Фармакология и применение препаратов железа в ветеринарии и животноводстве (стр. 2 )

Эмбриотоксическое и тератогенное действие изучали с учетом плодовитости крыс. В контроле в количество плодов на самку в среднем от 9,9+0,4, а при применении ферро-квина в дозе 5 мл/кг на 5 и 10 дни беременности 9,7+0,6 и 9,7+0,4. В группе ферро-квина в дозе 10 мл/кг массы в те же сроки 9,8+0,5 и 9,6+0,6 соответственно. Крысята от самок в опыте не отличались от контрольных. Морфологическими исследованиями не выявлено аномалий развития органов и скелета плодов в опытных группах.

Местнораздражающее, кожно-резорбтивное и аллергизирущее действие изучали в отношении ферроквина, бажедина, био-железо и биомоса; установлено, что их однократная аппликация (от 0,020 до 0,10 мл/см2 ) на кожу кроликов не вызывает её повреждения, эритемы или отеков. Аппликация не вызывала местную реакцию в виде десквамации, аллергической экземы и дерматита.

Изучая раздражающие свойства препаратов при внутрикожном введении установили, что после внутривенного введения 1% раствора трипанового синего в дозе 1 мл/кг массы тела кролика ферро-квин в форме 7,5%-ного раствора проявляет слабое раздражающее действие длительностью до 3 часов.

Визуальная оценка состояния конъюнктивы, роговицы и век глаз кроликов показала, что вызывает слабое раздражение конъюнктивы спустя 1 час после закапывания ферро-квина, которое проходило уже к 2-му часу, что характеризует его слабораздражающие свойства при наружном применении.

При изучении кожно-резорбтивного действия на кожные покровы мышей и крыс установлено, что аппликации ферро-квина, бажедина, биомоса и биожелеза (20-ти кратные) не вызывали гибели животных, не нарушали целостности кожи на месте нанесения, не влияли на жизнедеятельность животных.

Изучая аллергизирующее действие ферро-квина, бажедина, био-железа и биомоса установлено, что двадцатикратная аппликация препаратов не вызывала явлений сенсибилизации организма подопытных животных.

Иммунотоксические свойства включали исследования влияния ферропрепаратов на фагоцитарную активность макрофагов перитонеального экссудата мышей показали что они не оказывают негативного влияния на фагоцитарную активность макрофагов (% фагоцитоза по сравнению с контролем достоверно не отличается). Кроме того, при применении ферро-квина в превосходящей дозе наблюдается тенденция к активации переваривающей способности фагоцитов, повышая индекс завершенности фагоцитоза на 1-2%. Данные НСТ – теста, свидетельствуют о том, что ферро-квин существенно не влияет на количество НСТ-положительных нейтрофилов. Оценку степени влияния на систему комплемента изучили на морских свинках с помощью гемолитического метода титрования сывороточного комплемента. Активность комплемента в опыте в дозах ферро-квина 5 и 10 мл/кг массы животных существенно не отличалась от животных, которым препараты не вводили и была ниже показателей животных обработанных левамизолом.

Изучение параметров мутагенности и канцерогенности ферропрепаратов особенно актуально с учетом существующего риска возникновения новообразований при их инъекциях. Для оценки мутагенных свойств ферро-квина учитывали постимплантационную смертность. В опыте данные смертности эмбрионов и количества живых эмбрионов на одну самку при применении ферро-квина в 3 фазу сперматогенеза (зрелые спермии, самки оплодотворенные непосредственно после введения ферро-квина самцам), во 2 фазу сперматогенеза (поздние сперматиды, самки оплодотворенные через неделю после введения ферро-квина самцам) и в 1 фазу сперматогенеза (ранние сперматиды, самки оплодотворенные через 2 недели после введения ферро-квина самцам) не отличаются от данных группы животных не получавших ферропрепараты. Для ферро-квина – сиропа и препарата для парентерального применения методом метафазного анализа аберраций хромосом в клетках костного мозга лабораторных животных, установили, что в опытных и контрольных группах не наблюдалось существенного (более чем десятикратного) увеличения количества клеток со структурными нарушениями хромосом: разрывами, транслокациями, дицентриками и кольцевыми хромосомами. Выявлено отсутствие канцерогенной и мутагенной активности при применении ферроквина в дозе 10TD в остром эксперименте, что указывает на отсутствие цитогенетического действия.

