Разработка неинъекционных лекарственных форм препарата тимодепрессин (стр. 1 )

На правах рукописи

Разработка неинъекционных лекарственных форм препарата тимодепрессин

15.00.01. - Технология лекарств и организация фармацевтического дела.

автореферат

диссертации на соискание учёной степени

кандидата фармацевтических наук

Москва - 2008

Работа выполнена в ГОУ ВПО Московская медицинская академия

имени

Научный руководитель:

доктор фармацевтических наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор фармацевтических наук, профессор кандидат фармацевтических наук

Ведущая организация: Г У Российский Онкологический Научный Центр имени РАМН

Защита состоится: « » 2008 г. в 14-00 часов на заседании Диссертационного совета Д 208.040.09 при ГОУ ВПО Московская медицинская академия имени ( Москва, Никитский бульвар, 13)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московской медицинской академии имени ( г. Москва, Нахимовский пр. д. 49)

Автореферат разослан «____»___________2008 г.

Ученый секретарь

Диссертационного 208.040.09,

доктор фармацевтических наук,

профессор Наталья Петровна Садчикова

Актуальность темы.

На сегодняшний день известен целый ряд лекарственных средств, относящихся к препаратам пептидной природы. Подавляющее число этих препаратов - это органопрепараты, источниками которых являются железы убойного скота (гонадотропин, инсулин, кортикотропин, тималин и пр.).

Однако, в последнее десятилетние на мировой фармацевтический рынок в массовом порядке выходят лекарственные средства, содержащие в качестве активных субстанций продукты биотехнологии и пептидного синтеза. Широкое использование большинства подобных препаратов ограничивается не только их высокой стоимостью, но и отсутствием для многих из них удобных для длительного применения вне стационара лекарственных форм. На отечественном фармацевтическом рынке находят отражение общемировые тенденции.

Предложенный в работе комплексный подход к решению задачи создания неинъекционных лекарственных форм оригинального иммуносупрессора тимодепрессина – ответ на потребность рынка в удобных лекарственных формах для данного препарата. Разработка спрея с тимодепрессином – частное решение задачи создания неинъекционной формы препарата, пригодной для использования как при стационарном, так и при амбулаторном лечении.

Впервые синтезированный в 1995 году, тимодепрессин (гамма-D-глутамил-D-триптофан) обладает выраженным иммуносупрессорным действием при минимальном для препаратов, подавляющих иммунный ответ, наборе противопоказаний и практически полном отсутствии побочных эффектов в терапевтическом интервале доз. В настоящее время тимодепрессин выпускается в ампулах по 1 мл 0,1% раствора для внутримышечного введения и во флаконах по 5 мл 0,1% раствора для интраназального введения. Показания к применению тимодепрессина включают в себя системные заболевания, имеющие хроническое течение (псориаз и др). Длительное использование инъекционных препаратов связано не только с явлениями дискомфорта, но и сопряжено с потенциальной опасностью инфицирования пациента в процессе инъекции. Для иммуносупрессоров риск инфицирования пациента критичен, т. к. применение препаратов данной группы само по себе повышает опасность развития инфекционных процессов у пациентов. Неинъекционные лекарственные формы тимодепрессина разрабатывались с учетом набора показаний к его применению и наличия схем, подразумевающих значительные колебания доз препарата в процессе лечения. Кроме того, в некоторых случаях, появляется возможность замены инъекций на энтеральные формы на ранних стадиях лечения.

Всё вышеизложенное определило цель и задачи настоящего исследования.

Цель исследования.

Целью данного исследования являлась разработка научно-обоснованных составов и технологии получения эффективных и стабильных неинъекционных лекарственных форм тимодепрессина с последующим созданием нормативных документов, регламентирующих их качество.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

Задачи исследования.

1.  Разработка составов и технологии новых, неинъекционных лекарственных форм препарата тимодепрессина.

2.  Проведение комплексного изучения и определения физико-химических и структурно-механических свойств разработанных лекарственных форм.

3.  Проведение биофармацевтических исследований с целью выбора оптимальной композиции.

