Первая редакция (стр. 1 )

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО

ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ГОСТ Р ………..— 200

Технологии лабораторные клинические.

Технология клинического лабораторного анализа мочи.

Анализ мочи общий

Первая редакция

Москва

2008

Предисловие

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 01.01.01 г. «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации – ГОСТ Р 1.0—2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Лабораторией проблем клинико-лабораторной диагностики, Межрегиональной общественной организацией содействия стандартизации и повышению качества медицинской помощи

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 466 «Медицинские технологии»

3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от №

4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок – в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования – на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

Содержание

1.Область применения. 7

2. Нормативные ссылки. 7

3.Общие положения. 7

4. Требования к обеспечению выполнения технологии. 8

4.1. Требования к специалистам и вспомогательному персоналу. 8

4.2.Требования к обеспечению безопасности труда медицинского персонала. 9

4.3. Условия выполнения технологии клинического лабораторного анализа мочи и функциональное назначение. 10

4.4. Материальные ресурсы, необходимые для выполнения технологии: приборы, средства измерения, лабораторное оборудование. 10

4.5. Реактивы. 12

4.6. Прочий расходуемый материал. 13

5. Характеристика методик выполнения технологии клинического лабораторного анализа мочи 13

5.1. Взятие образцов мочи. 13

5.2. Идентификация образца. 13

5.3. Приемлемость образца. 13

Перед проведением анализа образцы должны быть доведены до комнатной температуры. 14

5.4. Оценка физических свойств мочи. 14

5.5. Технологии выполнения химических исследований мочи с помощью диагностических тест-полосок 14

5.6. Микроскопическое исследование мочи. 16

5.7. Автоматизированный анализ мочи. 22

6. Дополнительные сведения об особенностях выполнения технологии. 22

7. Регистрация результатов анализа мочи. 22

8. Обеспечение качества выполнения технологии анализа мочи. 22

8.1. Программы обеспечения качества. 22

8.2. Ведение регистрации контрольных мероприятий. 23

8.3. Инструкции к используемым методикам лабораторных исследований. 23

8.4. Контроль качества материалов и оборудования. 24

8.5. Внутрилабораторный контроль качества анализа мочи. 24

8.6. Внешняя оценка качества. 26

8.7. Непрерывное образование специалистов. 26

9. Требования к режиму труда и отдыха, диете и ограничениям при подготовке пациента к сбору мочи для проведения анализа мочи. 27

10. Стоимостные характеристики выполнения технологии клинического лабораторного анализа мочи 27

ПРИЛОЖЕНИЕ А.. 28

Сбор образцов мочи, условия хранения и доставки (преаналитический этап) 28

ПРИЛОЖЕНИЕ Б. 31

Исследование мочи с помощью диагностических тест-полосок. 31

ПРИЛОЖЕНИЕ В.. 38

Подтверждение результатов, полученных с помощью тест - полосок, другими методами: определение относительной плотности урометром, белка и глюкозы - химическими методами. 38

Библиография. 41

Проект

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

«Технологии лабораторные клинические.

Технология клинического лабораторного анализа мочи. Анализ мочи общий».

1.Область применения.

Настоящий стандарт устанавливает единые требования при выполнении технологии «Анализ мочи общий» в клинико-диагностических лабораториях (КДЛ) медицинских учреждений, в перечень исследований которых включен этот комплекс анализов. Соблюдение установленных настоящим стандартом требований обеспечивает надежность результатов исследования, необходимую для уверенного использования этих результатов при принятии клинических решений. Настоящий стандарт может использоваться всеми организациями, учреждениями и предприятиями, а также индивидуальными предпринимателями, деятельность которых связана с оказанием медицинской помощи гражданам Российской Федерации.

2. Нормативные ссылки.

ГОСТ Р ИСО 15189 —2006 « Лаборатории медицинские – частные требования к качеству и компетентности».

ГОСТ Р ИСО 15190 —2007 «Требования по безопасности».

