Фармакопейный анализ лекарственных веществ (стр. 3 )

в) Реакция с реактивом Несслера. Растворяют 0,01 г стрептомицина сульфата в 3 мл дистиллированной воды, прибавляют 2 мл кислоты хлористоводородной разбавленной и 0,5 мл реактива Несслера. Появляется черный осадок металлической ртути.

3. Реакции на 5-аминофурфурол.

а) Реакция с орцином. 0,1 г препарата растворяют в 20 мл воды. К 2 мл раствора прибавляют 0,8 мл 20% спиртового раствора орцина, 10 мл концентрированной кислоты хлористоводородной, содержащей 0,06% железа (III) хлорида и помещают в кипящую водянию баню на 20 мин; появляется зеленое окрашивание.

б) Реакция с α-нафтолом. 0,1 г препарата растворяют в 20 мл воды. К 2 мл раствора прибавляют 0,8 – 1 мл 20% спиртового раствора α-нафтола, 10 мл концентрированной кислоты хлористоводородной, содержащей 0,06% железа (III) хлорида и помещают в кипящую водянию баню на 20 мин; появляется зеленое окрашивание.

Тетрациклин:

1.  Реакция с концентрированной серной кислотой и раствором хлорида окисного железа.

Равномерно нанести 0,5 мл концентрированной серной кислоты на внутреннюю поверхность цилиндра емкостью 50 мл. На слой кислоты равномерно распределить 0,01 г тетрациклина. Появляется ярко-малиновое окрашивание, переходящее в красно-оранжевое. При добавлении примерно 10 мл дистиллированной воды окрашивание становится золотисто-желтым. Затем прибавляют по каплям 0,5 мл раствора хлорида окисного железа – появляется красно-коричневое окрашивание. Эффект реакции наблюдают на белом фоне.

2.  Реакция с концентрированной серной кислотой.

К 0,001-0,002 г препарата прибавляют 2 мл концентрированной кислоты серной; появляется фиолетовая окраска.

3.  Реакция образования ангидротетрациклина с концентрированной соляной кислотой.

Помещают 0,005-0,01 г тетрациклина в термостойкую пробирку, приливают 2 мл воды и 2 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают. Пробирку помещают в кипящую водяную баню на 2-3 минуты. Появляется желтая окраска и зеленовато-желтое флюоресценция, наблюдаемая в УФ-свете.

4.  Реакция изомеризации под действием натрия гидроксида.

0,01 г препарата растворяют в 2 мл 10% раствора натрия гидроксида; появляется коричнево-желтое окрашивание; нагревают в кипящей водяной бане в течение 1 – 2 мин – появляется синяя флюоресценция, наблюдаемая в УФ-свете.

5.  Реакция со спиртовым раствором хлорида окисного железа.

Помещают 4 мл 0,25% раствора тетрациклина в цилиндр емкостью 50 мл, разбавляют дистиллированной водой до 25 мл, перемешивают и прибавляют 0,2 мл спиртового раствора хлорида окисного железа. Появляется коричневое окрашивание. Эффект реакции наблюдают в проходящем свете.

6.  Реакция с диазореактивом.

Помещают 5 мл 0,25% раствора тетрациклина в пробирку и прибавляют 0,75 мл диазореактива. В течение 12-15 минут окрашивание раствора изменяется от желтого через ярко-оранжевое к красно-оранжевому.

Примечание: Приготовление диазореактива. 0,1 г стрептоцида растворяют при нагревании в 2 мл разведенной кислоты хлористоводородной и добавляют после охлаждения 2 мл 1% раствора нитрита натрия.

7.  Реакция с аммиачным раствором нитрата меди.

Помещают 5 мл 25 % раствора тетрациклина в термостойкую пробирку и прибавляют 0,1 мл аммиачного раствора нитрата меди. Появляется опалесцирующее оливково-зеленое окрашивание. Пробирку погружают в кипящую водяную баню на 3-4 минуты. Оливково-зеленое окрашивание переходит в светло-коричневое.