4.  Изучение стабильности исследуемых лекарственных форм тимодепрессина, с целью определения условий и сроков хранения.

5.  Разработка и апробация методик анализа подлинности и количественного содержания тимодепрессина в различных лекарственных формах.

6.  Разработка методик анализа подлинности и количественного содержания вспомогательных веществ, используемых при изготовлении исследуемых форм.

7.  Внедрение полученных результатов в виде отдельных методик анализа, нормативных документов (регламентов, проектов ФСП) на исследуемые лекарственные формы.

Научная новизна.

1.  Впервые предложены энтеральные неинъекционные лекарственные формы: таблетки и суппозитории, содержащие лабильное лекарственное средство пептидной природы тимодепрессин.

2.  Изучены технологические аспекты получения указанных лекарственных форм, их стабильность при хранении. Сформулированы требования к показателям качества.

3.  Разработан состав спрея, содержащего тимодепрессин.

4.  Предложена технология его получения, получены данные по биологической активности и стабильности, разработан проект НД.

Практическая значимость.

Полученные результаты легли в основу фармакопейной статьи (ФС) на раствор для интраназального применения в форме спрея.

Осуществлен комплексный методологический подход, к созданию и изучению современных неинъекционных лекарственных форм; созданы удобные в применении и стабильные лекарственные формы, разработаны и унифицированы методики анализа при контроле их качества.

Внедрение в практику.

Разработанная ФСП на тимодепрессин спрей назальный дозированный утверждена ФГУ "Научный Центр Экспертизы средств медицинского применения". Препарат вводится в медицинскую практику.

Апробация работы.

Результаты исследований доложены на научно-практической конференции кафедры технологии лекарственных форм фармацевтического факультета ММА им. (1 июня 2006 года); на конкурсе совместных научно-исследовательских работ преподавателей и обучаемых в ММА в номинации "Фармация" в рамках российского медицинского форума 2007.

Публикации по работе.

По результатам проведённых исследований опубликовано 8 печатных работ.

Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, четырех глав экспериментальных исследований, общих выводов, списка использованной литературы и приложений. Содержит 127 страниц машинописного текста, 26 таблиц, 21 рисунок и 5 фотографических снимков. Библиографический указатель включает 130 источников литературы, из которых 23 на иностранных языках. Приложение содержит проект ФСП на тимодепрессин спрей назальный дозированный, пояснительную записку и отчет об исследованиях стабильности препарата в процессе хранения.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с комплексной научной темой ГОУ ВПО Московская медицинская академия имени Росздрава "Разработка современных технологий подготовки специалистов с высшим медицинским и фармацевтическим образованием на основе достижений медико-биологических исследований" (номер Государственной регистрации 01.2.).

Положения, выносимые на защиту.

1.   Результаты комплексных исследований по разработке составов и технологий для спрея назального дозированного, таблеток и суппозиториев препарата тимодепрессин и их научному обоснованию.

2.   Разработанные показатели качества и методики контроля предложенных лекарственных форм.

3.   Результаты изучения стабильности при хранении спрея назального дозированного, таблеток и суппозиториев тимодепрессина.

Содержание работы.

Объекты и методы исследования.

Для исследований были использованы серии субстанций тимодепрессина (, , RA, R0 и A008-209) по показателям качества соответствующие ФСП .

Для разработки составов неинъекционных лекарственных форм с тимодепрессином и изучения их свойств были использованы вспомогательные вещества, разрешенные к медицинскому применению и отвечающие требованиям действующих нормативных документов. Вспомогательные вещества, использованные при разработке составов спреев: нипагин (ФС ), нипазол (ТУ 5), бензалкония хлорид раствор 50% (USP/NF, Ph.,Eur., BP), натрия ацетат (BP, Ph, Eur.), кислота борная (ФС ), спирт поливиниловый (ГОСТ ), NaКМЦ (ТУ ). Вспомогательные вещества, использованные при разработке составов таблеток: лактоза (USP/NF, BP), pharmatose® DCL 11, 14, 15, 21, 22 (USP/NF, Ph.,Eur.,JP), крахмал (ГОСТ Р 51985–2002), ludipress® (USP/NF, Ph.,Eur.), колликут MAE 100P (USP/NF, Ph.,Eur.). Вспомогательные вещества, использованные при разработке составов суппозиториев: ПЭО 1500 и 400 (ТУ с изм. 1), масло какао (ГФ Х), твердый жир типа (ФС ), ДМСО (ФС ), твин 80 (Ph Eur., ФС ).

