02 **	0,12±0,04	2,45±0,35*	3,06±0,49 **	0,00±0,00	0,19±0,04

Примечание: достоверность различий относительно контроля: * -  (р≤0,05)  ** -  (р≤0,01).

При исследовании мазков крови отмечали  появление лимфоцитов с токсигенной зернистостью, вакуолизацией ядра и цитоплазмы. Через 21 сутки после повторной обработки развивается выраженная лейкоцитопения.

Клеточные и гуморальные иммунные реакции у крыс  при использовании Аверсекта-2

Клеточное звено иммунного ответа при введении крысам Аверсекта-2 определяли по реакции ГЗТ. Животных сенсибилизировали в область предплюсны тазовых конечностей Аверсектом-2 в дозе 2 мг/кг. Через 7 суток проводили разрешающее введение препарата в той же дозе в объеме 0,05 мл в область предплюсны левой тазовой конечности, а в правую – 0,05 мл 0,9%-ного раствора NaCl. Учет реакции проводили через 24 часа после введения разрешающей дозы.

У всех животных опытной группы после повторного введения в область предплюсны Аверсекта-2 регистрировали признаки развития воспалительной реакции: красноту, припухлость и повышение местной температуры.  Вследствие отека стопа увеличилась в объеме на 31% и  составила 1,15±0,06 см3 против 0,88±0,04  см3  (Р≤0,01) в контроле.

Оценку влияния однократного введения Аверсекта-2 в терапевтической дозе (0,2 мг/кг) на гуморальный иммунный ответ  проводили по количеству АОК на 4 и 8 сутки после проведения противопаразитарной обработки. В результате было отмечено достоверное увеличение числа  АОК в селезенке крыс через 96 и 192 часа после его введения по сравнению с интактными крысами (рис.3).

Рисунок 3 - Влияние Аверсекта-2 на процесс спонтанного образования АОК в селезенке крыс (М±m), n=5. В скобках указано время, по истечении которого проводили учет реакции; достоверные различия по сравнению с  контрольной группой:  ** - (р≤0,01).

Рисунок 4 - Антителообразование в селезенке крыс, обработанных Аверсектом-2 и иммунизированных ЭБ (М±m), n=5. В скобках указано время ожидания в часах от введения препарата до иммунизации ЭБ и затем от введения ЭБ до учета реакции; достоверные различия по сравнению с  контрольной группой:  ** - (р≤0,01).

Поскольку в естественных условиях любому организму постоянно приходится сталкиваться с воздействием не одного, а многих антигенов, совместное действие которых может усиливать или ослаблять иммунный ответ, то вторая серия опытов заключалась в воспроизведении таких условий за счет внутрибрюшинной иммунизации ЭБ одновременно с обработкой Аверсектом-2, а также через 96 часов после введения препарата.

В результате исследований установлено угнетающее действие Аверсекта-2 на образование АОК в селезенке крыс, подвергнутых иммунизации ЭБ. Так, введение крысам 0,2 мг/кг Аверсекта-2 практически одновременно с иммунизацией ЭБ (рис.4) тормозит антителообразование на 30%, а при введении ЭБ через  96 часов после обработки Аверсектом-2 – на 12,5%.