Лакмусовое молоко
Lithmus Milk Лакмусовое молоко | M609 |
Эту среду используют для хранения лактобактерий и определения действия бактерий на молоко.
Состав**: |
Ингредиенты | грамм/литр |
Молоко обезжиренное, порошок Лакмус Натрия сульфит Конечное значение рН (при 25єС) 6,8 ± 0,2 | 100,00 0,50 0,50 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление: |
Суспензировать 101,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды при постоянном перемешивании. Разлить по 10 мл в пробирки размером 15 х 150 мм. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121єС) в течение 5 мин. НЕ ДОПУСКАТЬ ПЕРЕГРЕВАНИЯ СРЕДЫ.
Принцип и оценка результата: |
Эта среда наиболее полезна для контроля в молочной промышленности, т. к. она служит достоверным индикатором действия бактерий на молоко (1). Лакмус является хорошим кислотно-щелочным индикатором, который подходит для молочных сред по своему окислительно-восстановительному потенциалу, а также низкой токсичности для микробов, по сравнению, например, с бромкрезоловым пурпурным (2). Для получения полноценного роста некоторых микроорганизмов к основной среде можно добавить глюкозу (до 1% вес/об) и/или дрожжевой экстракт (до 5% вес/об)(1, 2, 3).
Для определения в воде Clostridium perfringens, пробы разного объема засевают в свежепрогретые пробирки с Лакмусовым молоком и вновь прогревают их при 80єС в течение 10-15 мин для уничтожения неспоровых микроорганизмов. Результат учитывают в течение 5 суток инкубирования при 35єС, через каждые 24 часа отмечая положительную реакцию по появлению губчатого сгустка (4). Анаэробные условия в среде можно получить, добавив в нее небольшое количество прогретых железных опилок или 0,1 г восстановленного железа (5). Обезжиренное молоко служит субстратом, который бактерии могут разлагать различными путями. Действие бактерий на молоко в общем можно выразить следующим образом.
РЕАКЦИЯ | ПРИЧИНА |
Закисление | |
1.Розовый или красный цвет молока | Ферментация лактозы и/или глюкозы в молоке |
2.Кислотная коагуляция | Образование молочной кислоты, ведущее к створаживанию казеина и появлению прозрачной водянистой жидкости |
3.Губчатый сгусток | Образование газа в сгустке казеина |
Щелочение | |
1.Синий цвет молока | Протеолиз с образованием основных аминов или аммиака |
2.Щелочная коагуляция с нежным синим сгустком | Превращение казеина в параказеин под действием фермента ренина. |
3.Пептонизация | Переваривание казеина, что сопровождается просветлением среды и растворением сгустка |
Восстановление | |
Обесцвечивание среды (вид, как у свежеавтоклавированной среды) | Реакция лакмуса в глубине пробирки: под действием микробных редуктаз снижается количество растворенного кислорода и повышается количество бесцветной (восстановленной) формы лакмуса |
Получаемые реакции могут быть неспецифичными, поэтому требуется проведение дополнительных тестов.
Контроль качества: |
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-лиловый порошок, который может иметь небольшие окрашенные частицы.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-лиловую окраску, непрозрачна, как молоко.
Кислотность среды:
При 25єС водный раствор (10,1% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов в течение 14 дней при 35єС.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) Lactobacillus acidophilus (13124) Clostridium perfringens (3524) Pseudomonas aeruginosa (27853) | Рост Хороший или обильный Хороший или обильный Хороший или обильный | Реакция Кислый сгусток (розовый) Губчатый сгусток (газ) Пептонизация (просветление) |
Ссылки: |
Условия и сроки хранения: |
Порошок хранить при температуре ниже +25єС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8єС.
