Фармакология и применение препаратов железа в ветеринарии и животноводстве (стр. 1 )

На правах рукописи

ТРОШИН АНДРЕЙ НИКОЛАЕВИЧ

ФАРМАКОЛОГИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ

ПРЕПАРАТОВ ЖЕЛЕЗА

В ВЕТЕРИНАРИИ И ЖИВОТНОВОДСТВЕ

06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

Краснодар 2013

Работа выполнена в Государственном научном учреждении Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук.

Научный консультант: ,

доктор ветеринарных наук, профессор,

член-корреспондент РАСХН

Официальные оппоненты:

, доктор ветеринарных наук, профессор ФГБОУ ВПО Донской госагроуниверситет

, доктор биологических наук, профессор ФГБОУ ВПО Ставропольский госагроуниверситет

, доктор ветеринарных наук, профессор, ФГБОУ ВПО Московская государственная академия ветеринарной медицины им.

Ведущая организация: ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», г. Казань.

Защита состоится 29 августа 2013 года в 1000 на заседании диссертационного совета Д 220.038.07 при ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» по адресу: 350044 3

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке при ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» (350044 3).

Автореферат размещен на официальном сайте ФГБОУ ВПО «Кубанский ГАУ» - http://***** и сайте ВАК РФ – http://*****

Автореферат разослан « » 2013 года

Ученый секретарь

диссертационного совета

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы исследования. Современное аграрное производство, основанное на искусственных условиях воспроизводства и содержания, создает предпосылки возникновения и массового проявления нарушений обмена веществ у животных. Анемический синдром часто наблюдается у беременных, кормящих, молодых, быстрорастущих животных, они задерживаются в росте и развитии, не полностью реализуют потенциал продуктивности (, и др. 1978; , 1982; и др.; 1995; , 1997; , 2001 и др.).

Степень разработанности темы исследования. Изучение гипо и гиперферриемии в этиологии и патогенезе способствовало значительному прогрессу в профилактике и лечении анемии и сопутствующих ей болезней животных (J. P. McGowan, A. Chrichton, 1924; Venn, 1947; , 1983; , 1998; , 2007; , 2013).

Неорганические соли железа (чаще всего используют сульфат II) в качестве энтеральных форм эффективны (Pierre Blaud, 1832; Hart E. B., 1929), но их применение сопровождается нарушением пищеварения и низкой усвояемостью, в том числе и подобных ионных препаратов, включая органические глюконат, лактат и другие.

Полисахаридные комплексы гидроксида железа (III) для инъекций (Binger, 1958, и др., 1974, и др., 2001), применяемые в режиме высоких доз, приводят к перманентной гиперферриемии, как следствие угнетению иммунитета, активизации условно-патогенных микроорганизмов, в сумме с местной воспалительной реакции вплоть до канцерогенеза в месте инъекции. (Oppenheimer S. и др., 1986, 2001, 2002, и др., 2004; , , 2013).

Аминокислотные хелаты железа гидролизуются и соответственно включаются в метаболизм медленнее других соединений, но не высвобождают свободных ионов железа (A. K. Egeli, T. Framstad, 1998, 1998).

Ферроаквакомплексы, стабилизированные протеинами, вызывают существенно меньшее раздражение желудочно-кишечного тракта, а вот использование их жидких лекарственных форм (в том числе для инъекций) ограничено недостаточными растворимостью и стабильностью (Brady, 1978, Pagella P. G. и др., 1984, и др., 2004).

В последние годы ассортимент ферропрепаратов пополнился значительным количеством отечественных и зарубежных дженериков лекарственных средств и кормовых добавок, использование которых требует дополнительного фармакотоксикологического изучения и определения терапевтической эквивалентности.

Таким образом, проблема анемии требует продолжения изучения, разработки и изучения фармакологических свойств и показаний к применению новых ферропрепаратов, достижения их биосовместимости с млекопитающими.

