Воспроизводимость метода кулонометрического титрования несколько лучше методов, рекомендуемых НД. Сравнивая рассчитанные значения критерия Стьюдента с табличным при Р=99% и f=8 (tрассч < tтабл =3,50), очевидно, что различие между средними также статистически незначимо. Метод кулонометрического титрования не содержит систематической ошибки.
Полученные результаты позволили предложить методики количественного определения арбидола в таблетках по 0,05 г и капсулах по 0,1 г, индапамида по 0,0025 г и каптоприла по 0,025 г в таблетках. Установлено, что вспомогательные компоненты таблеточной массы и содержимого капсул не мешают определению действующего вещества. Найденные значения входят в норму допустимых отклонений.
3. Кулонометрическое титрование гипобромит-ионами
Гипобромит-ионы получали при генерации брома из 0,1 М раствора KBr в фосфатном буферном растворе (рН 8,8). Эффективность кулонометрического титрования проверяли по стандарт-титру «Натрий серноватистокислый 5-водный С (Na2S2O3∙5H2O) = 0,1 моль/дм3 (0,1 н.)», которая составила 99,9±0,2%.
НД рекомендует для количественного определения изониазида титриметрические методы, а для фурацилина − обратную йодиметрию и спектрофотометрию. При спектрофотометрическом определении для приготовления раствора фурацилина НД рекомендует растворять его в диметилформамиде. Это летучий токсичный растворитель, и при фотометрировании его растворов возможно незначительное изменение концентрации, которое, однако, может влиять на результаты анализа. Следует отметить, что в титриметрии точность методов обратного титрования ниже точности методов прямого титрования, к тому же при обратной йодиметрии возможны потери йода из-за его летучести при выдерживании раствора 1-2 минуты и добавлении соответствующих реактивов.
Установлено, что изониазид и фурацилин окисляются гипобромит-ионами быстро и количественно в стехиометрическом соотношении 1:2 и 2:5, соответственно. На основании экспериментальных данных можно предложить схему окисления изониазида (схема 4), которая согласуется со схемой, приведенной в литературе:
Схема 4
Фурацилин окисляется гипобромит-ионами с потерей 5 электронов. На основании экспериментальных и литературных данных можно предположить схему его окисления (схема 5).
Схема 5
Результаты определения изониазида и фурацилина оценены по способу «введено – найдено». Титрование проводили на трёх уровнях концентрации в диапазоне 70−130% от уровня концентрации, принятого за 100%. Полученные результаты представлены в таблице 12. Относительное стандартное отклонение не превышает 0,02.
Таблица 12
Определение фурацилина и изониазида гипобромит-ионами (n=5, Р=95%)
Субстанция | Введено, мкг | Найдено, мкг | Sr |
Фурацилин | 99 150 199 | 100±2 151±2 198±2 | 0,013 0,010 0,007 |
Изониазид | 90,4 159,0 219 | 90,0±0,9 158,4±0,9 219±2 | 0,008 0,005 0,006 |
Проведено количественное определение субстанций изониазида и фурацилина методом, рекомендуемым НД, и по разработанной методике (табл. 13). Относительная ошибка кулонометрического титрования составляет 0,3%, что значительно меньше относительной ошибки волюмометрического титрования.
Таблица 13
Определения субстанций кулонометрически
гипобромит-ионами и по НД (n=5, P=95%)
Субстанция | Найдено кулонометрически, % | Найдено по НД, % |
Изониазид | 99,9±0,2 Sr= 0,002; eср= 0,2% | 100,0±0,71 Sr= 0,006; eср= 0,7% |
Fрассч = 10,83 tрассч = 0,25 | ||
Фурацилин | 99,9±0,3; Sr= 0,002 eср= 0,3% | 99,9±0,62 Sr= 0,004; eср= 0,6% |
Fрассч = 4,69 tрассч = 0,04 |
1 неводное титрование 2 обратная йодиметрия
Правильность и воспроизводимость разработанных методик оценивали с помощью критерия Стьюдента и критерия Фишера, соответственно. Результаты статистической обработки показали, что различие между дисперсиями статистически незначимо (Fрассч<Fтабл=15,98 при Р=99%). Воспроизводимость метода кулонометрического титрования несколько лучше метода титрования по НД. Сравнивая рассчитанные значения критерия Стьюдента с табличным при Р=99% и f=8 (tрассч < tтабл =3,50), очевидно, что различие между средними статистически незначимо. Метод кулонометрического титрования не содержит систематической ошибки.