ГОСТ Р «Технологии медицинские лабораторные. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4 «Правила ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований».

3.Общие положения.

Технология «Анализ мочи общий» выполняется с целью диагностики болезней, при профилактических обследованиях, для мониторинга течения болезни и эффективности лечения.

Исследование мочи имеет большое диагностическое значение не только при заболеваниях почек, но и многих других органов и систем организма.

Комплекс методов общего анализа мочи обычно включает:

- макроскопическую оценку с описанием общих физических свойств;

- физические измерения (объем, относительная плотность);

- химические исследования, которые проводятся с помощью диагностических тест-полосок (качественный и полуколичественный анализ) : определение рН, белка, глюкозы, кетоновых тел, билирубина, уробилиноидов, крови, нитритов, аскорбиновой кислоты; или химическими методами для подтверждения результатов определения белка и глюкозы, полученных тест-полосками.

- микроскопическое исследование осадка мочи.[1]

4. Требования к обеспечению выполнения технологии

4.1. Требования к специалистам и вспомогательному персоналу.

4.1.1.Перечень специалистов с высшим и средним образованием, участвующих в выполнении данной технологии:

- врач клинической лабораторной диагностики или биолог;

- специалист со средним медицинским образованием (медицинский технолог, медицинский лабораторный техник, фельдшер-лаборант, лаборант).

4.1.2.Требования к образованию специалистов.

Врачи клинической лабораторной диагностики или биологи должны иметь последипломное образование и периодически проходить повышение квалификации в установленном порядке. Врачи должны иметь сертификат специалиста. Врачи или биологи выполняют микроскопическое исследование мочи.

Специалисты со средним образованием (медицинский технолог, медицинский лабораторный техник, фельдшер-лаборант, лаборант) должны иметь соответствующую квалификацию по диплому, сертификат специалиста и проходить в установленном порядке повышение квалификации. Они проводят макроскопическое исследование, физические измерения, химические исследования, подготовку препарата осадка мочи для микроскопического исследования. Квалифицированные специалисты со средним образованием могут проводить микроскопическое исследование осадка мочи при отсутствии патологических результатов химического исследования диагностическими тест-полосками.

4.1.3. Требования к знаниям и умениям специалистов, выполняющих данное исследование (требования образовательных стандартов)

Врачи клинической лабораторной диагностики (биологи) должны знать [1]:

- все признаки патологии, которые можно выявить на всех этапах

исследования мочи;

- строение, функции и основные болезни органов мочеобразовательной и мочевыделительной систем;

- клиническое значение протеинурии, глюкозурии, билирубинурии, кетонурии, уробилинодурии, гематурии (зритроцитурии, гемоглобинурии), лейкоцитурии..

- При проведении микроскопического исследования должны знать морфологию нормальных и патологических элементов: эпителия мочевыводящих путей, эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров, строение кристаллов солей, встречающихся в кислой, щелочной и нейтральной моче, клинико-диагностическое значение лейкоцитурии, наличия почечного эпителия и его жировой дистрофии, переходного эпителия, солей.

- Должны также знать все этапы подготовительной работы и проведения общего анализа мочи: правила сбора мочи, правила техники безопасности при работе с потенциально инфицированным биологическим материалом, требования к доставке и хранению материала, правила центрифугирования мочи для приготовления осадка, методики проведения физического, химического и микроскопического исследования мочи.

Должны уметь:

- описать физические свойства нормальной и патологической мочи,

- определить относительную плотность, рН,

- провести химические исследования мочи,

- подготовить препарат для микроскопического исследования,

- провести микроскопию осадка мочи: дифференцировать клеточные элементы, цилиндры, соли, обнаружить наличие бактерий, спор и мицелия гриба, яиц или личинок гельминтов..

