На правах рукописи
Тяпугин Егор Евгеньевич
Оценка и отбор яичных кур
по показателям эмбрионального развития
06.02.07 – Разведение, селекция и генетика
сельскохозяйственных животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Дубровицы – 2013
Диссертационная работа выполнена в селекционном центре Государственного научного учреждения Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИТИП Россельхозакадемии).
Научный руководитель: | академик Россельхозакадемии, доктор сельскохозяйственных наук, профессор,
|
Официальные оппоненты: |
доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник отдела генетики и разведения с.-х. птиц ГНУ ВНИИГРЖ Россельхозакадемии; |
Иолчиев Байлар Садраддин оглы доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории репродуктивной криобиологии животных центра биотехнологии ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии | |
Ведущая организация | ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. » |
Защита состоится « 26 » марта 2013 г. в 10 часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 006.013.02 при Государственном научном учреждении Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства
Российской академии сельскохозяйственных наук.
Адрес института: Московская область, Подольский район, п. Дубровицы, ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии, тел./, www. *****.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии.
Автореферат разослан « 22 » февраля 2013 г. и размещен на сайте Министерства образования и науки Российской Федерации.
И. о. ученого секретаря совета Д 006.013.02
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Племенные птицеводческие заводы ведут селекционную работу, направленную на повышение продуктивности существующих и созданию новых линий и кроссов кур, и обеспечивают промышленные предприятия высококачественной племенной продукцией.
Повышение уровня продуктивности побуждает ученых и селекционеров к поиску и разработке новых методических подходов и признаков селекции. При этом оценка и отбор кур смещается на более ранние сроки, такие как начало эмбрионального развития и первые месяцы жизни.
Интерес к использованию эмбрионального развития как признака в селекции связан с тем, что в этот период происходит становление метаболических процессов, развитие органов и тканей эмбриона, которые определяют качество суточного цыпленка и дальнейший уровень продуктивности птицы. Развитие куриного эмбриона проходит вне тела матери, это позволяет проводить прижизненную оценку и отбор особей на ранних стадиях.
Развивающиеся эмбрионы кур (РЭК) широко используются в биологической промышленности для производства вирусных вакцин, применяемых для защиты животных и человека. Плодные оболочки и ткани эмбриона служат субстратом для изготовления биологически активных кормовых добавок, пробиотиков и косметических средств.
В связи с вышеизложенным была определена тема исследований.
Целью исследований являлась разработка нового признака оценки и отбора яичных кур по раннему эмбриональному развитию и его использование в селекционном процессе. В этой связи решались следующие задачи:
· определить время и параметры оценки и отбора особей, выделить группы с интенсивным, средним и медленным уровнем эмбрионального развития на ранних стадиях;
· оценить влияние интенсивности раннего эмбрионального развития на накопление экстраэмбриональной жидкости, используемой при производстве вирусных вакцин;
· установить корреляционные связи интенсивности эмбрионального развития с показателями продуктивности, воспроизводительными качествами и сохранностью поголовья кур;
· изучить наследуемость и повторяемость нового признака в поколениях;
· определить экономическую эффективность использования признака интенсивности эмбрионального развития в селекции.
Научная новизна работы. Впервые разработан способ прижизненной оценки интенсивности эмбрионального развития яичных кур без нарушения целостности скорлупы по разнице диаметров сосудистого поля и бластодиска.
Установлена зависимость накопления экстраэмбриональной жидкости от интенсивности раннего эмбрионального развития. Новизна исследований защищена патентом № 2 зарегистрированном в Государственном реестре изобретений РФ от 10 октября 2012 года.
Практическая значимость. Разработанный способ оценки интенсивности раннего эмбрионального развития при отборе эмбрионов для нужд биологической промышленности позволяет увеличить объем экстраэмбриональной жидкости используемой для производства вирусных вакцин. Применение предлагаемого признака оценки и отбора кур по интенсивности раннего эмбрионального развития в селекционно-племенной работе с яичными курами дает возможность выделить особей с более высокими показателями продуктивности, воспроизводительными качествами и сохранностью поголовья.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на 52-й и 53-й конференциях молодых ученых и аспирантов по птицеводству (Сергиев Посад, гг.), XVII Международной конференции ВНАП «Инновационные разработки и их освоение в промышленном птицеводстве» (Сергиев Посад, 2012 г.).
Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 7 научных статей, в том числе 2 публикации в изданиях, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки РФ.
Положения, выносимые на защиту:
· варьирование признака интенсивности раннего эмбрионального развития позволяет выделить группы с интенсивным, средним и медленным уровнем;
· интенсивность эмбрионального развития влияет на накопление экстраэмбриональной жидкости, используемой при производстве вирусных вакцин;
· использование нового разработанного признака оценки и отбора кур по разнице диаметров сосудистого поля и бластодиска биологически обосновано и экономически целесообразно.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 112 страницах машинописного текста, включает 30 таблиц, 9 рисунков, 2 приложения. Состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, предложений производству, списка литературы, включающего 180 источников, в том числе 58 на английском языке.
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Работа выполнена в селекционном центре ГНУ ВНИТИП Россельхозакадемии, экспериментальная часть проведена в (рис. 1).
 |
 |
 |
 |
 | |
|
Материалом для проведения исследований служили куры породы белый леггорн материнской линии СП 9, материнской родительской формы отечественного кросса СП 789. Технологические параметры содержания, кормления, режим инкубации соответствовали рекомендациям ВНИТИП.
Первое исследование
Первый опыт. Определение параметров и оптимального времени оценки эмбрионального развития кур.
Для выполнения работы от кур было отобрано 100 племенных яиц со средней массой характерной для линии СП 9, правильной формы, без дефектов скорлупы.
Интенсивность эмбрионального развития, после закладки яиц в инкубатор, определяли путем просвечивания через овоскоп, начиная с 15 до 72 часов с интервалом в один час. В процессе каждого просмотра фиксировали стадии развития эмбрионов и их размеры путем измерения диаметров куриного зародыша штангенциркулем. Выборочно проводили контрольное вскрытие яиц для подтверждения результатов овоскопирования.
На основании ранжирования полученных данных эмбрионы были распределены на три группы в зависимости от интенсивности их развития: 1 – интенсивные, 2 – средние, 3 – медленные.
Второй опыт. Определение влияния интенсивности раннего эмбрионального развития, на накопление биологического субстрата используемого для производства вирусных вакцин.
С этой целью в инкубатор было заложено 200 яиц, оценку интенсивности развития эмбрионов определяли по показателям, установленным в первом опыте. Повторный опыт был проведен с включением контрольной группы (50 яиц), оценка интенсивности эмбрионального развития в которой не проводилась.
|
Сбор экстраэмбриональной жидкости осуществляли на 11 сутки отдельно по группам эмбрионального развития. Инфекционную активность ВНБ (lg ЭИД50/см3) в экстраэмбриональной жидкости РЭК определяли по 50%-ному инфекционному действию титрованием по общепринятой методике [Деп. вет. МСХ РФ, 1997 г.].
Учитываемые показатели по первому исследованию: средняя масса яйца (г); индекс формы яйца (%); видимость бластодиска и его диаметр (мм); диаметр сосудистого поля желточного мешка (мм); объем экстраэмбриональной жидкости (мл); определение титра вируса (lg ЭИД50/см3).
Второе исследование
Задачей второго исследования являлась оценка связи интенсивности эмбрионального развития с воспроизводительными качествами и продуктивностью кур. Для его проведения было отобрано 90 кур по экстерьерным признакам и показателям продуктивности, характерным для линии СП 9. Для воспроизводства первого поколения было укомплектовано 10 селекционных гнезд при соотношении петухов и кур ♂1:♀9. В период инкубации потомки были разделены на группы по уровню эмбрионального развития.
Выведенный молодняк был поставлен на выращивание с учетом групп эмбрионального развития. По достижению 16-недельного возраста курочек оценивали по экстерьеру, присваивали ножные номера и сажали в индивидуальные клетки на контрольное испытание по продуктивности до 45-недельного возраста. Десять гнезд были разделены на три группы: с интенсивным – 3, средним – 4 и медленным – 3. При отборе кур использовали метод семейной селекции с элементами фенотипической оценки.