Для достижения поставленной цели и решения задач использовали различные физические, физико-химические методы анализа. Определение посторонних примесей и количественного содержания тимодепрессина проводили методом обращённо-фазовой ВЭЖХ. В качестве хроматографической использовалась система “System Gold” Beckman Instruments Inc. U. S. c УФ детектором "Kratos Spectroflow 783", настроенным на длину волны 220 нм. Обработка данных - System Gold 5 (Beckman). Разделение проводилось на колонке с обращенной фазой Supelco LCx4.6. Фиксированный объём петлевого устройства ввода составлял 20 мкл. Содержание посторонних примесей в препарате, в процентах, оценивается по методу внутренней нормализации площадей как среднее из полученных хроматограмм испытуемого раствора. Методика количественного определения основана на использовании стандартных образцов.

Количественное и качественное определение тимодепрессина и консервантов (нипагина, нипазола или бензалкония хлорида) в назальном спрее, проводили методом ВЖХ. Методики определения тимодепрессина и бензалкония хлорида в составе спрея включены в проект ФСП.

Испытание на микробиологическую чистоту растворов спреев проводилось по ГФ XI, вып. 2, с. 193 изменение № 3.

При определении показателей качества таблеток, таких как растворение, распадаемость и прочность на истирание, были использованы методики ГФ XI.

Оценку качества суппозиториев по показателям: однородность массы, температуру плавления и время растворения для суппозиториев были использованы соответствующие методики ГФ XI.

Оценку стабильности разработанных лекарственных форм проводили согласно временной инструкции по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре (И).

Статистическую обработку результатов исследования и корреляционного анализа проводили с помощью пакета прикладных программ для персонального компьютера Statistica 6 и программ пакета Microsoft Office XP - Excel согласно ФС: «Статистическая обработка результатов химического эксперимента и биологических испытаний» (ГФ XI).

Разработка спрея с тимодепрессином.

Актуальность выпуска спрея тимодепрессина продиктована необходимостью применения поддерживающей терапии при лечении хронических аутоиммунных процессов.

В результате предварительно проведенных работ было получено несколько композиций, пригодных для использования в качестве спрея. Концентрация тимодепрессина в спрее (0,25%) была рассчитана с учетом объема дозы, выходящей из насоса-дозатора при однократном нажатии (100 мкл) и режима дозирования при поддерживающей терапии.

Для поддержания необходимой микробиологической чистоты в процессе хранения и  дальнейшего использования после первого вскрытия, были предложены следующие консерванты: бензалкония хлорид, смесь нипазола и нипагина (составы: 1, 2, 3).

Состав 1. Тимодепрессин 2,5 г Натрия хлорид 9,0 г Вода очищенная до 1000 мл		Состав 2. Тимодепрессин 2,5 г Бензалкония хлорид 0,1г Натрия хлорид 9,0 г Вода очищенная до 1000 мл
Состав 3. Тимодепрессин 2,5г Нипагин и нипазол 1,0 г Натрия хлорид 9,0 г Вода очищенная до 1000 мл		Состав 4. Тимодепрессин 2,5 г Бензалкония хлорид 0,1г Буферного раствора до pH 6,5 Натрия хлорид 9,0 г Вода очищенная до 1000 мл
Состав 5. Тимодепрессин 2,5 г Нипагин и нипазол 1,0 г Буферноый раствор до pH 6,5 Натрия хлорид 9,0 г Вода очищенная до 1000 мл		Состав 6. Тимодепрессин 2,5 г Бензалкония хлорид 0,1г NaКМЦ 10,0 г Натрия хлорид 9,0 г Буферный раствор до pH 6,5 Вода очищенная до 1000 мл
Состав 7. Тимодепрессин 2,5 г Бензалкония хлорид 0,1г Поливиниловый спирта 15,0 г Натрия хлорид 9,0 г Буферный раствор до pH 6,5 Вода очищенная до 1000 мл		Состав буферного раствора (pH=6,5) Раствора натрия ацетата 2% 3 мл Раствор борной кислоты 1% 7 мл