Специалисты со средним медицинским образованием (медицинский технолог, медицинский лабораторный техник, фельдшер-лаборант, лаборант) должны знать:

- теорию образования мочи, функцию почек и причины ее нарушений, морфологию клеточных и других элементов мочи, мочевые синдромы и их значение в диагностике заболеваний органов мочевой системы, основные методы и диагностическое значение исследования физических и химических показателей мочи.

Должны уметь:

- описать физические свойства мочи, определить относительную плотность;

- провести химическое исследование белка, глюкозы, кетоновых тел, билирубина, уробилиногена, нитритов;

- приготовить препарат осадка мочи для микроскопического исследования.

4.2.Требования к обеспечению безопасности труда медицинского персонала.

Лица, отвечающие за сбор, доставку и анализ образцов мочи, должны быть осведомлены о потенциальной биологической опасности, так как часто невозможно знать заранее, инфицирован ли образец, поэтому все образцы биологического материала считаются потенциально инфицированными.

Персонал должен соблюдать общие правила техники безопасности, принятые для работы в клинико-диагностических лабораториях. Рекомендуется строго соблюдать общие предосторожности при ручной обработке образцов мочи пациентов и работе с другими материалами, используемыми при выполнении анализа. Это касается не только биологической опасности, но и работы с химическими реактивами и электроприборами.

Для обеспечения безопасности работы в лаборатории необходимо следовать правилам стандарта ГОСТ Р ИСО 15190 —2007 «Требования по безопасности».

4.2.1.Правила биологической безопасности:

- прием присланного в лабораторию биологического материала (мочи) и работа с ним проводится в индивидуальных средствах защиты (халаты, резиновые перчатки);

- после окончания работы проводят дезинфекцию лабораторного инструментария, стеклянных изделий, поверхности рабочих столов и помещений лаборатории. Все работы проводят в резиновых перчатках. Для обеззараживания используются средства, обеспечивающие уничтожение вирусов и бактерий, рекомендуемые для дезинфекции [2]. После окончания работы сотрудники снимают перчатки, обрабатывают руки дезинфицирующим раствором (70% раствором этилового спирта), а затем моют руки теплой водой с мылом.

Потенциально опасные отходы, загрязненные остатками биологического материала, образующиеся в процессе выполнения технологии, дезинфицируют. После дезинфекции собирают в одноразовую твердую герметическую упаковку, маркируют надписью с указанием класса отходов, (например, «Опасные отходы, класс Б), кода подразделения, фамилии ответственного за сбор отходов лица, затем помещают в специальные контейнеры, установленные в определенных местах на территории лечебного учреждения [3];

4.2.2. Правила работы со специальным оборудованием и соблюдение пожарной безопасности.

Все сотрудники должны выполнять инструкции и правила техники безопасности, изложенные в технических паспортах к электрическим приборам, используемым в технологии (фотометры, микроскопы, центрифуги); персонал, работающий с реактивами, должен быть обучен обращению с ними, использовать средства персональной защиты, соблюдать правила личной гигиены.

Для предупреждения пожаров необходимо соблюдать правила пожарной безопасности в соответствии с действующими нормативными документами.

Таким образом, необходимо строгое следование всем инструкциям по технике безопасности, пожарной безопасности и биологической безопасности.

4.3. Условия выполнения технологии клинического лабораторного анализа мочи и функциональное назначение

Комплекс исследований «Анализ мочи общий» выполняется в клинико-диагностических лабораториях амбулаторно-поликлинических и стационарных учреждений здравоохранения.

Функциональное назначение услуги: проводится с целью диагностики болезней, профилактических обследований (скрининг при отсутствии симптомов болезней), наблюдения за течением и прогрессированием болезни и эффективностью лечения.

4.4. Материальные ресурсы, необходимые для выполнения технологии: приборы, средства измерения, лабораторное оборудование.

4.4.1. Микроскоп бинокулярный с иммерсией и встроенным осветителем.

Микроскопы, использующиеся для исследования осадка мочи должны иметь бинокулярную насадку, встроенный источник света, стандартные установки объективов и окуляров на определенное увеличение.

