Разработка неинъекционных лекарственных форм препарата тимодепрессин (стр. 3 )

Таблица 4

Результаты определения показателей качества таблеток с тимодепрессином*

Серия	Средняя масса, г	Отклонения в массе отдельных таблеток	Количественное содержание TD в таблетке, мг	Содержание посторонних примесей, %	Однородность дозирования	Растворение (% за 45 мин.)	Распадаемость (мин.)	Прочность на истирание, %
110804	0,232	3 %	0,924	0,834	6 %	94	15	97,2
120804	0,231	6 %	0,930	1,277	7 %	95	15	97,1
130804	0,234	6 %	0,934	2,634	6 %	94	16	97,1
310804	0,255	2 %	1,025	1,975	3 %	98	15	99,4
320804	0,251	4 %	1,004	0,711	5 %	97	15	98,6
330804	0,247	4 %	0,998	2,833	4 %	99	14	98,8
410804	0,254	3 %	1,019	2,455	5 %	95	14	98,7
420804	0,242	2 %	0,973	0,867	7 %	96	13	98,5
430804	0,260	4 %	1,049	2,661	6 %	96	14	98,0
510804	0,244	2 %	0,979	2,286	3 %	97	13	97,8
520804	0,241	4 %	0,964	2,330	3 %	98	14	97,5
530804	0,246	5 %	0,998	1,758	5 %	95	13	99,2
810804	0,259	4 %	1,030	0,462	4 %	99	14	98,1
820804	0,250	3 %	1,001	2,198	3 %	98	14	98,5
830804	0,243	4 %	0,979	2,242	4 %	98	13	98,8

*Примечание. Первая цифра серии образца указывает номер исследуемого состава

В результате анализа всех образцов было установлено, что вспомогательные компоненты во всех составах не дают побочных пиков на хроматограмме и не влияют на время удерживания тимодепрессина, которое составляет 8,0 ± 0,5 мин; таблетки на основе гранулированной лактозы и с наполнителем лудипресс обладают лучшими физико-химическими показателями по сравнению с таблетками на основе крахмала. Таким образом, использование фарматозы DCL11,14, и 15, а также лудипресса в качестве наполнителя для прямого прессования (без увлажнения гранулята) является наиболее предпочтительным по сравнению с использованием крахмала.

Изучение стабильности таблеток тимодепрессина.

Образцы таблеток составов 3,4,5 и 8 хранили в термостате при tэ=24 ± 0,5°C в течение 184 сут. Расчетный срок годности при этом согласно инструкции составил 2 года при 4 ± 2°С. Периодичность контроля показателей качества составила 46 суток, что соответствовало 6 мес. хранения. В ходе эксперимента контролировались следующие показатели качества: средняя масса, отклонения в массе отдельных таблеток, количественное содержание тимодепрессина и посторонних примесей, однородность дозирования, растворение, распадаемость, прочность на истирание а также микробиологическая чистота. Таблетки всех составов хранили в пластиковых флаконах из полиэтилена высокого давления (Gerresheimer Boleslawiec S. A.). Результаты эксперимента представлены на рис. 2 и 3.

Полученные данные свидетельствуют, что таблетки на основе наполнителей: кукурузного крахмала, фарматозы ® DCL11,14, и 15, а также лудипресса выдержали испытание по ускоренному хранению, показав одинаково хорошую стабильность.

Следует отметить также линейный характер накопления примесей и уменьшения содержания тимодепрессина, а также высокую корреляцию между этими процессами (для состава 3 коэффициент корреляции равен -0,9708). Как и в спрее, эти данные свидетельствуют об адекватности метода ускоренного хранения.

Учитывая данные изучения показателей качества таблеток и результаты изучения стабильности наполнители Фарматозы ® DCL11, и 15, а также Лудипресс могут быть рекомендованы для производства таблеток с тимодепрессином, возможный срок годности которых может составлять не менее 2-х лет.

Суппозитории с тимодепрессином.

Целесообразность разработки ректальных лекарственных форм тимодепрессина продиктована необходимостью локализации всасывания его в прямой кишке, с целью предотвращения контакта с кишечными пептидазами, которые присутствуют в основном в двенадцатиперстной, тонкой и толстой кишке.

Для изучения технологических свойств суппозиториев, а также влияния физико-механических свойств (пластичности и др.) основы на стабильность и время растворения суппозиториев с тимодепрессином, были изготовлены суппозитории на основе полиэтиленоксидов с различными молекулярными массами (состав 1).

Состав 1 (г). Тимодепрессин 0,001 ПЭО1500 0,948 ПЭО 400 0,237 Общая масса суппозитория 1,186

При изготовлении суппозиториев этого состава тимодепрессин растворяли в минимальном количестве воды. В ходе дальнейшего изучения составов, вода была заменена на ДМСО, в котором легко растворяется тимодепрессин. Кроме этого ДМСО в суппозиториях может быть использован в качестве консерванта и фармакологически активного компонента.