Проведена валидационная оценка методики количественного определения фурацилина по показателям: специфичность, линейность и аналитическая область методики, правильность и воспроизводимость. Специфичность предложенной методики показана методом «введено-найдено» (табл. 12), относительное стандартное отклонение не превышает 0,02. Линейность и аналитическую область методики устанавливали путем статистической обработки выборки, полученной в результате анализа 7 проб на 7 уровнях концентрации в диапазоне 70-130% от количества фурацилина, принятого за 100% (135 мкг в одной аликвоте). Зависимость между количеством электричества и массой фурацилина имеет линейный характер и описывается уравнением: y=a+bx, где a=0,004±0,003, b=(191±2,5)×10-5. Рассчитанное значение коэффициента линейной корреляции составляет 0,9996.
Правильность и воспроизводимость предложенной методики оценивали сравнением с методикой, рекомендуемой НД, по результатам 9 определений на одном уровне концентрации. Статистическая обработка полученных результатов показала, что различие между дисперсиями (критерий Фишера Fрассч=4,83<Fтабл= 6,03 при Р=99%) и между средними (критерий Стьюдента tрассч=0,27<tтабл=2,93 при Р=99% и f=16) статистически незначимо. Предложенная методика валидна по показателям: специфичность, линейность и аналитическая область методики, правильность и воспроизводимость.
Полученные результаты позволили предложить методики количественного определения изониазида в таблетках по 0,3 г, фурацилина в таблетках по 0,02 г, 0,2% мази и 0,066% спиртовом растворе. Установлено, что вспомогательные компоненты таблеточной массы, мазевой основы и спирт этиловый не мешают определению действующего вещества. Найденные значения входят в норму допустимых отклонений.
ВЫВОДЫ
1. Сравнительный анализ способов определения содержания воды и количественного определения фармацевтических субстанций ряда оснований и солей, включенных в отечественную и зарубежную нормативную документацию, выявил необходимость их совершенствования с помощью кулонометрического титрования.
2. Разработаны способы кулонометрического определения содержания воды в субстанциях арбидола, индапамида и димексида с помощью электрогенерированного в неводной среде йода; методики предложены для включения в раздел нормативной документации «Вода». Методика кулонометрического определения воды в таблеточной массе рамиприла предложена для включения в лабораторный регламент для производства таблеток. Методики кулонометрического титрования отличаются простотой проведения эксперимента, точностью, экспрессностью и требуют меньшего расхода токсичного реактива Фишера по сравнению с волюмометрическим титрованием.
3. Разработанный проект дополнения «Кулонометрическое определение воды», гармонизированный с требованиями зарубежных фармакопей, предложен для включения в отечественную Фармакопею. Показана целесообразность кулонометрического титрования с содержанием воды в пробе от 0,5 мг до 5 мг; с обязательным контролем правильности по стандарту.
4. Показано, что новокаина гидрохлорид, анестезин, сульфаниламид, нитроксолин, сульфацил-натрий и верапамила гидрохлорид взаимодействуют с электрогенерированным бромом быстро и количественно в соотношении 1:2 (новокаина гидрохлорид, анестезин, сульфаниламид, сульфацил-натрий) и в соотношении 1:1 (нитроксолин, верапамила гидрохлорид) по реакции электрофильного замещения. Методики количественного определения действующих веществ в субстанции и лекарственных формах предложены для использования в разделе нормативной документации «Количественное определение». Относительная ошибка среднего значения не превышает 0,3%.
5. Установлено, что арбидол, каптоприл, индапамид и парацетамол после гидролиза взаимодействуют с электрогенерированным бромом быстро и количественно в соотношении 2:9, 1:3, 1:4 и 1:1, соответственно, по реакции окисления. Методики количественного определения действующих веществ в субстанции и лекарственных формах предложены для использования в разделе нормативной документации «Количественное определение». Относительная ошибка среднего значения не превышает 0,3%.
6. Установлено, что изониазад и фурацилин взаимодействуют с гипобромит-ионами, образующимися при генерации брома в фосфатном буферном растворе, быстро и количественно, в соотношении 1:2 (изониазид) и 2:5 (фурацилин) по реакции окисления. Методики количественного определения действующих веществ в субстанции и лекарственных формах предложены для использования в разделе нормативной документации «Количественное определение». Относительная ошибка среднего значения не превышает 0,3%. Кулонометрические методики определения содержания действующих веществ в субстанции и лекарственных формах отличаются точностью, экспрессностью, простотой проведения эксперимента, не требуют предварительной стандартизации титранта, использования стандартных образцов или построения градуировочных графиков.