4.4.2. Центрифуга лабораторная.

Для приготовления осадка мочи должны использоваться центрифуги, обеспечивающие не менее 1500 оборотов в мин., имеющие самозакрывающиеся крышки, когда ротор запущен. При использовании центрифуги необходимо строго следовать инструкции производителя.

4.4.3. Приборы для считывания результатов диагностических тест-полосок.

. Приборы для считывания интенсивности цвета тест-полосок представляют собой отражательные фотометры или рефлектометры, которые представляют собой фотометрические устройства для количественного измерения потоков света, отраженного поверхностью реакционной зоны. Лучи света, отраженные и рассеянные в разных направлениях, многократно отражаются от внутренней стенки сферы прибора, внутри которого создается равномерная освещенность, интенсивность которой определяется суммой всего отраженного исследуемой поверхностью света. Поскольку окраска различных реакционных зон неодинакова, может потребоваться измерение на разных длинах волн, что предусмотрено устройством прибора.

При использовании отражательных фотометров необходимо строго следовать инструкции по применению прибора.

Допускается применение в КДЛ только тех приборов, которые зарегистрированы в соответствии с установленным порядком.

4.4.4. Фотометр (фотоэлектроколориметр) (при необходимости подтверждения химическими методами результатов определения на тест-полосках).

4.4.5.Урометр (при необходимости дополнительного измерения относительной плотности).

4.4.6.Секундомер (при использовании визуального способа считывания результатов).

4.4.7. Штатив для пробирок.

4.4.8. Стеклянные (пластиковые) изделия.

4.4.8.1. Сосуд с крышкой для сбора мочи (50 – 100 мл).

Сосуд для сбора мочи должен быть емкостью не менее 100 мл с широким горлом (не менее 4 см в диаметре) с устойчивым основанием, чтобы избежать случайного разливания. Посуда для сбора должна быть сухой, чистой, но не стерильной, желательно из прозрачного материала, инертного к составным частям мочи. Если посуда используется для транспортировки, она обязательно должна иметь плотно закрывающуюся крышку, чтобы избежать вытекания содержимого, при этом крышка должна легко открываться.

Сосуд и крышка не должны содержать химических веществ, например, детергентов, которые могут мешать при определении некоторых химических составляющих мочи. Сосуд для сбора мочи не используется повторно без специальной обработки.

4.4.8.2. Центрифужные пробирки (10 мл).

Центрифужные пробирки из стекла или пластика должны быть прозрачными для обеспечения макроскопического изучения мочи и достаточно прочными, чтобы не разбивались при центрифугировании. Должны закрываться крышками для уменьшения опасности разбрызгивания. Они должны иметь коническую форму для концентрирования осадка, быть градуированными для стандартизации объема центрифугируемой мочи. Пробирки должны быть химически чистыми и маркированными для правильной идентификации пациента.

4.4.8.3. Цилиндры мерные (50, 100 мл). Используются при определении относительной плотности мочи урометром.

4.4.8.4. Стекла предметные и стекла покровные для микроскопии.

Вместо стеклянных предметных и покровных стекол могут быть использованы пластиковые слайд-планшеты для исследования осадка мочи, что создает более стандартные условия и облегчает микроскопию. Это изделия разового использования, совпадающие по размеру с предметным стеклом (80 х 30 х 1,7 мм), имеющие 10 камер, каждая из которых имеет покрытие из тонкой пластиковой пластинки, соответствующее покровному стеклу (размером 19 х 17 мм). 10 камер позволяют проводить микроскопическое исследование 10 образцов мочи (нативного или суправитально окрашенного осадка). Устройство позволяет также проводить подсчет форменных элементов без применения счетной камеры.

4.4.8.5. Пипетки для переноса осадка мочи: обычно используют пастеровские пипетки с тонко оттянутым концом и баллончиком; предназначены для стандартизации объема капли осадка и уменьшения риска биологической опасности, связанной с ресуспендированием или переносом осадка. Они должны быть сухими и химически чистыми.