3.3. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ПРЕПАРАТОВ

Изучая влияние на эритро и гемопоэз на модели экспериментальной железодефицитной анемии у крыс и поросят сосунов с использованием биожелеза, биомоса и бажедина, для внутреннего применения и феранимала, седимина, ферроквина для инъекций. Установили выраженное антианемическое действие при внутреннем применении в дозе 10 мг железа/кг в течении 30 дней, либо разовом инъекционном применении в дозе 40-75 мг железа /кг массы.

Фармакокинетику ферро-квина для инъекций, феранимала и седимина изучали при их внутримышечном, подкожном и внутрибрюшинном способах введения, а ферроквина, бажедина, биомоса и био-железа, соответственно при их внутреннем применении.

Инъекционно ферро-квин вводили в дозе 1 мл/кг массы, что соответствовало 75 мг трехвалентного железа, феранимал и седимин в дозах рекомендуемых производителем (1-2 мл голову). Внутренние препараты в дозе 50 мг/кг железа. В таблице 2 отражена динамика количества железа в тканях.

После внутримышечного введения седимина содержание железа в крови увеличилось сразу до 30 мкг железа на г ткани, достигло максимума к третьему часу у ферроквина (до 62 мкг железа на г ткани). Оставалось на высоком уровне в течение суток у всех препаратов (до 25 мкг железа на г), а к третьему дню значительно уменьшилось. На пятый день было минимальным и к седьмому дню железо уже не обнаруживалось. В печени железо было обнаружено к третьему часу эксперимента, где его концентрация была ниже чем в крови на 55%, что свидетельствует об активной абсорбции железа другими тканями, в частности кроветворными. Высокий уровень экзогенного железа на протяжении исследования с первого часа и до пяти суток после инъекции введения препарата был обнаружен в костном мозге. Максимум концентрации этого металла в костном мозге обнаружен на первые – третьи сутки эксперимента, когда его содержание было стабильно высоким на уровне 46 – 28 мкг железа на г ткани.

Наибольшее содержание железа было в мышцах (от 74 мкг железа на г сразу после введения, до 29 мкг железа на г на третьи сутки). Вместе с тем к 7 – 9 суткам экзогенные количества железа в мышцах установлены не были. В содержимом толстого отдела кишечника на протяжении эксперимента препарат обнаружен не был. Это свидетельствует о том, что изученные ферропрепараты не выводятся через желудочно-кишечный тракт. С третьего по шестой часы небольшое количество железа (от 4 до 19 мкг/г) было обнаружено в почках. Таблица 2. Из общего количества железа 23,8% его было обнаружено в крови, около 13,2 % в печени и 28% в костном мозге. Мышцы содержали максимальное количество железа – примерно 32,5%, почки – минимальное – 2,5%.

Такое распределение железа характерно для устойчивых комплексов. Использование протеина повысило стабильность железосодержащего комплекса in vivo и улучшило показатели фармакодинамики препарата. В отличие от железо-сорбитолового комплекса, утилизирующегося до 60% печенью, значительная часть железа из изученных препаратов (до 84% для ферро-квина) обнаружена в костном мозге, крови и мышцах.

При интраперитонеальном введении ферро-квина в крови содержание железа увеличилось до максимальных значений (67 мкг железа на г) сразу после введения препарата. В течение суток было стабильно высоким (до 44-62 мкг железа на г). К третьему дню незначительно уменьшилось, а к пятому дню железо уже не обнаруживалось.

В печени железо было обнаружено в течении часа после введения препарата (до 8 мкг железа на г), к третьему часу эксперимента существенно увеличилось (до 27 мкг железа на г) и оставалось на высоком уровне ещё три часа. К двенадцатому часу наметилось снижение его количества (до 20 мкг железа на г), а к двадцать четвертому содержание железа в печени было приблизительно вдвое меньше максимального уровня отмеченного к шестому часу. В печени железа содержалось примерно в три раза меньше чем в крови, что свидетельствует об активной абсорбции железа другими тканями (в частности кроветворными), в значительной мере минуя печень. Стабильно высокий, сопоставимый с кровью, уровень экзогенного железа на протяжении исследования с первого часа и до пяти суток после внутрибрюшинного введения препарата был обнаружен в костном мозге. Максимум концентрации обнаружен к третьему часу эксперимента, когда содержание было стабильно высоким на уровне 56-71 мкг/г. Распределение железа, введенного внутрибрюшинно: 43,6% его было обнаружено в крови, около 14 % в печени и 34,3% в костном мозге. Почки содержали около 7% железа.