Поскольку для стабильности тимодепрессина существенное значение имеет показатель pH, то для стабилизации спрея было предложено использовать буферный раствор на основе натрия ацетата и борной кислоты, который готовили отдельно. pH контролировали потенциометрически. Специфика применения спрея при поддерживающей терапии требует пролонгации действия препарата. С этой целью были применены NaКМЦ и поливиниловый спирт (составы: 4, 5,6,7).

Образцы всех составов были проанализированы по следующим показателям: подлинность, посторонние примеси, количественное определение, однородность массы дозы, процент выхода содержимого упаковки, количество доз в упаковке.

В результате анализа всех образцов было установлено, что вспомогательные компоненты в составах спреев не дают побочных пиков на хроматограмме и не влияют на время удерживания тимодепрессина, которое составляет 8,0 ±0,5 мин. (табл. 1)

Результаты анализа образцов спрея по тесту «Однородность массы дозы» и «Процент выхода содержимого упаковки» свидетельствуют о том, что дозирующее устройство флаконов не обеспечивает требуемую однородность массы дозы, для составов, содержащих метилцеллюлозу и поливиниловый спирт. Выход содержимого упаковки этих составов составляет менее 80 %. Кроме того, использование ВМС в составе спреев при анализе методом ВЭЖХ, приводит к негативным воздействиям на хроматографическую систему и увеличивает износ колонки.

Таблица 1

ВЭЖХ анализ спреев с тимодепрессином

№ состава	серия	Время выхода пика TD	Площадь пика (мкВ x сек)	Содержание посторонних примесей %	Метрологичес­кие характеристики
		мин.	Тимодепрессин	Сумма всех пиков		(P=95%, n=3)
1	11904	8,17	122,9102	123,4527	0,439	=0,41 S=0,0729
12904	7,67	120,8758	121,4458	0,469	Sx=0,0421
13904	8,11	124,2512	124,6636	0,331	±Dx=±0,18 e=43,84
2	21904	7,52	120,8035	121,1163	0,258	=0,24 S=0,0256
22904	7,93	122,6966	122,9549	0,210	Sx=0,0148
23904	8,38	121,6954	121,9994	0,249	±Dx=±0,06 e=26,59
3	31904	8,48	121,9310	123,9031	1,592	=1,64 S=0,0464
32904	8,23	124,4322	126,5579	1,680	Sx=0,0268
33904	7,61	120,7664	122,8066	1,661	±Dx=±0,12 e=7,01
4	41904	8,37	120,3670	122,1443	1,455	=1,49 S=0,0331
42904	8,43	124,5587	126,4374	1,486	Sx=0,0191
43904	7,95	120,7579	122,6233	1,521	±Dx=±0,08 e=5,53
5	51904	7,88	120,4789	122,5415	1,683	=1,77 S=0,0850
52904	7,94	123,2922	125,6181	1,852	Sx=0,0491
53904	7,80	123,0312	125,2714	1,788	±Dx=±0,21 e=11,90
6	61904	7,69	124,2771	127,0766	2,203	=2,21 S=0,0216
62904	8,10	123,7673	126,6015	2,239	Sx=0,0125
63904	7,83	124,5205	127,3211	2,200	±Dx=±0,05 e=2,42
7	71904	8,38	123,2920	125,9657	2,123	`x=2,08 S=0,0494
72904	8,44	120,8274	123,4075	2,091	Sx=0,0285
73904	7,75	121,2800	123,7875	2,026	±Dx=±0,12 e=5,90

Изучение стабильности спрея тимодепрессина.