4.5. Реактивы.

4.5.1.реактивы для суправитальной окраски осадка мочи.

Краска Штернгеймера.

Используется готовая коммерческая краска Штернгеймера, состоящая из двух реактивов, из которых перед употреблением готовится рабочий
раствор.

Реактив применяется для суправитальной (без фиксации препарата) окраски осадка мочи для более надежной идентификации элементов организованного осадка мочи, включая клетки новообразований.. Описание применения реактива дано в разделе «Микроскопические исследования мочи» (см. п. 5.6.5.).

4.5.2. Диагностические тест-полоски.

Диагностическая тест-полоска представляет собой изделие для диагностики in vitro, предназначенное для одноразового применения, Она состоит из реакционной зоны, отражательной части и подложки. Реакционная зона содержит высушенный и импрегнированный в волокна пористой матрицы (например, альфа-целлюлозы) комплекс химических реагентов в необходимых количествах, предусмотренных методикой исследования. Тест-полоска может содержать одну или несколько реакционных зон, расположенных на единой подложке, каждая из которых предназначена для обнаружения или измерения содержания определенного аналита.

В основе методов, используемых в тест-полосках для анализа мочи, лежат цветные реакции, приводящие к изменению окраски тестовой зоны полоски. В зависимости от химических свойств определяемого аналита используются разные химические методы, в том числе ферментативные (например, глюкозооксидазный метод для анализа глюкозы в моче, или оценка количества лейкоцитов в моче на основе исследования активности их собственной эстеразы). Диагностически значимые изменения показателей мочи должны вызывать визуально заметные изменения окраски. Концентрация реактивов в тестовых зонах должна быть подобрана таким образом, чтобы быстро получить результат (в пределах нескольких десятков секунд).

П р и м е ч а н и е 1 - При обнаружении патологического результата повторяют исследование химическими методами (подтверждающие тесты).

Например, обязательно проводят количественное определение белка в моче с пирогаллоловым красным, сульфосалициловой кислотой или другим химическим методом, глюкозы – гексокиназным или глюкозооксидазным методом на анализаторе глюкозы, а также микроскопическое исследование осадка мочи.

В зависимости от типа полоски оценка результатов исследования мочи может быть произведена и зарегистрирована:

- визуально, путем субъективного сравнения оператором с прилагаемой к изделию цветной шкалой;

- оптическим способом.

4.5.3. Готовые наборы химических реактивов для определения белка или глюкозы (при необходимости использования химических методов, например, в качестве подтверждающих тестов или при отсутствии диагностических тест-полосок).

4.6. Прочий расходуемый материал.

4.6.1. Перчатки резиновые.

4.6.2. Дезинфицирующие средства.

5. Характеристика методик выполнения технологии клинического лабораторного анализа мочи

5.1. Взятие образцов мочи

Для правильного ведения преаналитического этапа необходимо соблюдать требования стандарта ГОСТ Р «Технологии медицинские лабораторные. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4 «Правила ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований».

Правила взятия различных образцов мочи, хранения и транспортировки изложены в приложении А.

5.2. Идентификация образца

В направлении на исследование должна быть включена следующая информация: фамилия и инициалы пациента, возраст или дата рождения, пол, отделение медицинского учреждения и палата (в стационаре), номер медицинской карты (идентификационный номер), диагноз дата и время сбора образца мочи (с указанием порции – утренняя, случайная и т. д.), время доставки образца в лаборатории. Должны быть перечислены все показатели, которые требуется исследовать. При необходимости указать принимаемые пациентом лекарства.

Немаркированные или неправильно маркированные образцы не пригодны для исследования, о чем необходимо уведомить клинициста, назначившего анализ.

