Биохимия (стр. 1 )

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РФ

НОВГОРОДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
ИМЕНИ ЯРОСЛАВА МУДРОГО

БИОХИМИЯ

Индивидуальный практикум

Часть II

Великий Новгород

2014

ББК 28.707.2	Печатается по решению
Б 63	РИС НовГУ

Р е ц е н з е н т

профессор

Биохимия. Индивидуальный практикум/ Часть II/ сост. , , . НовГУ им. Ярослава Мудрого. Великий Новгород, 2014 – 38с.

Методические указания предназначены для изучения дисциплины «Биохимия» для студентов специальности 31.05.01 «Лечебное дело»

© , , составители, 2014

© Новгородский государственный университет, 2014

ОГЛАВЛЕНИЕ

	С.
УЭМ 5 ОБМЕН И ФУНКЦИИ ЛИПИДОВ ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 9 Определение активности панкреатической липазы ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 10 Определение общего холестерина в сыворотке крови	5 7
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ Контрольная работа Обмен и функции липидов УЭМ 6 ОБМЕН БЕЛКОВ ЛАБОРАТОРНОЕ ЗАНЯТИЕ Обмен простых белков. Химический состав желудочного сока	10
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 11 Определение кислотности желудочного сока ЛАБОРАТОРНОЕ ЗАНЯТИЕ Обмен простых белков. Общие пути обмена аминокислот	11
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 12 Количественное определение активности аланинаминотрансферазы (АлАТ) в сыворотке крови ЛАБОРАТОРНОЕ ЗАНЯТИЕ Обмен сложных белков ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 13 Определение содержания билирубина в сыворотке крови	16 20
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ Контрольная работа Обмен простых и сложных белков УЭМ 7 РЕГУЛЯЦИЯ ПРОЦЕССОВ	21
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ Семинар Гормональная регуляция обмена веществ ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 14 Построение и анализ гликемических кривых ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ Контрольная работа Гормональная регуляция обмена веществ	23 25 27
УЭМ 8 БИОХИМИЯ ОРГАНОВ И ТКАНЕЙ ЛАБОРАТОРНОЕ ЗАНЯТИЕ Биохимия крови. Биохимия выделительной системы ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 15 Анализ нормальных и патологических компонентов мочи (белок, сахар, желчные пигменты, кетоновые тела и др.)	28
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ 5 Контрольная работа Биохимия органов и тканей ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 16 Решение ситуационных задач ВОПРОСЫ К ЭКЗАМЕНУ	31 31 34

УЭМ 5 ОБМЕН И ФУНКЦИИ ЛИПИДОВ

ЛАБОРАТОРНОЕ ЗАНЯТИЕ 1

Тема: Переваривание липидов в ЖКТ

Вопросы для подготовки к занятию

1.  Напишите формулу триацилглицерида, содержащего пальмитиновую, стеариновую и линоленовую ВЖК. Какую функцию выполняет данная молекула в организме человека?

2.  Напишите формулу глицерофосфолипида, содержащего пальмитиновую, линолевую ВЖК и холин. Какую функцию выполняет данная молекула в организме человека?

3.  Напишите формулы и названия эссенциальных ВЖК.

4.  Перечислите условия переваривания пищевых жиров.

5.  Изобразите схематично строение холеиновых комплексов.

6.  Изобразите схематично строение хиломикронов.

Выполните задания:

1.  Укажите место образования:

1) Хиломикронов	А) Печень
2) ЛОНП	Б) Слизистая тонкого кишечника
3) Комплексов альбумин-НЭЖК	В) Кровь
4) ЛНП	Г) Жировая ткань

2. Выберите все неправильные ответы:

Последствия нарушения переваривания и всасывания жиров:

A. Снижение содержания жирных кислот в липидах организма

Б. Стеаторея

B. Нарушение свёртывания крови в результате дефицита витамина К

Г. Снижение содержания пальмитиновой кислоты в организме

Д. Нарушение обмена кальция в результате недостаточного поступления витамина Д

3. Выберите один неправильный ответ:

Гликохолевая кислота:

A. Амфифильная молекула

Б. Участвует в формировании смешанных мицелл

B. Участвует в эмульгировании жиров

Г. Нейтрализует pH желудочного сока, поступающего в кишечник

Д. Участвует во всасывании продуктов гидролиза жиров

4. Установите соответствие:

1. Содержит глицерол	А. Фосфатидилхолин
2. Структурный компонент мембран	Б. ТАГ
3. Форма депонирования энергии	В. Оба
4. Содержит одну жирную кислоту	Г. Ни один

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 9

Тема: Определение активности панкреатической липазы

Цель: Исследовать условия действия липазы поджелудочной железы.

