Фармакологические свойства и токсикологическая характеристика комплексного растительного препарата “Селекартен” (стр. 4 )

Таблица 12. Исследование вирулицидной активности СК (контакт препарата с внеклеточным, а затем инфицирование клеток).

Препарат	Разведение	Степень ингибирования, log10 ТЦД50
		15-минутный контакт
	1:200	0
	1:400	0
СК	1:800	0
	1:1600	0
	1:3200	0
		60-минутный контакт
	1:200	5,0
СК	1:400	1,0
	1:800	1,0
		24-часовой контакт
	1:200	7,0
СК	1:400	7,0
	1:800	7,0

4. Токсикологические исследования.

4.1. Изучение токсичности СК при однократном введении лабораторным животным.

При доклиническом токсикологическом изучении установлено, что при однократном внутримышечном введении мышам линии BALB/c и крысам Wistar селекартен является малотоксичным препаратом. Показатели ЛД50 СК при разведении 1:5 физиологическим раствором составляют 51-66 мл/кг.

При этом не выявлено существенных видовых и половых различий в чувствительности указанных видов животных к токсическому действию препарата.

4.2. Изучение токсичности СК в условиях 3-месячного хронического эксперимента на крысах.

При изучении токсичности СК при 3-месячном хроническом эксперименте, установлено, что ежедневное внутримышечное введение СК крысам Wistar в дозах 0,07 и 0,21 мл/кг (10- и 30-кратные высшие суточные терапевтические дозы, рекомендуемые для человека) в разведении 1:10 стерильным физиологическим раствором не влияет на общее состояние и поведение крыс, а также на гематологические и биохимические показатели. Полученные данные свидетельствуют о хорошей переносимости СК и об отсутствии его повреждающего действия (по данным биохимических тестов) на функциональное состояние важнейших органов и систем организма подопытных животных при длительном внутримышечном введении СК в испытанных дозах 0,07 и 0,21 мл/кг.

Длительное введение СК в дозах 0,07 и 0,21 мл/кг в разведении 1:10 физиологическим раствором в условиях 3-месячного хронического эксперимента в мышцы бедра животных не оказывало местно-раздражающего действия. При макро - и микроскопическом исследованиях внутренних органов и тканей крыс, получавших препарат в испытанных дозах 0,07 и 0,21 мл/кг, не выявлено токсических повреждений.

4.3. Исследование токсичности СК в условиях 1-месячного хронического эксперимента на собаках.

При изучении токсичности СК при 1-месячном хроническом эксперименте, установлено, что внутримышечное введение собакам СК ежедневно в дозе 0,07 мл/кг (10-кратная высшая суточная доза для человека) в разведении 1:10 стерильным физиологическим раствором не влияло на общее состояние и поведение животных, не изменяло функционального состояния важнейших органов и систем организма животных. Длительное введение СК в дозе 0,07 мл/кг в разведении 1:10 в мышцы бедра животных не оказывало местно-раздражающего действия. При макро - и микроскопическом исследованиях внутренних органов и тканей подопытных животных не выявлено изменений, связанных с токсическим действием препарата.

4.4. Изучение мутагенности СК.

При исследовании мутагенности СК устаановлено, что при изучении мутагенности СК на микроорганизмах в тесте Эймса препарат в испытанных концентрациях 0,1-1000 мкг/чашку и его метаболиты, образовавшиеся под влиянием микросомальной фракции S9, не обладают мутагенным действием.

Изучение влияния СК на индукцию доминантных летальных мутаций в зародышевых клетках мышей показало, что уровень постимлантационных потерь животных, подвергавшихся воздействию препарата, однократно, внутримышечно, в дозе 0,7 мл/кг, равной 100-кратной высшей суточной терапевтической для человека (0,007 мл/кг), не превышает показателей у контрольных животных.

Исследование цитогенетической активности СК методом учета хромосомных аберраций в клетках костного мозга мышей показало, что статистически достоверных различий в уровне хромосомных аберраций в клетках костного мозга мышей, подвергавшихся воздействию препарата в испытанных дозах, по сравнению с контролем не установлено. По примененному тесту учета хромосомных аберраций в клетках костного мозга млекопитающих СК не обладает мутагенной активностью.

При изучении влияния СК на систему репарации ДНК в SOS-хромотесте установлено, что препарат ни в одной из исследованных концентраций в диапазоне от 0,01 до 5 мг/мл не вызывал активацию репарации ДНК у E. coli PQ37, то есть не обладает ДНК-повреждающим действием. СК не обладает мутагенным действием, а также не является потенциальным канцерогеном.

4.5. Исследование эмбриотоксических и тератогенных свойств СК.

При внутримышечном введении беременным крысам СК (в разведении физиологическим раствором 1:5) в дозе 0,21 мл/кг (30-кратная высшая суточная доза для человека) с 1 по 19 день гестации наблюдалось достоверное по сравнению с контролем замедление прибавки массы тела, уменьшение количество живых плодов, мест имплантации, желтых тел и массы тела эмбрионов, увеличение показателей предимплатационной гибели, задержка оссификации скелета плодов и уменьшение количества родившихся крысят. В связи с этим беременность следует считать противопоказанием для назначения препарата.

4.6. Изучение влияния СК на репродуктивную функцию крыс.

Внутримышечное введение СК в дозе 0,21 мл/кг в разведении 1:10 физиологическим раствором, что составило 30-ти кратную максимальную суточную терапевтическую дозу, рекомендованную для человека, не влияло на половую активность животных и на репродуктивные показатели, а также на постнатальное развитие крысят. Не выявлено влияния СК в исследуемой дозе на репродуктивную функцию здоровых половозрелых крыс.

4.7. Исследование аллергизирующих свойств СК.