5.3. Приемлемость образца

Так как точность результатов исследования мочи во многом зависит от качества доставленного образца мочи, необходимо неукоснительно следовать правилам сбора и транспортировки мочи (приложение А). Рекомендуется сразу после сбора доставлять образцы утренней мочи в лабораторию и исследовать как можно скорее.

После доставки образца мочи в лабораторию сотрудник лаборатории, принимающий материал, должен проверить правильность оформления направления на анализ, маркировку посуды (код или фамилия больного и другие данные должны быть идентичны данным, указанным в бланке-направлении) и зарегистрировать поступивший материал.

Моча, собранная для общего анализа, может храниться при комнатной температуре не более 4-х часов. Можно сохранять в холодильнике, не допуская замерзания (от 2°С до 8°С), но охлаждение, предотвращая разрушение форменных элементов, может влиять на результаты определения относительной плотности урометром, затруднять микроскопию из-за преципитации уратов, а также не рекомендуется для некоторых химических компонентов, например, билирубина и уробилиногена, окисление которых (с образованием биливердина или уробилина) может привести к ложно-отрицательным результатам.

Отсрочка анализа и использование охлаждения образца отмечаются в бланке ответа.

Перед проведением анализа образцы должны быть доведены до комнатной температуры.

5.4. Оценка физических свойств мочи

5.4.1.Количество мочи для общего анализа.

Для общего анализа собирается вся порция мочи. В лабораторию доставляется не менее 70-100 мл. Образец не должен содержать примесей и чужеродных материалов (например, фекалий, частиц тканей, используемых в ванной комнате и др.). Если правильность сбора мочи не соблюдается, клиницисту сообщают о непригодности собранного образца и необходимости прислать повторно правильно собранную мочу.

В некоторых случаях цвет, прозрачность и запах мочи имеют клиническое значение.

5.4.2. Цвет мочи.

Цвет мочи в норме – от светло-желтого до насыщенного желтого. Красная мутная моча характерна для макрогематурии (цвет «мясных помоев»), красная и прозрачная моча наблюдается при наличии гемоглобина, миоглобина, порфиринов, некоторых лекарств или пищевых красителей. При билирубинурии моча приобретает желто-коричневый цвет.

5.4.3.  Запах мочи.

Аммиачный запах отмечается обычно вследствие бактериального разложения, что может наблюдаться при длительном хранении мочи или инфекции мочевыводящих путей. При появлении кетоновых тел в моче больных диабетом отмечается «плодовый» или «яблочный» запах.

5.4.4. Прозрачность мочи.

Свежевыпущенная моча прозрачна. Мутность может быть обусловлена клетками, солями, слизью и бактериями. Точная оценка прозрачности по шкале: «полная – неполная», предполагает чтение газетного шрифта через пробирку с мочой. В практической работе обычно в бланке указывают: «прозрачная, мутноватая или мутная» в соответствии с визуальной оценкой.

5.5. Технологии выполнения химических исследований мочи с помощью диагностических тест-полосок

Химический анализ мочи может быть выполнен с использованием различных тест-полосок, выпускаемых разными производителями (см. п. 4.5.2.). Эти диагностические полоски можно использовать для качественного или полуколичественного исследования мочи (см. приложение Б).

С помощью тест-полосок могут быть определены следующие аналиты, входящие в состав общего анализа мочи:

- относительная плотность

- рН

- белок (альбумин),

- глюкоза,

- кетоновые тела,

- билирубин,

- уробилиноген,

- эритроциты / гемоглобин,

- нитриты

- лейкоциты (эстераза нейтрофилов).

-аскорбиновая кислота (вспомогательный параметр)

П р и м е ч а н и е 1 – производятся тест-полоски, содержащие дополнительную тестовую зону для определения аскорбиновой кислоты, что используется как контрольный параметр, позволяющий учесть риск получения неправильных результатов таких важных показателей, как гемоглобин, белок, глюкоза, билирубин. При отсутствии зоны для оценки содержания аскорбиновой кислоты необходимо обратить внимание на перечень лекарственных препаратов, принимаемых пациентом.