Цели и задачи исследований. Целью настоящего исследования является научное и практическое обоснование разработки комплексных органических и хелатных препаратов железа, изучить их свойства и влияние на организм некоторых животных. В соответствии с поставленной целью определены задачи:

- разработать железосодержащие лекарственные средства ферро-квин, биожелезо, бажедин, биомос на основе декстана и декстрина железа;

- изучить физико-химические показатели препаратов железа;

- изучить фармако-токсикологические, биологические свойства железодекстрановых и железодекстриновых препаратов на лабораторных животных;

- провести сравнительную оценку влияния ферро-квина, био-железа, бажедина, биомоса, феранимала, седимина на концентрацию железа в тканях, обмен веществ лабораторных животных;

- изучить применение железосодержащих препаратов при анемии животных и сопутствующих болезнях;

- разработать нормативную документацию по получению, применению и контролю качества на препараты железа.

Научная новизна. Впервые разработаны и экспериментально изучены ферропрепараты, представляющие собой железо(III)-декстриновые комплексы: ферро-квин (субстанция), ферро-квин для инъекций и ферро-квин сироп; комплексные препараты седимин и био-железо, а так же биомос и бажедин.

Впервые установлена терапевтическая эквивалентность трехвалентных форм ферропрепаратов, а так же смешанных двух и трехвалентных, на основе природного сырья для профилактики и лечения железодефицитной анемии у животных.

В работе представлены три патента на изобретения - № 000 «Лекарственное средство для лечения анемий», № 234985 «Способ обогащения подкормки для пчел» и № 000 «Железосодержащее средство для профилактики и лечения анемии у животных».

Научно обоснованы и экспериментально подтверждены принципы получения новых железосодержащих лекарственных средств, их антианемическое действие и биологическая активность.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Разработанные ферропрепараты обладают выраженным фармакологическим действием, положительно влияют на эритро и гемопоэз. При применении в комплексной терапии незаразных болезней животных способствуют повышению основных иммунобиологических показателей, сокращению сроков выздоровления и повышению продуктивности животных.

На основании результатов исследований разработаны технические условия и технологические инструкции на препараты ферро-квин (СТО ), биомос (ТУ 0), бажедин (ТУ ). Инструкции на препараты ферро-квин (инструкция от 01.01.2001), биомос (отг), бажедин (наставление №13-5-2/458 от 01.01.2001, регистрационный номер 000322 – ОП), а так же показания к применению препаратов биожелезо, феранимал и седимин.

Создание препарата ферро-квин является приоритетным региональным инвестиционным проектом в номинации инновационные проекты Краснодарского края по итогам международного экономического форума Сочи-2005.

Положения, выносимые на защиту:

- получение и физико-химические свойства железосодержащих препаратов, нормативная документация на препараты;

- результаты изучения токсичности и фармакологических свойств разработанных препаратов;

- профилактическая и терапевтическая эффективность ферро-квина, бажедина, биомоса, биожелеза, феранимала, седимина при железодефицитной анемии и некоторых незаразных болезнях животных.

Степень достоверности и апробация результатов. Статистическая обработка экспериментальных данных проведена на компьютере программой Microsoft Excel, включала в себя расчеты средних арифметических значений, коэффициента вариации и достоверности различия сравниваемых показателей с использованием критерия Стьюдента.

