Сравнительное фармакогностическое изучение грушанки круглолистной, зимолюбки зонтичной и толокнянки обыкновенной (стр. 2 )

Аминокислота	Содержание, мг в 100 мг	Аминокислота	Содержание, мг в 100 мг
Грушанка	Зимолюбка	Толокнянка	Грушанка	Зимолюбка	Толокнянка
Моноаминомонокарбоновые кислоты	Диаминомонокарбоновые кислоты
Аланин	0,58	0,49	0,30	Аргинин	0,65	0,42	0,28
Валин*	0,49	0,39	0,25	Лизин*	0,51	0,46	0,24
Глицин	0,79	0,45	0,27	Оксилизин*	0,07	0,04	0,01
Изолейцин*	0,41	0,30	0,19	Гетероциклические
Лейцин*	0,85	0,63	0,42	Пролин	0,52	0,35	0,17
Метионин*	0,12	0,11	0,06	Оксипролин	0,01	0,01	следы
Серин	0,49	0,41	0,24	Гистидин	0,22	0,13	0,09
Тирозин	0,47	0,27	0,19	Сумма незаменимых аминокислот*	3,41	2,64	1,63
Треонин*	0,41	0,33	0,20
Фенилаланин*	0,55	0,38	0,26
Цистеин	0,02	0,03	0,03	Сумма заменимых аминокислот	5,61	4,23	2,48
Моноаминодикарбоновые кислоты
Аспарагиновая	0,80	0,70	0,38	Общая сумма	9,02	6,87	4,11
Глютаминовая	1,04	0,98	0,53

Примечание. Звездочкой обозначены незаменимые аминокислоты.

последующей компьютерной обработкой результатов исследования с помощью программы Мультихром для Windows (рис. 4 и табл. 3). Так, в листьях грушанки идентифицировали 14 веществ фенольной природы, в листьях зимолюбки – 9. В листьях обоих растений доминировал арбутин. В листьях грушанки выявлены такие флавоноиды, как гиперозид, рутин, кверцетин, лютеолин, дигидрокверцетин, лютеолин-7-гликозид, в листьях зимолюбки – гиперозид и эпикатехин. Среди фенольных и гидроксикоричных кислот грушанки идентифицированы галловая, хлорогеновая, цикориевая, феруловая, неохлорогеновая, коричная, зимолюбки – галловая, цикориевая, кофейная, неохлорогеновая. Кроме того, в зимолюбке обнаружены кумарины (кумарин и о-метоксикумарин).

Количественное определение фенольных соединений. Для анализа арбутина применяли хроматоспектрофотометрическую методику с использованием при расчетах концентраций удельного показателя поглощения () арбутина - стандарта (Sigma, США), имеющего максимум поглощения при длине волны 285нм, равный 72,23, и коэффициента неполного элюирования, равного 1,14025. Максимумы поглощения в УФ-области очищенных спиртовых извлечений из

Рис. 1. Хроматограмма аминокислот листьев

грушанки круглолистной

Рис. 2. Хроматограмма аминокислот листьев

зимолюбки зонтичной

Рис. 3. Хроматограмма аминокислот листьев

толокнянки обыкновенной

Рис. 4. Хроматограмма метанольного извлечения листьев грушанки

круглолистной, полученная при ВЭЖХ-анализе

Условные обозначения идентифицированных соединений: 1 – арбутин, 2 – галловая кислота, 3 – хлорогеновая кислота, 4 – цикориевая кислота, 5 – феруловая кислота, 6 - неохлорогеновая кислота, 7 – лютеолин-7-гликозид, 8 – гиперозид, 9 – рутин, 10 - дигидрокверцетин, 11 – коричная кислота, 12 – кемпферол, 13 – лютеолин, 14 – кверцетин.

Таблица 3 – Идентифицированные фенольные соединения листьев грушанки

№ п/п	Вещество	Время удерживания, мин.	Содержание, %
1	Арбутин	3,539	20,34
2	Галловая кислота	4,455	2,85
3	Хлорогеновая кислота	5,624	1,08
4	Цикориевая кислота	6,364	1,77
5	Феруловая кислота	7,950	1,37
6	Неохлорогеновая кислота	10,050	1,39
7	Лютеолин-7-гликозид	14,290	1,29
8	Гиперозид	16,600	3,40
9	Рутин	19,840	2,07
10	Дигидрокверцетин	28,890	5,52
11	Коричная кислота	47,800	2,83
12	Кемпферол	54,300	2,66
13	Лютеолин	73,240	0,17
14	Кверцетин	77,900	0,03

листьев анализируемых растений и раствора стандартного образца арбутина (λ=285 нм) полностью совпадали (рис. 5).

Для количественного анализа суммы флавоноидов нами выбрана дифференциальная спектрофотометрия. Их содержание рассчитывали с использованием удельного показателя поглощения () комплекса гиперозида-стандарта (ГНЦЛС, г. Харьков, Украина) с алюминия хлоридом, равного 291,09.

Рис. 5. УФ-спектры поглощения спиртовых извлечений из листьев

грушанки, зимолюбки, толокнянки и спиртового раствора арбутина-стандарта

Сумму гидроксикоричных кислот определяли прямой спектрофотометрией спиртового извлечения. Расчет концентраций проводили с использованием удельного показателя поглощения хлорогеновой кислоты ("Fluka", Германия).

Количественное определение дубильных веществ проводили по методике ГФ XI, т. е. перманганатометрическим титрованием.

В процессе адаптации методик нами определены оптимальные условия количественного определения арбутина, суммы флавоноидов и гидроксикоричных кислот в листьях каждого растения (тип экстрагента, степень измельчения сырья, продолжительность и количество экстракций, соотношение сырья и экстрагента). Кроме того, нами проведена метрологическая характеристика методик и определены их относительные ошибки, которые представлены в таблицах 4 – 7.

По адаптированным методикам количественного определения арбутина, флавоноидов, гидроксикоричных кислот и дубильных веществ нами проанализированы 19 образцов грушанки, 16 – зимолюбки и 17 – толокнянки. Полученные результаты отражены в таблицах 8 – 10.

При обобщении полученных данных выявлено, что среднее содержание арбутина в сырье грушанки составило 6,98%, зимолюбки – 11,46%, толокнянки – 10,57%. При этом содержание арбутина колебалось от 2,755% до 12,691% в грушанке, от 6,741% до 16,916% в зимолюбке и от 3,148% до 20,499% в толокнянке.

Таблица 4 – Метрологические характеристики методики количественного определения арбутина

Исследуемое растение	n	f	X	S2	S	Sx	P,%	t (p, f)	ΔX	ε,%
Грушанка	10	9	7,521	0,0039	0,0624	0,0197	95	2,26	0,045	0,60
Зимолюбка	10	9	10,511	0,0091	0,0953	0,0301	95	2,26	0,068	0,65
Толокнянка	10	9	11,283	0,0239	0,1546	0,0489	95	2,26	0,110	0,97

Таблица 5 – Метрологические характеристики методики количественного определения суммы флавоноидов