Для исследования используется свежесобранная моча, хранившаяся до анализа не более четырех часов. При отсроченном анализе мочу следует хранить в холодильнике. Использование консервантов нежелательно, так как они могут ингибировать некоторые тесты.

Перед исследованием мочу тщательно перемешивают.

Методика проведения исследования: необходимое для анализа количество полосок изъять из пенала, не прикасаясь руками к тестовым зонам. Пенал следует быстро закрыть крышкой для предотвращения поступления влаги из воздуха.

П р и м е ч а н и е 2 – В крышке или внутри пенала находится осушитель, поглощающий влагу при открывании пенала. Это обеспечивает длительный срок хранения полосок даже после вскрытия пенала.

После удаления избытка мочи полоску следует держать горизонтально для исключения перекрестного загрязнения реактивами из прилегающих зон. При определении результата анализа мочи на отражательном фотометре диагностическую полоску после удаления избытка мочи помещают в специальный держатель, транспортер или на место считывания результата (в зависимости от конструкции прибора). Анализатор мочи (отражательный фотометр) проводит измерение параметров в стандартном режиме.

П р и м е ч а н и е 4 – При работе на некоторых анализаторах нет необходимости предварительного удаления избытка мочи, так как он удаляется в процессе движения полоски на транспортере к фотометру, в котором происходит детекция результата. Иногда для удаления избытка мочи в анализаторе предусмотрена отдельная функция.

После помещения полоски в анализатор происходит измерение и распечатывание результата. На отражательных фотометрах возможна качественная и полуколичественная оценка результатов. Патологические результаты отмечаются особыми пометками (флагами). В тест-полосках для исследования мочи на отражательных фотометрах с полуколичественным определением предусмотрены так называемые компенсационные зоны. Эти зоны, как правило, белого цвета, не импрегнированны реактивами. Они представляют собой своего рода «холостые пробы», постановка которых необходима для приборной компенсации окрашивания реакционных зон нативной мочой при определении химических компонентов.

В некоторых случаях (экстренный анализ мочи при отсутствии фотометра, измерение параметров на приеме у врача общей практики, при наличии интенсивной окраски мочи, которая меняет цвет фона) результаты могут быть оценены визуально через промежуток времени, который указан в инструкции. Время экспозиции должно быть точно соблюдено для получения надежных результатов. После погружения полоски в мочу сравнивают окраску тестовых зон с окраской соответствующих зон цветной шкалы на пенале и регистрируют результат.

Временной интервал между нанесением мочи на полоску и моментом чтения результата критически важен для точности определения: слишком короткий интервал может вызвать занижение результата из-за незавершенности цветной реакции, а слишком длинный интервал - из-за нестабильности окрашенного продукта.

Визуальная оценка результатов по цветным шкалам, нанесенным на контейнеры для хранения полосок, может быть выражена как в единицах концентрации, так и в виде полуколичественной (порядковой) оценки результатов: «отрицательные» (-), «сомнительные» (+-), «положительные» (+, ++, +++ или ++++).

Для подтверждения результатов исследований, полученных с помощью диагностических тест-полосок, могут быть использованы химические методы. Например, для обнаружения белка используют:

- реакцию с 20% сульфосалициловой кислотой (качественная проба), основанную на коагуляции белка, или

- количественный метод с красителем пирогаллоловым красным (приложение В).

Для определения глюкозы используют глюкозооксидазный метод (приложение В).Имеются готовые наборы реактивов для выполнения химических методов, необходимо тщательно изучать инструкцию и точно ей следовать.

5.6. Микроскопическое исследование мочи

5.6.1. Требования к образцу осадка мочи для микроскопического исследования.