Результаты экспериментальных и клинических исследований представлены на: заседаниях Ученого Совета и научных конференциях факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВПО Кубанский ГАУ (Краснодар, гг.) и ГНУ Краснодарского НИВИ Россельхозакадемии (2008 – 2013 гг.); на конкурсе Русских инноваций журнала Эксперт (Москва, 2005); международных экономических форумах: Сочи-2005, «Дни Краснодарского края в Германии», (Мюнхен, 2006); «Дни Краснодарского края в Австрии», (Вена, 2007); промышленной ярмарке Ганновермессе, (Ганновер, 2005); международных научно-практических конференциях: Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях, посвященной 60-летию ГНУ Краснодарского НИВИ (2006); «Новости научной мысли» (Днепропетровск, 2006); «Фундаментальные и прикладные исследования высшей школы» (Сингапур, 2007); Аграрная наука   сельскому хозяйству (Барнаул, 2007); «Актуальные вопросы ветеринарной медицины, биологии и животноводства» (Троицк, 2007); «Агропромышленный комплекс: состояние, проблемы, перспективы» (Пенза, 2007); Всероссийской научно - практической конференции «Актуальные проблемы функциональной и морфофункциональной диагностики болезней животных» (Новочеркасск, 2007); XV международном Московском ветеринарном конгрессе (Москва, 2007); «Разработка и внедрение в производство лекарственного средства для профилактики железодефицитной анемии» в 2006 году отмечены серебряной медалью выставки «Золотая осень» на ВВЦ, г. Москва, Дипломом международной выставки изобретений IENA 2007.

Публикации. Основные научные результаты, включенные в диссертацию, опубликованы в 44 печатных работах, в том числе 3 патентах на изобретение и 17 статьях в ведущих рецензируемых научных журналах.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 302 страницах, включает: введение - актуальность темы исследования, степень её разработанности, цели и задачи, научную новизну, теоретическую и практическую значимость работы, материалы и методы исследований, положения выносимые на защиту, степень достоверности и апробацию результатов; результаты собственных исследований, их обсуждение; заключение - выводы, предложения, список литературы, а так же приложения. Диссертационная работа содержит 95 таблиц. Список литературы включает 516 источников, в т. ч. 279 иностранных.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнялась в лаборатории фармакологии ГНУ Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института Россельхозакадемии в соответствии с планом научно-исследовательских работ по заданию 08.04.04 «Разработать новые высокоэффективные средства профилактики и терапии массовых нарушений обмена веществ и других незаразных заболеваний сельскохозяйственных животных» рег. номер 15070..06.8. Исследования включали результаты работ по госконтакту № 000 р/4899 от 17.06.04 в при поддержке Фонда содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере совместно с к. вет. н. и к. б.н. , которым автор выражает свою признательность.

Препараты ферро-квин, бажедин и биомос изготовлены в НПВП «Ветфарм», г. Тимашевск Краснодарского края и на кафедре терапии и фармакологии Кубанского ГАУ, г. Краснодар. Препараты седимин, феранимал и био-железо – фирмой А-Био, г. Москва.

Доклиническое и клиническое изучение проведено в соответствии с требованиями соответствующих «Руководства по экспериментальному изучению новых фармакологических веществ» и «Руководства по проведению клинических исследований новых лекарственных средств». Использовали здоровых половозрелых животных, прошедших 14-дневный карантин. Содержание экспериментальных животных соответствовало Санитарным правилам по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев). Животные получали стандартную диету в соответствии с действующими нормами. Наряду с подопытными животными содержались контрольные животные. ( с соавт., 2005). Методы исследований включали известные биохимические, клинические, токсикологические, фармакологические, морфологические, иммунологические, статистические и другие.

В экспериментальной части работы использовали 248 мышей, 298 крыс, 40 кроликов, 1425 свиней, 1236 крупного рогатого скота.

Токсичность, с учетом специфики лекарственных средств и кормовых добавок для животных, а так же выявления возможных побочных свойств, неблагоприятного действия и отдаленных последствий изучали в соответствии с «Методическими указаниями по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве», утвержденными ГУВ СССР (1991), а так же «Методическими рекомендациями по токсико-экологической оценке лекарственных средств, применяемых в ветеринарии», РАСХН (1998) и «Научно-методологическими аспектами исследования токсических свойств фармакологических лекарственных средств для животных» (, , 2008).

Острую токсичность изучали с использованием грызунов, определяли переносимые, токсические и летальные дозы методом Кербера. За животными в течении 2 недель вели непрерывное наблюдение, учитывали общее состояние, исследовали гематологические показатели, регистрировали сроки интоксикации, гибели и их непосредственные проявления в органах и тканях.