При подкожном введении ферропрапатов содержание железа в крови увеличилось к третьему часу, достигло максимума к двенадцатому и оставалось на высоком уровне в течении суток, к третьему дню уменьшилось вдвое, к пятому было минимальным и к седьмому уже не обнаруживалось. В печени концентрация железа была примерно вдвое ниже чем в крови, что свидетельствует о его абсорбции другими тканями, в частности органами кроветворения. Стабильно высокий уровень экзогенного железа на протяжении исследования с первого часа и до пяти суток после подкожного введения препарата был обнаружен в костном мозге. Максимум концентрации этого металла в костном мозге обнаружен на первые – третьи сутки эксперимента, когда его содержание было стабильно высоким на уровне 56 – 52 мкг железа на г ткани. Соотношение подкожно введенного железа: 44,2% его было обнаружено в крови, около 17% в печени и 34% в костном мозге. Мышцы и почки содержали минимальное количество железа – примерно 5%.

При внутреннем применении ферроквина, бажедина, био-железа и биомоса в содержимом толстого отдела кишечника установлено наибольшее количество экзогенного железа через один час после начала опыта (96-109 мкг железа на г ткани). На протяжении трех суток этот показатель уменьшился почти в двадцать раз до минимального значения 5-12 мкг железа на г ткани. С шестого по двенадцатый часы опыта небольшие количества железа (3-12 мкг железа на г ткани) обнаруживались в мышцах и до трех суток в почках. Содержание железа достигло максимума в крови и печени к двадцать четвертому часу эксперимента до 40 и 37 мкг железа на г для ферроквина и бажедина, соответственно. Стабильно высокий уровень экзогенного железа на протяжении исследования с первого часа и до пяти суток после перорального введения биожелеза обнаружен в костном мозге (от 65 до 68 мкг железа на г ткани). Суммируя данные внутреннего применения ферропрепаратов выявляем, что 79,9 % железа было в крови и костном мозге, около 18% в печени и почках. Мышцы абсорбировали до 2 % железа.

Остаточные количества ферропрепаратов по данным проведенных опытов по внутреннему и инъекционному применению изучаемых препаратов через 3 суток после их введения (при 5-ти дневном курсе применения) определяются во всех исследуемых органах и биологических жидкостях. На 7 сутки после введения препаратов экзогенное железо отсутствует во всех органах, тканях и жидкостях организма подопытных животных.

По данным изучения фармакокинетики и фармакодинамики ферропрепаратов при различных способах введения, в наибольшей концентрации они содержатся в крови и костном мозге, элиминируются преимущественно в печени. Препараты быстро всасываются и включаются в метаболизм, в связи с чем в период после 72 часов после их введения экзогенное железо в свободном виде в организме практически не присутствует.

Влияние ферропрепаратов на качество мясопродуктов проводили на кроликах с массой тела 2,7-3,0 кг и поросятах в возрасте 60 – 70 дней. В результате ветеринарно-санитарной экспертизы мясопродуктов, полученных от животных убитых по истечении 7 дней после внутреннего и 14 дней после инъекционного применения препаратов железа, установлено отсутствие отрицательного влияния ферротерапии на качество продуктов животного происхождения.

3.4. ПРИМЕНЕНИЕ ФЕРРОПРЕПАРАТОВ В ВЕТЕРИНАРИИ

Профилактическую эффективность парентерального применения ферропрепаратов при алиментарной железодефицитной анемии изучили в опытах на поросятах в возрасте 1 – 60 дней. У подопытных поросят уровень гемоглобина повышался до 15 дня жизни, в группе ферро-квина до 92,5 г/л, феранимала до 115,3, ферроглюкина до 98,5 г/л. У животных контрольной группы напротив, к пятидневному возрасту уровень гемоглобина возрастал, а к 15-ти дневному возрасту снижался до 78,8 г/л. С этим согласуется и увеличение количества эритроцитов, как относительно фоновых показателей, так и отрицательного контроля. Более высокие значения в 30 дневном возрасте установили в группах ферроглюкина и феранимала, количество эритроцитов составило 5,60±0,69 и 5,45±0,70 млн/мл. Цветовой показатель повышался к 15 дневному возрасту, в последующем был у подопытных животных около единицы, у отрицательного контроля до 0,73±0,11. Таблица 3.