Принцип метода: Липаза- малоспецифический фермент, который действует на многие жиры при рН 9,0. Липаза гидролитически расщепляет пищевые жиры и в первую очередь эфирную связь в α-положении. Скорость действия липазы в отдельных порциях жира молока можно узнать по количеству жирных кислот, образующихся при гидролизе жира за определённый промежуток времени. Количество жирных кислот определяют титрованием щелочью в присутствии фенолфталеина

Схема постановки опыта: В колбу для титрования отбирают 1 мл молока (разведенного 1:10), добавляют 1 каплю раствора фенолфталеина и титруют 0,01 Н, NаОН до слабо-розового окрашивания. При первом титровании нейтрализуются органические кислоты - молочная и другие, которые присутствуют в молоке до начала действия липазы (V0 при t=0 мин.).

Готовят две пробирки с образцами 1 и 2:

Компонент инкубационной смеси	Образец 1	Образец 2
Молоко (разведённое 1:10), мл	10	10
Панкреатическая липаза, мл	1	1
Желчь, мл	-	1

Приготовленные инкубационные смеси тщательно перемешивают.

Смесь в колбах помещают в термостат, температура которого 38-40° С, и через определённые интервалы времени отбирают из каждой пробирки / не вынимая их из термостата /по 1 мл смеси и титруют 0,01 моль/л NaOН /Vi/.

Данные фиксируют в таблице:

t, мин. Vi 0,01н NaOH, мл	0	10	20	30	40	50
Опытная проба без желчи
Опытная проба с желчью

На основании полученных данных строят график, где

V= Vi, мл - активность липазы, выраженная объёмом гидроксида натрия, пошедшего на нейтрализацию жирных кислот, образовавшихся за данный отрезок времени.

Выводы: (сравнить активность панкреатической липазы)

Дата: Подпись преподавателя:

Тема: Обмен липидов. Биологическая роль холестерина

Вопросы для подготовки к занятию:

1. Напишите химические формулы неэтерифицированного и этерифицированного холестерина

2. Укажите основные пути использования холестерина в организме

3. Укажите транспортные формы липидов в сыворотке крови, их происхождение и функции

4. Изобразите в виде схемы эндогенный синтез холестерина

Выполните задания:

1.  Выберите направления использования холестерина в печени и коре надпочечников:

А. Печень	1. Построение мембран
Б. Кора надпочечников	2. Синтез холевой кислоты
В. Оба	3. Синтез витамина D3
Г. Ни один	4. Синтез кортизола

2. Во время обеда человек получил с продуктами животного происхождения 0,5 г холестерина. Укажите, может ли этот стерин попасть в клетки печени. Составьте схему, подтверждающую правильность вашего ответа

3. Выберете непосредственного предшественника мевалоната в синтезе холестерина и напишите его формулу:

А) Ацетил-КоА

Б) Изопентенилпирофосфат

В) Ацетоацетил-КоА

Г) 3-Гидрокси-3-метилглутарил-КоА

Д) Мевалонилпирофосфат

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 10

Тема: Определение общего холестерина в сыворотке крови

Цель: определить содержание холестерина в сыворотке крови фотоэлектрокалориметрическим методом

Предостережение

Все пробирки, пипетки, кюветы должны быть сухими. Рабочий реагент представляет собой смесь концентрированных кислот.

Схема постановки опыта

	Опытная проба	Калибратор	Контроль
Сыворотка, мл	0,02	-	-
Калибратор, мл	-	0,02	-
Вода, мл	-	-	0,02
Рабочий реагент, мл	2,0	2,0	2,0

Перемешать реактивы и инкубировать 20 мин при температуре 20-25 °С.