В течение 35 дней воспроизводили потомство, выведенные цыплята были закольцованы крыловыми номерами, отражающими происхождение по матерям. Методы и приемы работы с курами первого и второго поколений были аналогичны исходному стаду.
Учитываемые показатели по второму исследованию: результаты инкубации: оплодотворенность, выводимость, вывод цыплят(%); сохранность молодняка (%); живая масса (кг); половая зрелость (дн.); яйценоскость (шт.); масса яйца (г).
Биометрическую обработку данных проводили методами вариационной статистики [, 1983] с использованием пакета анализа Microsoft Excel 2003. Долю влияния матерей на показатели эмбрионального развития потомков определяли методом однофакторного дисперсионного анализа. Коэффициент наследуемости был рассчитан по удвоенному коэффициенту корреляции.
Производственная проверка
На испытание были поставлены потомки кур первой и второй исследуемых групп. В качестве контрольной группы были взяты одновозрастные куры линии СП 9, селекционируемые по показателям продуктивности без учета характера раннего эмбрионального развития.
По существующей методике [ВАСХНИЛ, 1980] была определена себестоимость продукции, полученной от опытной и контрольной групп, и рассчитан экономический эффект использования разработанного приема ранней эмбриональной оценки кур.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Определение параметров и оптимального времени
оценки эмбрионального развития кур
Наиболее высокая точность оценки видимых бластодисков была в период 18 – 19 часов инкубации и составляла 92,9% и 93,6%, соответственно этому времени, индивидуальные различия диаметров зародышевых дисков были в диапазоне 5 – 10 мм. При дальнейшей инкубации происходило снижение процента видимых бластодисков, так как в этот период формировались осевые органы зародыша, и он углублялся в желток. На вторые сутки происходило формирование органов желточного кровообращения, и точное фиксирование стадий развития эмбриона без вскрытия яйца затруднено. На третьи сутки сосудистое поле желточного мешка наполнялось кровью, видимость зародыша при овоскопировании достигала 100%. Диаметры сосудистого поля находились в пределах от 13 до 23 мм. После 65 часов куриные зародыши фиксировались на подскорлупной оболочке, и измерение диаметров сосудистого поля было не возможно без нарушения целостности скорлупы. В связи с этим наиболее оптимальным сроком измерения диаметров сосудистого поля было определено в 63 – 64 часа инкубации.
Анализ полученных данных показал связь (r=0,8±0,04) диаметров бластодиска и сосудистого поля, поэтому для определения более точной оценки развития эмбрионов была рассчитана их разница.
Из полученных данных следует, что для оценки и отбора кур по показателям эмбрионального развития следует учитывать размер бластодисков в 18 – 19 часов и диаметр сосудистого поля зародышей в 63 – 64 часа инкубации. На основании средней разницы вышеназванных показателей эмбрионы были разделены на группы: первая выше средних (М˃0,5δ), вторая со средними (М±0,5δ) и третья ниже средних (М<0,5δ) значений.
3.2 Отбор куриных эмбрионов для биологической промышленности
Варьирование разработанного в первом опыте признака дало основание для оценки влияния интенсивности раннего эмбрионального развития, на накопление биологического субстрата, используемого для производства вирусных вакцин (табл.1).
Таблица 1
Показатели развития куриных эмбрионов
Показатель | Группы эмбрионального развития | По всем исследуемым | ||||||
1– интенсивные | 2– средние | 3– медленные | ||||||
M±m | Cv% | M±m | Cv% | M±m | Cv% | M±m | Cv% | |
Диаметр бластодиска на 18-19 час инкубации, мм | 6,8± 0,14 | 12,0 | 7,3± 0,15 | 11,9 | 7,4± 0,23 | 17,0 | 7,2± 0,10 | 14,1 |
Диаметр сосудистого поля желточного мешка на 63-64 час инкубации, мм | 22,5± 0,20 | 5,1 | 20,6± 0,14 | 4,1 | 17,8± 0,39 | 12,1 | 20,4± 0,24 | 11,8 |
Разница диаметров сосудистого поля и бластодиска, мм | 15,7± 0,16 | 5,9 | 13,3± 0,09 | 3,9 | 10,3± 0,24 | 12,9 | 13,2± 0,23 | 17,9 |
Из данных таблицы 1 следует, что диаметр бластодиска в первой группе был меньше чем во второй и третьей на 0,5 мм и 0,6 мм соответственно, а по сравнению со всеми исследуемыми на 0,4 мм (Р˂0,05).