Исследование проводят в первой утренней порции мочи, которая является наиболее концентрированной, что способствует увеличению количества элементов осадка, или в случайной (рандомизированной) порции. Перед проведением исследования врач должен иметь информацию о времени сбора мочи и результатах физико-химических исследований. Необходимо строго соблюдать условия хранения образца мочи. Исследование осадка необходимо выполнять в течение 4-х часов после сбора мочи, при более позднем исследовании образец мочи нужно хранить в холодильнике, не замораживая. Большинство консервантов влияют на результаты тестов диагностических полосок, поэтому их применение нежелательно, но при необходимости можно использовать тимол (несколько кристаллов на образец мочи). В настоящее время для исследования мочи выпускаются вакуумные пробирки, содержащие стабилизатор для клеточных элементов, который не влияет на результаты диагностических полосок.

5.6.2. Виды микроскопических исследований.

Микроскопическое исследование при общем анализе мочи проводится в нативном препарате на предметных стеклах в затемненном поле микроскопа или с опущенным конденсором. При наличии трудно дифференцируемых клеток (зпителия, макрофагов, клеток сперматогенеза и др.) могут применяться суправитальные окраски (без фиксации препарата) на предметных стеклах или в пробирке с мочой, приготовленной для микроскопии осадка, с использованием разных красителей (например, краски Штернгеймера, см. п.4.5.1.).

Кроме визуального микроскопического исследования применяется исследование с помощью автоматических и полуавтоматических анализаторов. в.

5.6.3.Подготовка осадка мочи и приготовление препаратов для микроскопического исследования:

В лаборатории должна быть утверждена процедура подготовки осадка мочи и приготовления препарата для микроскопического исследования и процедура проведения самого микроскопического исследования. Каждый сотрудник должен выполнять все этапы анализа одинаковым способом и оценивать микроскопические элементы осадка, используя одни и те же критерии для идентификации. Объем мочи, используемый для центрифугирования, должен быть выбран в каждой лаборатории и использоваться постоянно, например, 10 мл; если в каких-либо случаях будут использоваться меньшие объемы (например, в педиатрии, неонаталогии), это отмечается в заключении.

В центрифужную пробирку помещают 10 мл из утренней порции мочи после тщательного ее перемешивания. Центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин. Затем быстрым наклоном пробирки сливают прозрачный верхний слой, оставляя примерно 1 мл осадка, после чего 1 каплю (приблизительно 40 мкл) переносят пастеровской пипеткой с баллончиком и тонко оттянутым концом на середину предметного стекла и покрывают покровным. Покровное стекло должно покрывать осадок полностью. При избытке жидкости препарат становится многослойным и это затрудняет микроскопические исследования. При малом объеме мочи, например, у грудных детей, центрифугируют весь объем мочи, оставшийся после анализа на диагностических полосках, после сливания надосадочной жидкости оставляют примерно 1/10 часть.

Использование слайд-планшетов вместо предметных и покровных стекол создает более стандартизованные условия для микроскопии.

Стандартизация приготовления препаратов осадка мочи позволяет получить сравнимые результаты микроскопического исследования в разных лабораториях.

5.6.4.Микроскопическое исследование нативного препарата осадка мочи.

Изучение препарата начинают с малого увеличения (ок. х 8, об. х 10) для общего обзора, а более детальное изучение препарата с количественной оценкой элементов организованного и неорганизованного осадка производят при большом увеличении (ок. х10, об. х 40). Если элементы осадка встречаются в каждом просмотренном поле зрения, то количественную оценку выражают их числом в поле зрения, при небольшом количестве элементов, когда их встречают далеко не в каждом поле зрения, — числом в препарате (число в препарате оценивается при малом увеличении).

Различают организованный и неорганизованный осадок.

Организованный осадок мочи состоит из клеток крови (эритроцитов, лейкоцитов), эпителиальных клеток (многослойного плоского, переходного, почечного эпителия), цилиндров (белкового и клеточного происхождения, а также состоящих из продуктов распада клеток). При наличии клеток злокачественных образований их также относят к организованному осадку.