Изучение подострой токсичности ферро-квина проводили при пероральном, подкожном, внутримышечном и внутрибрюшинном введении препаратов. Использовали терапевтическую дозу, и дозы эквивалентные соответственно 3-х кратной и 5-ти кратной терапевтической. Препараты для инъекций вводили внутрибрюшинно в дозе составляющей 1/50, 1/20 и 1/10 от дозы LD50.

Изучение хронической токсичности ферропрепаратов проводили на грызунах и продуктивных животных, на которых получен фармакологический эффект. При внутрибрюшинном введении в дозе составляющей 1/10 от дозы LD50. При введении препарата перорально, подкожно и внутримышечно использовали дозу эквивалентную 10-ти кратной терапевтической.

Эмбриотоксические и тератогенные свойства изучали по методике и др. (1977), раннюю и позднюю резорбцию, общую эмбриональную смертность, выживаемость по формулам, предложенным и (1977). Аномалии скелета выявляли по методу Даусона (1984). Критериями оценки эмбрионального эффекта служили показатели гибели зародышей на пред - и постимплантационных стадиях развития, а тератогенного эффекта - наличие аномалий развития внутренних органов и скелета, уровень плодовитости, масса зародышей. Препараты вводили в дозе 5 инъекционно и 10 мл/кг массы перорально на 5 и 10 дни беременности подопытных животных, в периоды имплантации и органогенеза, соответственно.

Раздражающее и кожно-резорбтивное действие препаратов изучали на крысах и кроликах методом накожных аппликаций, а так же внутрикожных инъекций и пробирочным методом.

Иммунотоксичность исследовали по фагоцитарной активности макрофагов, активности лизосомальных мембранных ферментов, влияния препаратов на систему комплемента и на реакцию гиперчувствительности замедленного типа. Фагоцитарную активность макрофагов оценивали по изменению процента фагоцитоза за ½ часа, его индексу за 1 и 5 часов, а так же индексу завершенности фагоцитоза. Постановку реакции НСТ-теста проводили стандартным общепринятым методом. Оценку степени влияния ферро-квина на систему комплемента производили с помощью гемолитического метода титрования сывороточного комплемента.

Влияние ферропрепаратов на РГЗТ. При постановке реакции, сенсибилизацию мышей осуществляли подкожным введением животным эритроцитов барана в дозе 1х107 клеток. На 5 сутки после сенсибилизации животные получали разрешающую дозу – 1х108 ЭБ в 0,05 мл физиологического раствора в подушечку задней лапы. В контрольную лапу вводили физиологический раствор в том же объеме. Местную воспалительную реакцию оценивали через 24 часа по разнице массы опытной и контрольной лап. Для каждой мыши вычисляли индекс реакции. Соответствующие лекарственные формы ферропрепаратов вводили орально и внутримышечно в десятикратной терапевтической дозе - 10 мл/кг массы тела. В первой группе животных препараты вводили за 1 час до сенсибилизации, во второй – за 1 час до разрешающей дозы и в третьей группе за 1 час до сенсибилизации и за 1 час до разрешающей дозы.

Мутагенную активность определяли методом учета доминантных летальных мутаций в зародышевых клетках мышей.

Канцерогенность оценивали методом метафазного анализа аберраций (изменения структуры) хромосом в клетках костного мозга млекопитающих.

Фармакокинетику и остаточные количества изучали по содержанию железа в тканях и биологических жидкостях фотометрическим методом.

Ветеринарно-санитарную экспертизу продукции животноводства на фоне ферротерапии проводили по соответствующему руководству.

Фармацевтический анализ проводили по ГФ РФ (VIII – XII изданий ) и рекомендациям ВГНКИ, резорбцию препаратов из места инъекции определяли по изданию фармакопеи Великобритании 2001 года.

Клиническая оценка фармакологических свойств включала внутреннее и парентеральное применение лекарственных форм разработанных ферропрепаратов с целью профилактики и лечения железодефицитной анемии у животных с учетом заболеваемости и падежа, сохранности животных, их продуктивности, воспроизводительных показателей и качества животноводческой продукции.