Диаметр сосудистого поля в первой группе был больше на 1,9 мм по сравнению со второй и на 4,7 мм по сравнению с третьей (Р˂0,001). Наиболее высокий коэффициент изменчивости был в третьей группе 12,1%, что предопределяет неоднородность признака.
Разница диаметров сосудистого поля и бластодиска была выше в первой группе по сравнению с двумя другими (Р˂0,001). Показатели во второй группе были практически одинаковыми по сравнению со всеми исследуемыми.
Результаты экспериментального заражения РЭК приведены в таблице 2.
Таблица 2
Объёмы экстраэмбриональной жидкости и титры активности ВНБ
Показатель | Группы эмбрионального развития | Контрольная группа | ||
1– интенсивные | 2– средние | 3– медленные | ||
Объем экстраэмбриональной жидкости от одного эмбриона, мл | 12,1 | 11,7 | 10,9 | 11,5 |
по группе, мл | 362 | 351 | 326 | 345 |
Титр вируса, lg ЭИД50/см3 | 9,7 ± 0,19 | 9,3 ± 0,23 | 9,0 ± 0,21 | 9,2±0,28 |
Наибольший объем экстраэмбриональной жидкости был получен от эмбрионов первой группы, он превышал показатели по второй и третьей на 3,1% и 10% соответственно. Такая же тенденция наблюдалась при анализе средних объёмов жидкости полученных от одного эмбриона. Данные контрольной группы уступали показателям первой и второй на 4,9% и 1,7% соответственно. Выход экстраэмбриональной жидкости от эмбрионов первой и второй групп был больше по сравнению с третьей и контрольной.
Инфекционная активность в экстраэмбриональной жидкости была выше в первой группе по сравнению с эмбрионами второй и третьей (Р˂0,05). Активность вируса контрольной группы была на уровне второй.
Полученные результаты дают основание использовать для биологической промышленности куриные эмбрионы с интенсивным и средним развитием на ранних стадиях онтогенеза.
3.3 Формирование групп кур в зависимости от интенсивности
эмбрионального развития
От кур, отобранных в гнезда, были получены яйца, которые в период инкубации были разделены на группы по интенсивности эмбрионального развития (табл. 3).
Таблица 3
Показатели эмбрионального развития кур
Показатель | Группы эмбрионального развития | По всем исследуемым | ||||||
1 – интенсивные | 2 – средние | 3 – медленные | ||||||
M±m | Cv% | M±m | Cv% | M±m | Cv% | M±m | Cv% | |
Диаметр бластодиска на 18-19 час инкубации, мм | 7,4± 0,09 | 25,5 | 8,5± 0,07 | 19,9 | 8,7± 0,10 | 23,7 | 8,2± 0,05 | 23,5 |
Диаметр сосудистого поля желточного мешка на 63-64 час инкубации, мм | 23,4± 0,11 | 9,0 | 21,1± 0,08 | 8,8 | 17,5± 0,13 | 14,7 | 20,7± 0,08 | 15,1 |
Разница диаметров сосудистого поля и бластодиска, мм | 16,0± 0,08 | 9,7 | 12,6± 0,04 | 7,3 | 8,9± 0,09 | 20,1 | 12,5± 0,08 | 24,4 |
Разница диаметров сосудистого поля и бластодиска была больше в первой группе, чем во второй на 3,4 мм и третьей на 7,1 мм (Р˂0,001). Разность этого показателя между эмбрионами первой группы и всеми исследуемыми составила 3,5 мм, вариабельность была наиболее высокой в третьей группе, что говорит о его не однородности.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 |