Суппозитории составов 1,2,3,4,6,7 были изготовлены на производственной площадке биотехнологической компании «Биокад». Розлив, фасовка суппозиториев осуществлялся на машине SARONG, Италия.

Состав 2 (г). Тимодепрессин 0,001 ДМСО 0,090 ПЭО1500 1,559 Общая масса суппозитория 1,650		Состав 3 (г). Тимодепрессин 0,001 ДМСО 0,090 ПЭО1500 1,403 ПЭО 400 0,156 Общая масса суппозитория 1,650
Состав 4 (г). Тимодепрессин 0,001 ДМСО 0,090 ПЭО1500 1,247 ПЭО 400 0,312 Общая масса суппозитория 1,650		Состав 5 (г). Тимодепрессин 0,001 Масло какао 1,449 Общая масса суппозитория 1,450
Состав 6 (г). Тимодепрессин 0,001 Твин 80 0,0015 Тв. жир А 1,4475 Общая масса суппозитория 1,450		Состав 7 (г). Тимодепрессин 0,001 ДМСО 0,090 Твин 80 0,0015 Тв. жир А 1,359 Общая масса суппозитория 1,450

Для изготовления суппозиториев на гидрофобной основе, были использованы масло какао и твердый жир тип А.

Поскольку явление полиморфизма масла какао исключает возможность расплавнение основы, суппозитории данного типа были изготовлены методом прессования (состав 5). Введение тимодепрессина (состав 6), предварительно растворенного в минимальном количестве воды, в твердый жир осуществлялась по типу эмульсии. Для стабилизации расплава был использован твин 80.

Для предотвращения контакта с водой, как и в случае с ПЭО основой было предложено использовать ДМСО, который образует эмульсию с основой. Для стабилизации расплава был использован Твин 80 (состав 7). Суппозитории на основе твердого жира составов 6 и 7 изготавливались методом выливания в формы.

Полученные суппозитории были проанализированы по показателям: время растворении, температура плавления, количественное содержание тимодепрессина и содержание посторонних примесей.

В табл. 5 приведены результатов анализа полученных суппозиториев по некоторым показателям качества.

Таблица 5

Оценка качества суппозиториев с тимодепрессином.

№ состава	Средняя масса	Время растворения. мин.	Температура плавления °C	Содержание TD мг
1	1,189	25	—	1,081
2	1,64	27	—	1,037
3	1,65	25	—	1,023
4	1,63	21	—	0,994
5	1,43	—	34	1,076
6	1,43	—	36	0,992
7	1,44	—	35	1,057

Количественное определение суппозиториев проводили методом ВЭЖХ.

На рис. 4 представлена хроматограмма суппозитория с тимодепрессином из ПЭО1500:ПЭО400 (4:1). ПЭО различной молекулярной массы в условиях анализа дают побочный пик на 7,5 ± 0,5 мин, площадью менее 2% от площади всех пиков. На хроматограмме суппозиториев состава 2 (рис.5) ДМСО выходит со свободным объемом (5 мин).

Наличие компонентов основ в пробах суппозиториев с маслом какао не влияет на время удерживания тимодепрессина, которое составляет 8,0 ± 0,5 мин.

На хроматограмме (рис. 6) суппозиториев с тимодепрессином состава 5 видны 2 побочных пика. Первый выходит со свободным объемом (≈5 мин), второй на 7,0 ± 0,5 мин. Разрешение второго пика с пиком тимодепрессина R=1,2. Таким образом, можно заключить, что компоненты масла какао не мешают количественному определению тимодепрессина в данных суппозиториях, а сумма площадей пиков компонентов основы не превышает 35% от суммы всех детектируемых пиков.

На хроматограмме суппозиториев на основе твердого жира присутствует (рис. 7) пик на 6,0±0,5 мин, площадью не более 5 %. Пик, характеризующий ДМСО выходит со свободным объемом.

Рис. 2. Хроматограмма таблеток с TD состава 3, до закладки на хранение	Рис. 3. Хроматограмма таблеток с TD состава 3, эквивалентная хранению 2 года при температуре 4 ± 2°С	Рис. 4. Хроматограмма суппозиториев с TD состава1
Рис. 5. Хроматограмма суппозиториев с TD состава 2	Рис. 6. Хроматограмма суппозиториев с TD состава 5	Рис. 7 Хроматограмма суппозиториев с TD состава 7

Изучение стабильности суппозиториев тимодепрессина.

Образцы суппозиториев хранили в термостате при tэ=24 ± 0,5°C в течение 184 сут. Расчетный срок годности при этом согласно инструкции составил 2 года при +2-+6°C. Периодичность контроля показателей качества составила 46 суток, что соответствовало 6 мес. хранения. В ходе эксперимента контролировались следующие показатели качества: средняя масса и отклонения от нее, качественный и количественный состав, время растворения и температура плавления, микробиологическая чистота и внешний вид суппозиториев. Суппозитории составов 1,2,3,4,6 и 7 хранили в упаковках из алюминиевой фольги, суппозитории состава 5 в упаковке из парафинированной бумаги (рис. 8, 9).