В опытах регистрировали данные клинических и лабораторных исследований. Учитывали показатели белкового, углеводного, липидного, макро и микроэлементного обмена.

Группы животных комплектовали по принципу аналогов, с учетом породы, пола, массы, возраста, условий содержания и кормления. Предварительные опыты проводились в условиях клиники факультета ветеринарной медицины, а производственные испытания в условиях учхоза Кубань и на животноводческих объектах аграрных предприятий Краснодарского края.

Профилактическую эффективность ферропрепаратов при железодефицитной анемии изучали на поросятах, которым в опыте в 3-х дневном возрасте, вводили феранимал или ферро-квин в дозе 1,0 мл, седимин 2 мл, а в контроле – препараты аналоги - урсоферран и ферроглюкин в дозе 1,5 мл, в отрицаленьном контроле стерильный физиологический раствор в той же дозе, однократно, внутримышечно в область бедра.

До опыта, в 21 и 60 дневном возрасте поросят взвешивали, в 2-х, 5, 15, 30 и 60 дневном возрасте брали кровь для гематологических и биохимических исследований; определяли содержание гемоглобина, подсчитывали количество эритроцитов, лейкоцитов, цветовой показатель крови, СОЭ и лейкоформулу. В сыворотке крови определяли содержание общего белка, глюкозы, железа, ферменты печени.

Терапевтическую эффективность ферропрепаратов изучали на больных железодефицитной анемией, которым в 10-х дневном возрасте, внутрь давали ферро-квин и препарат-аналог - биожелезо, животным третьей группы применяли перорально сульфат железа, животные четвертой группы ферропрепараратов не получали.

Профилактическую эффективность ферро-квина при анемии у супоросных и лактирующих свиней определяли в опыте на свиноматках за месяц до и в течении месяца после опороса. В опыте животным давали ежедневно внутрь препараты железа в форме ферро-квина или сульфата железа, животные третьей группы дополнительных ферропрепаратов не получали.

При гипотрофии поросят препараты применяли в трехнедельном возрасте, внутрь с кормом, учитывали основные показатели крови и обмена веществ, сохранность и сроки восстановления биологических показателей общепринятыми методами.

Влияние ферропрепаратов на обмен веществ, здоровье и продуктивность телят и коров изучали при одно (двух кратном за 30 и 15 дней до отела) инъекционном применении седимина, ферро-квина или ежедневном за 30 дней до отела внутреннем биожелеза и бажедина коровам.

3. ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

3.1. ПОЛУЧЕНИЕ И ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ФЕРРОПРЕПАРАТОВ

Для разработки препаратов использовали действующие и вспомогательные вещества, соответствующие требованиям технологической документации; изготавливали лекарственные средства и кормовые добавки в лабораторных и производственных условиях по фармакопейным методам, изложенным в соответствующих общих и частных статьях.

Физико-химические свойства разработанных ферропрепаратов изучали с учетом их компонентов, а так же лекарственной формы, по фармакопейным методам и НД Департамента ветеринарии – «ветеринарные препараты, показатели качества и безопасности». Сформулировали основные показатели для ферропрепаратов: низкая токсичность, нейтральность, стойкость в широком диапазоне рН, иметь лиганд с высокой степенью сродства к железу, который, должен быстро биологически утилизироваться в обмене веществ.

В качестве научной концепции получения стабильных in vitro и in vivo средств предложена трехкомпонентная модель ферропрепаратов. Схематично формулу железо(III)-декстрино-протеинатов, в виде ферроаквакомплексов, можно выразить как Fe(H2O)63+ * RO * RP, где RO – первичный органический комплексообразователь, например декстрин, а RP – защитный хелатор, например белок или в виде Fe3+ * RO * RP. Аналогично для двухвалентного железа по формуле Fe2+ * RO * RP.

