ОБЩИЙ БИЛИРУБИН
Колориметрический метод
______________________________________________
Кат № :
BR 2361 | 2 х 250 мл | 1.Сульфонильная кислотта/DMSO 2. Нитрит Натрия | 2 х 250 мл 1 х 15 мл |
ПРИНЦИП МЕТОДА
Обшее содержание билирубина определяют реакцией с диазотированной сульфанильной кислотой в присутствии катализатора (диметилсульфоксида - DMSO).
ТЕСТИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
hydrochloric
Свежая негемолизированная сыворотка, гепаринизированная (или с ЭДТА) плазма. Свежие пробы хранят в защищенном от света месте.
РЕАГЕНТЫ
Состав | Концентрация р-ров |
1. Сульфонильная кислота Соляная кислота Диметилсульфоксид 2. Нитрит натрия | 29,0 ммоль/л 164 ммоль/л 5,6 моль/л 0,35 моль/л |
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РЕАГЕНТА
Смешать 7,5 мл Реагента 1 и 1 каплю Реагента 2 (или 15 мл R 1 и 100 мкл R2). Стабилен в течение 5 ч при +15 - +25оС и 24 ч при +2 - + 8оС в защищенном от света месте.
ПРОЦЕДУРА ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Длина волны Температура реакции Кювета Измерение | 546 нм 20 - 25оС световой путь 1см Против Бланк-Реагента |
Общий билирубин
Внести в пробирку: | ||
Реагент-Бланк (мл) | Проба/ Стандарт(мл) | |
Диазо-Реагент Проба/Стандарт | 1.000 - | 1.000 0.040 |
Смешать, дать постоять 5 мин при 20 - 25оС, затем измерить абсорбцию Пробы/Стандарта относительно Бланка-Реагента (А).
ВЫЧИСЛЕНИЯ
Концентрации Общего Билирубина в Пробе =
А пробы
= --------------- х Концентрация Стандарта
А стандарта
НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ в сыворотке
Общий Билирубин: до 1 мг/дл (17 мкмоль/л)
ЛИНЕЙНОСТЬ
Линейность измерения сохраняется вплоть до 340 мкмоль/л (20 мг/дл).
ПРИМЕЧАНИЯ
При определении билирубина у новорожденных обьем проб уменьшают до 20 мкл.
ПОМЕХИ
В качестве Пробы-Бланка используют свободный от липидов образец. Реагент 1 используют как Бланк-Реагент. Перед расчетом концентрации билирубина абсорбцию Пробы-Бланка вычитают из абсорбции Проб.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для контроля качества и воспроизводимости рекомендуют использовать предлагаемые фирмой RANDOX сыворотки с нормальным, пониженным и повышенным содержанием билирубина, а также с высоким содержанием билирубина контроль Кат.№ BE 454.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Предназначен только для диагностических целей. Не пипетировать ртом. Придерживаться обычных мер предосторожности принятых в лабораторной практике.
RANDOX
____________________________________________