Исследование анафилактогенной активности СК показало, что препарат в испытанных дозах при внутримышечном введении морским свинкам не вызывает анафилактического шока.

Как показали результаты проведенных исследований, реакция гиперчувствительности замедленного типа в испытанных дозах СК у морских свинок была отрицательна.

При оценке влияния СК на массу и клеточность подколенных лимфоузлов мышей установлено, что препарат не обладает аллергизирующими свойствами.

Полученные данные при исследовании иммунотропного действия селекартена на гуморальный и клеточный иммунитет свидетельствуют о иммуностимулирующем действии препарата и об отсутствии у него иммунотоксичности.

ВЫВОДЫ

1. Комплексный растительный препарат селекартен обладает иммуномодулирующими свойствами, в диапазоне испытанных доз 10-100 мкг/кг стимулирует гуморальный и клеточный иммунитет, повышает фагоцитарную активность, пролиферацию лимфоцитов и продукцию ФНО-α мононуклеарными клетками человека.

2. В экспериментах in vitro селекартен в разведениях 1:5-1:20 ингибирует рост Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter calcoaceticus.

При профилактическом введении в дозе 1 мкг/кг за 24 часа до заражения мышей летальной дозой Staphylococcus pyogenes селекартен повышает выживаемость животных до 75 % при 84 % гибели в контроле.

3. Селекартен при различных схемах введения (до, во время и после заражения клеточных культур) проявляет выраженную противовирусную активность в отношении патогенных для человека и животных вирусов: гриппа А и В, вирусов птиц A/H5, вирус простого герпеса-1 (включая его чувствительный и резистентный к ацикловиру штаммы), вирусы гепатита С и иммунодефицита человека.

4. В опытах in vitro эффективные цитотоксические концентрации и разведения селекартена зависят от вида вируса и составляют 80-120 мкг/мл для вирусов гриппа А и В, 1:800-1:1024 для вируса простого герпеса-1, 1:50-1:100 для вируса гепатита С и 1:200-1:800 для вируса иммунодефицита человека-1. В испытанных в дозах 1,6, 16,6 и 33 мкг/кг селекартен при вирусной пневмонии увеличивает выживаемость мышей до 60-100 % при 100% гибели в контроле.

5. Селекартен является малотоксичным препаратом при однократном парентеральном введении лабораторным животным и хорошо переносится при длительном внутримышечном введении крысам Wistar (3 месяца) и собакам (1 месяц), не оказывает повреждающего действия на основные органы и системы организма подопытных животных и не проявляет местнораздражающего действия.

Селекартен не обладает мутагенностью и ДНК-повреждающим действием, не является потенциальным канцерогеном. В испытанных дозах и схемах введения препарат не проявляет аллергизирующих и иммунотоксических свойств.

При назначении беременным крысам селекартен обладает эмбриотоксичностью, в связи с чем беременность является противопоказанием к назначению препарата.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Результаты проведенных экспериментальных исследований комплексного растительного препарата селекартен, показавшие его выраженное иммуностимулирующее действие на гуморальный и клеточный иммунитет, антимикробные и противовирусные эффекты на ряд возбудителей заболеваний человека и животных, свидетельствуют о важности и целесообразности проведения клинических испытаний препарата при некоторых бактериальных и вирусных инфекциях, а также для коррекции патологических нарушений в системе иммунитета.

2. Полученные данные свидетельствуют о перспективности применения использованного подхода для создания новых эффективных комплексных растительных препаратов на основе фармакопейных растений с добавлением биологически активных компонентов растительной или другой природы.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. , , В. Медикаментозная терапия сосудистых заболеваний глаза. (Монография).// – М.: Книжный дом «ЛИБРОКОМ», 2009. – 200 с.

2. , , Харченко иммуномодулирующего действия селекартена.// Российский биотерапевтический журнал. – 2012. – Т. 11, № 1. – с. 53-59.

3. В. Фармакологическая активность комплексного растительного препарата селекартен. (Монография).// – М.: «ЛЕНАНД», 2012. – 258 с.

4. , , Дудина препарат. (Патент РФ на изобретение).// – 27.02.2007. – № 000.

5. , , , Кисилева влияния селекартена на вирус иммунодефицита человека.// Сборник материалов XIX Российского национального конгресса «Человек и лекарство». – Москва, 2012 – с. 544.

6. , , , Никонова селекартена на гуморальный и клеточный иммунитет у мышей.// Сборник материалов XIX Российского национального конгресса «Человек и лекарство». – Москва, 2012. – с. 553.

7. , , Андронова действия селекартена на вирус герпеса простого.// Сборник материалов XIX Российского национального конгресса «Человек и лекарство». – Москва, 2012. – с. 554.

8. , Дерябин противовирусной активности селекартена в отношении вируса гепатита С.// Сборник материалов XIX Российского национального конгресса «Человек и лекарство». – Москва, 2012. – с. 554.

9. Хорошилова-, , Иванов действие селекартена на Pseudomonas Aeruginosa.// Сборник материалов XIX Российского национального конгресса «Человек и лекарство». – Москва, 2012. – с. 594.

10. , , , Шевченко активность селекартена на модели гриппозной пневмонии мышей.// Сборник материалов XIX Российского национального конгресса «Человек и лекарство». – Москва, 2012. – с. 603.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АОК	антителобразующие клетки
МДСК	перевиваемые клетки почки спаниеля
МНК	мононуклеарные клетки
ТЦД50	50 %-тканевая цитопатическая доза
ЦПД	цитопатическое действие
ЦПЭ	цитопатический эффект

Подписано в печать 14.01.2013 г. Заказ № 000 Тираж 100 шт. Отпечатано в типографии «АллА-принт» г. Москва, Лубянский пр-д., д. 21, стр. 5 www. *****