Таблица 1 - Физико-химическая характеристика препаратов

№	Наименование	Валентность железа	Количество железа, %	Лекарственная форма
1	Ферро-квин	3+	1-48	Порошок
2	Бажедин	2+ , 3+	1-7	Порошок
3	Биомос	2+ , 3+	0,05-1	Паста
4	Феранимал	3+	7,5	Раствор
5	Седимин	3+	2	Раствор
6	Био-железо	3+	5	Раствор

Для реализации гипотезы, руководствуясь составленной нами классификацией ферропрепаратов, изготовили протеиновые формы трехвалентных ферропрепаратов, в частности декстрана и декстрина. В качестве протеина использовали нативные, частично или полностью гидролизованные белки животного или растительного происхождения, такие как альбумин, казеин, коллаген и т. д.

По итогам скрининга из числа синтезированных для дальнейших исследований был отобран комплекс трехвалентного железа с декстрином и частично гидролизованным коллагеном, ферро-квин.

Соединение представлено в водорастворимой форме, обеспечивающей получение 1-15%-ного раствора при комнатной температуре и нейтральном значении рН среды. Ферро-квин может быть обезвожен, а впоследствии растворен в воде. Лекарственные формы представлены в виде 7,5% препарата для инъекций, 1% сиропа для внутреннего применения, а так же субстанции, содержащей до 48% трехвалентного железа.

Комплекс трехвалентного хлорида железа конденсированный экстрактом дуба натурального происхождения – биомос, а так же модифицированный с растительными добавками бентонит – товарное название бажедин. Кроме того, в исследованиях использовали препараты феранимал, седимин и биожелезо, фирмы А-Био, г. Москва. Физико-химические характеристики полученных препаратов представлены в таблице 1.

3.2. ТОКСИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

Ферроквин представляет собой новую субстанцию и изготовленные на её основе лекарственные формы, а препараты бажедин, био-железо, биомос, седимин, феранимал, а так же препараты контроля – урсоферран, ферроглюкин являются лекарственными формами на основе известных лекарственных веществ (хлорида, декстрана и декстрина железа), в связи с чем токсикологические исследования ферроквина проведены в полоном объеме, а остальных, воспроизведенных препаратов, в сокращенном объеме.

Острую токсичность изучали отдельно для внутренних форм при пероральном применении, для инъекционных – при внутримышечном, подкожном и внутрибрюшинном. В первой серии опытов при пероральном способе введения препаратов ферроквин, бажедин, биомос и биожелезо в дозах 0,1-0,2 (мышам) и 1,0-4,0 (крысам) не обнаружено какого-либо токсического действия. С увеличением дозы ферроквина для мышей до 0,3 , для крыс до 5 г на животное при внутреннем применении в течение 3-4 часов отмечались первичные клинические признаки интоксикации, гибели животных не наблюдалось в течение всего периода наблюдения. Первичное клиническое проявление токсического действия препарата проявлялось единичными тетаническими судорогами слабой степени, угнетением, снижением двигательной активности. Умеренная степень интоксикации, проявляемая соответственно для крыс в дозе 30 мл/кг массы тела и для мышей в дозе 20 мл/кг массы тела характеризовалась мышечным тетанусом, который через 40-60 мин сменялся общим угнетением. Выраженная клиника интоксикации наблюдалась у мышей в дозе 30 мл/кг. Множественные спастические сокращения мышц, непрекращающийся тетанус в течение 2-3 часов, спазм желудка, напряжение брюшной стенки, в дальнейшем угнетение. Общее угнетение и снижение двигательной активности у животных в ответ на введение сохранялось в течение 72 часов. У крыс признаки интоксикации отсутствовали при внутреннем введении ферроквина в дозе до 1875 мг железа на кг. Клиника отравления установлена при однократной даче 6 мл препарата на крысу.