Список работ, опубликованных по теме диссертации:
1. Абдуллина, гальваностатической кулонометрии для анализа индапамида / , // Фармация. − 2012. − № 1. − С. 19−21.
2. Абдуллина, гальваностатической кулонометрии в анализе лекарственного препарата «Арбидол» / , , и др. // Журнал аналитической химии. − 2012. − Т.67. − № 3. − С. 308−311.
3. Абдуллина, оценка методики кулонометрического определения верапамила / , , и др. // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии − 2012. − № 9 − С. 22-26.
4. Абдуллина, определение воды в лекарственных препаратах / , , // Фармация. − 2011. − № 5. − С. 15−16.
5. Абдуллина, определение глутаминовой кислоты / , , и др. // Фармация. – 2009. − № 5. – С. 5−7.
6. Абдуллина, определение новокаина методом гальваностатической кулонометрии / , // Современные методы химико-аналитического контроля фармацевтической продукции: материалы I Всероссийской конференции. – М., 2009. – С. 7−8.
7. Абдуллина, определение парацетамола / , , // Здоровье и образование в ХХI веке: Инновационные технологии в биологии и медицине: сб. науч. тр. Х международного конгресса. – М., 2009. – С. 83−84.
8. Петрова, изониазида гальваностатической кулонометрией / , // Биотехнология и биомедицинская инженерия: сб. тр. III Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. – Курск, 2010. – С. 295−296.
9. Петрова, кулонометрия в анализе фурацилина / , // Актуальные вопросы повышения качества последипломной подготовки фармацевтических кадров: материалы республиканской научно−практической конференции. – Казань, 2010. – С. 171−174.
10. Петрова, методики количественного определения фурацилина / , // Фармация и общественное здоровье: материалы ежегодной конференции. – Екатеринбург, 2010. – С. 186−189.
11. Петрова, определение анестезина / , // Здоровье и образование в XXI веке. Научные и прикладные аспекты концепции здоровья и здорового образа жизни: материалы ХI международного конгресса. – М., 2010. – С. 164−165.
12. Абдуллина определение воды по методу Карла Фишера в дротаверина гидрохлориде / , , // Здоровье и образование в ХХI веке: Научные и прикладные аспекты концепции здоровья и здорового образа жизни: сб. науч. тр. Х международного конгресса. – М., 2010. – С. 45.
13. Абдуллина, определение воды в димексиде по методу Карла Фишера // , , / Здоровье и образование в ХХI веке: Научные и прикладные аспекты концепции здоровья и здорового образа жизни: сб. науч. тр. Х международного конгресса. – М., 2010. – С.531.
14. Абдуллина, оценка методики анализа сульфацил-натрия методом гальваностатической кулонометрии / , // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. – Пятигорск, 2011. – Вып.66. − С. 945.
15. Петрова, определение каптоприла методом гальваностатической кулонометрии / , , // Современная фармацевтическая наука и практика: традиции, инновации, приоритеты: материалы Всероссийской научно-практической конференции. – Самара, 2011. – С. 277.
16. Абдуллина, качества фармацевтических субстанций по содержанию воды / , // Здоровье человека в XXI веке: материалы III Российской научно-практической конференции. – Казань, 2011. – С. 424.
17. Петрова, электрогенерированного брома для анализа серусодержащих лекарственных препаратов / , // Здоровье человека в XXI веке. Материалы III Российской научно-практической конференции. – Казань, 2011. – С. 424.
18. Петрова, верапамила гидрохлорида электрогенерированным бромом / , // Здоровье человека в XXI веке: материалы IV Российской научно-практической конференции. – Казань, 2011. – С. 481−485.
19. Абдуллина, кулонометрия в анализе лекарственных средств. Учебно-методическое пособие для студентов фармацевтического факультета / , , / Казань: КГМУ, 2011. − 62 с.
20. Петрова, электрогенерированных галогенов в фармацевтическом анализе лекарственных средств / , , // Актуальные вопросы повышения качества последипломной подготовки фармацевтических кадров: материалы Российской научно-практической конференции. – Казань, 2012. – С. 57−62.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 |