К тридцатидневному возрасту гематологические показатели у поросят выровнялись, однако у подопытных животных из группы ферро-квина, уровень гемоглобина был несколько ниже относительно групп феранимала и ферроглюкина, но существенно выше чем в группе отрицательного контроля. Относительно высокий уровень гемоглобина и содержание эритроцитов у поросят из контрольной группы, связан, прежде всего, с обезвоживанием организма животных по причине заболеваемости диспепсией, что также подтверждает низкий цветовой показатель крови, повышенное содержание лейкоцитов и данные клинического исследования животных.

В период с 30 дней до 2-х месячного возраста, динамика роста количества гемоглобина и эритроцитов у подопытных животных сохранялась, наиболее высокие показатели в группе ферро-квина. Наиболее существенные изменения в количественном и качественном составе лейкоцитов крови, наблюдали в группе, где применяли ферро-квин, что объясняется наличием в нем белка. Данные характеризовались абсолютным и относительным снижением количества лейкоцитов (лимфоцитов) по сравнению с фоном в 5 дневном возрасте и увеличением их количества (в пределах физиологических значений) на всем протяжение эксперимента. Начиная с 30-го дня жизни, у подопытных животных, четко прослеживалась тенденция снижения содержания гранулоцитов и увеличения агранулоцитов, показатели белой крови имели одинаковую тенденцию, как в опытных, так и в контрольных группах. В контрольной группе повышенное количество лейкоцитов, связанное с заболеваемостью животных.

Таблица 3 Влияние железосодержащих препаратов на состав крови поросят

группы	день жизни	Эритроциты, 1012/л	Гемоглобин, г/л	Цветовой показатель	Железо, мкмоль/л
фон (2-й день жизни)	2-й	3,56±0,45	83,6±6,1	0,95±0,15	14,2±1,29
Ферро-квин	5	3,63±0,30	86,4±2,3	1,08±0,10	17,7±4,16
15	3,70±0,29	92,5±1,9*	1,14±0,11	19,3±3,09
30	4,09±0,48	94,0±3,3*	1,13±0,08	26,9±1,65*
60	4,22±0,18	106,0±3,5	1,25±0,09	34,5±1,68
Феранимал	5	3,93±0,71	89,3±5,1	1,03±0,17	30,9±8,34
15	4,14±0,65	115,3±17,2	1,30±0,16	18,3±5,72
30	5,45±0,70	97,3±4,6*	1,08±0,07	33,0±5,13
60	5,48±0,76	96,0±15,1	1,07±0,05	28,5±1,41*
Ферроглюкин	5	3,78±0,30	88,7±2,3*	1,08±0,09	16,1±1,83
15	3,86±0,52	98,5±12,7	1,16±0,10	18,7±0,05
30	5,60±0,69	97,0±2,1	1,01±0,03	28,5±6,78
60	4,97±0,55	89,3±12,2	0,89±0,06	32,9±1,51
Седимин	5	3,99±0,28	83,8±1,4	0,90±0,12	16,0±1,83
15	4,75±0,31	96,6±10,6	1,01±0,11	18,1±0,91*
30	5,08±0,22	99,0±2,2*	1,03±0,08	18,5±3,48
60	5,06±0,43	103,8±6,2	1,02±0,10	32,9±3,42
контроль (без прим. препаратов)	5	4,18±0,40	87,3±2,3	1,04±0,26	8,0±2,11
15	4,06±0,93	78,8±20,7	0,90±0,21	5,3±0,54
30	4,47±0,24	81,3±8,3	0,88±0,08	14,1±3,82
60	5,30±0,39	89,7±7,1	0,73±0,11	21,0±1,50

*- Р<0,05 , (n=60).