Рис. 8. Хроматограмма суппозиториев с TD состава 7 эквивалентная хранению 2 года при температуре 4 ± 2°С	Рис. 9. Хроматограмма суппозиториев с TD состава 3 эквивалентная хранению 6 мес. при при температуре 4 ± 2°С

Как следует из полученных данных, тимодепрессин в суппозиториях на основе ПЭО почти на 80 % разрушается к 70-м суткам с начала хранения. Подтверждением этого является увеличение пика, выходящего с мертвым объемом. Данное увеличение площади пика вызвано триптофаном или продуктами его деструкции, которые не удерживаются в используемой хроматографической системе. Глютаминовая кислота не дает выраженного пика, т. к. обладает незначительным поглощением по сравнению с триптофаном. Подтверждением вышесказанного является тот факт, что после 70-го дня хранения в образце суппозиториев роста площади пика, выходящего с мертвым объемом не значителен. В то же время, с увеличением длительности хранения на хроматограмме появляются множественные пики с различными (от 8,30 до 20 мин.) временами удерживания.

Суппозитории на гидрофобных основах выдержали испытание по ускоренному хранению. Содержание тимодепрессина и состав побочных продуктов практически не изменились за время эксперимента, что свидетельствует о стабильности данной лекарственной формы.

В ходе эксперимента было установлено, что жировые основы: масло какао и твердый жир тип А, наиболее оптимально подходит для изготовления суппозиториев с тимодепрессином, так как обеспечивает сохранность субстанции в течение как минимум 2-х лет. Однако, учитывая, что с технологической точки зрения метод прессования является более сложным, суппозитории на твердом жире изготовленные методом выливания в формы предпочтительны для промышленного производства.

Общие выводы.

1.  Разработаны составы и технология изготовления неинъекционных лекарственных форм тимодепрессина: спрей, таблетки и суппозитории.

2.  Проведен скрининг вспомогательных веществ исследуемых лекарственных форм и научно обоснован выбор вспомогательных веществ наиболее оптимальных с точки зрения технологии производства и стабильности тимодепрессина в различных лекарственных формах.

3.  Проведено комплексное изучение и определены физико-химические и структурно-механические свойства разработанных лекарственных форм тимодепрессина. Определены показатели качества спрея, таблеток и суппозиториев с тимодепрессином.

4.  Разработаны и апробированы методики анализа подлинности и количественного содержания тимодепрессина в различных лекарственных формах. Изучены и подобраны условия хроматографического определения тимодепрессина в прессованных таблетках, спрее, суппозиториях, грануляте.

5.  Разработаны и апробированы методики анализа подлинности и количественного содержания вспомогательных веществ, используемых при изготовлении исследуемых лекарственных форм.

6.  Изучена стабильность спрея, таблеток и суппозиториев с тимодепрессином, на основании чего предложены условия и сроки их хранения.

7.  Разработан проект фармакопейной статьи на спрей тимодепрессина 0,5% и 0,25% концентрации. Составлены таблицы стабильности.

По теме диссертации опубликованы следующие работы:

1. , , Дейгин новых лекарственных форм препарата тимодепрессин // Тезисы докладов XI Российского национального конгресса «Человек и лекарство». - МоскваС. 866.

2. , , Дейгин методик анализа тимодепрессина в лекарственных формах сложного состава // Тезисы докладов XI Российского национального конгресса «Человек и лекарство». - МоскваС. 866.

3. , , Дейгин стабильности тимодепрессина в новых интраназальных лекарственных формах // Тезисы докладов XII Российского национального конгресса «Человек и лекарство». - МоскваС. 748.

4. , Краснюк состава суппозиториев с тимодепрессином и изучение их стабильности // Тезисы докладов Пятой международной научно-практической конференции «Здоровье и Образование в XXI веке». - МоскваС. 104.

5. , , И Разработка методик анализа тимодепрессина в новых лекарственных формах сложного состава.// Тезисы докладов Пятой международной научно-практической конференции «Здоровье и Образование в XXI веке». - МоскваС. 144.

6. , , И Разработка новой лекарственной формы препарата тимодепрессин: «Раствор для интраназального применения в форме спрея»// Разработка и исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. – Пятигорск. -2005. - С. 203.

7. , , Гудков тимодепрессина при органической склеродермии у детей // Клиническая дерматология и венерология. - М.: 2006; 4: С.81

8. , , ВЭЖХ анализ лекарственных форм препарата тимодепрессин // Фармация. – 2007. - №2. – С.5-7.

Список сокращений.

TD - тимодепрессин

NaКМЦ – натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы

ВМС – высокомолекулярное соединение

ВЭЖХ – высокоэффективная жидкостная хроматография

ДМСО - диметилсульфоксид

ПЭО - полиэтиленоксид