Во второй серии опытов изучили острую токсичность инъекционных препаратов ферроквина, феранимала и седимина при внутримышечном и подкожном введении. Установлено, что однократная инъекция в максимально допустимых дозах не вызывает гибели животных, клиническая картина отравления слабо выражена. Применение препаратов в дозах до 1125 и 1875 мг железа на кг соответственно, не проявлялось клиникой интоксикации. Подкожное введение ферроквина в дозе до 2625 мг железа на кг не отражалось отрицательно на состоянии крыс. У мышей отмечены признаки первичной интоксикации при инъекции железа в дозе 2250 мг на кг массы тела.

Патоморфологическое изучение по окончании эксперимента не выявило нарушений в структурной организации внутренних органов.

Препараты по степени токсичности согласно ГОСТ 12.1.007-76 относится к IV классу опасности – малоопасные вещества.

В третьей серии токсикометрической оценки ферро-квин, вводили внутрибрюшинно в объеме для белых мышей до 1,0 мл, для белых крыс до 6,0 мл; установили среднелетальную дозу, составившую LD50 для крыс 17,67 мл/кг=1325 мг железа на кг и LD50 для мышей 15,5 мл/кг = 1162 мг железа на кг массы. Для белых мышей МПД 12,0 мл/кг, LD,0 мл/кг. Для белых крыс МПД - 13,0 мл/кг, LD,0 мл/кг.

Клинические признаки острого отравления ферро-квином у лабораторных животных при внутрибрюшинном введении препарата сходны с предыдущими опытами. Патолого-анатомическая картина вскрытия павших животных показала гиперемию тонкого и толстого отдела кишечника, мелкие одиночные кровоизлияния на брыжейке. Смерть наступала в результате остановки сердца. Желудочки сердца и предсердия наполнены несвернувшейся кровью, в грудной полости – геморрагический экссудат.

Учитывая результаты изучения острой токсичности и результаты определения МПД ферро-квина, установлена тест-доза на безвредность – 0,10 мл (внутрибрюшинно) на мышь массой грамм.

Изучение подострой токсичности ферро-квина и бажедина при пероральном, феранимала и седимина при подкожном, внутримышечном, внутрибрюшинном введении в течение 10 дней в терапевтической дозе, и дозах эквивалентных соответственно 3-х кратной и 5-ти кратной терапевтической, а так же при внутрибрюшинном введении в дозе составляющей 1/50, 1/20 и 1/10 от дозы LD50 показалоодениииже е 10 дней. составляетрм и препаратов на основе ферро-квина, что многократное введение этих препаратов не вызывает существенных изменений в состоянии животных: поведение, груминг, аппетит, частота дыхания у животных опытных групп не отличались от контроля.

Хроническую токсичность изучали при пероральном, подкожном, внутримышечном, внутрибрюшинном введении препаратов ферроквин, феранимал, седимин, бажедин, био-железо и биомос в течение 14 дней. В результате изучения полиорганной недостаточности установлено, что коэффициенты массы внутренних органов крыс (моргана/ мкрысы х 1000), существенно не отличались от контроля. При исследовании крови опытных животных не отмечено достоверных изменений в морфологическом составе крови и биохимических показателях. Установлено, что при длительном внутрибрюшинном введении ферроквина снижается количество эритроцитов и гемоглобина на 5-7% и увеличивается билирубин на 15-18%. Длительное применение сопровождаются также на 8-10% активируются аминотрансферазы, повышаются на 5-10% концентрации креатинина и мочевины в крови, что говорит о напряженном функционировании печени и выделительной системы, однако все вышеуказанные изменения не превышают показатели физиологической нормы. Это согласуется с данными изучения хронической токсичности сахарозного комплекса железа индуцировавшего при внутривенном введении повышение в плазме крови уровня щелочной фосфатазы и аланин - аминотрансферазы, а также повышение концентрации белка в моче у животных, получавших высокие дозы препарата.

Ввиду отсутствия смертности животных в опытных группах рассчитать коэффициент кумуляции не представляется возможным.

В хроническом опыте в лечебно-профилактических дозах изученные препараты железа не оказывают токсического эффекта, существенно не влияют на органную структуру, на белковый, липидный и углеводный обмены веществ.