Окситетрациклин:

1.  Реакция с концентрированной серной кислотой.

Равномерно нанести 0,5 мл концентрированной серной кислоты на внутреннюю поверхность цилиндра емкостью 50 мл. На слой кислоты равномерно распределить 0,01 г окситетрациклина. Появляется огненно-красное окрашивание, переходящее постепенно в красно-оранжевое. При добавлении примерно 10 мл дистиллированной воды окрашивание становится золотисто-желтым. Эффект реакции наблюдают в проходящем свете.

2.  Реакция с концентрированной серной кислотой.

К 0,001-0,002 г препарата прибавляют 2 мл концентрированной кислоты серной; появляется фиолетовая окраска.

3.  Реакция образования ангидротетрациклина с концентрированной соляной кислотой.

Помещают 0,005-0,01 г тетрациклина в термостойкую пробирку, приливают 2 мл воды и 2 мл концентрированной соляной кислоты, перемешивают. Пробирку помещают в кипящую водяную баню на 2-3 минуты. Появляется оранжево-красная окраска и зеленовато-желтая флюоресценция, наблюдаемая в УФ-свете.

4.  Реакция изомеризации под действием натрия гидроксида.

0,01 г препарата растворяют в 2 мл 10% раствора натрия гидроксида; появляется коричнево-желтое окрашивание; нагревают в кипящей водяной бане в течение 1 – 2 мин – появляется синяя флюоресценция, наблюдаемая в УФ-свете.

5.  Реакция со спиртовым раствором хлорида окисного железа.

Помещают 2 мл 0,25% раствора окситетрациклина гидрохлорида в цилиндр емкостью 50 мл, разбавляют дистиллированной водой до 25 мл, перемешивают и прибавляют пипеткой 0,2 мл спиртового раствора хлорида окисного железа. Раствор окрашивается в коричневый цвет. Эффект реакции наблюдают в проходящем свете.

6.  Реакция с диазореактивом.

Помещают 5 мл 0,25% раствора тетрациклина в пробирку и прибавляют 0,5 мл диазореактива. Через 3-4 минуты появляется яркое желтое окрашивание с зеленоватым оттенком. Эффект реакции наблюдают на белом фоне и в проходящем свете.

7.  Реакция с аммиачным раствором нитрата меди.

Помещают 5 мл 25 % раствора окситетрациклина гидрохлорида в термостойкую пробирку и прибавляют 0,1 мл аммиачного раствора нитрата меди. Появляется оливково-зеленое окрашивание. Пробирку погружают в кипящую водяную баню на 3-4 минуты. Оливково-зеленое окрашивание переходит в темно-коричневое.

Задание II. Выполнить количественное определение стрептомицина сульфата.

Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят до метки тем же растворителем. К 5 мл этого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл 0,2 М раствор гидроксида натрия и нагревают на водяной бане в течение 10 мин. Охлаждают во льду точно 5 мин, прибавляют 3 мл раствора железо-аммониевых квасцов и доводят водой до метки и перемешивают. Через 20 минут после прибавления железо-аммониевых квасцов измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 525 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют раствор приготовленный аналогичным образом, но без добавления испытуемого вещества. Рассчитывают содержание стрептомицина сульфата, используя величину поглощения .

Содержание стрептомицина сульфата рассчитывают по формуле:

где: А – оптическая плотность фотометрируемого раствора; V1 и V2 – объемы мерных колб, используемые для приготовления фотометрированного раствора, мл; V – объем аликвоты, взятый для приготовления фотометрируемого раствора, мл; а – навеска анализируемого вещества, г; l – толщина кюветы, см.

Содержание стрептомицина сульфата должно быть не менее 90,0%

Контрольные вопросы и ситуационные задачи

1.  Перечислите все реакции на остаток стрептозы в молекуле стрептомицина. В каких условиях можно открыть остаток стрептозы и остаток N-метил-L-глюкозамина с реактивами, характерными для альдегидной группы? Напишите уравнения реакций.

2.  На чем основано использование ФЭК и спектрофотометрии в количественном определении аминогликозидов. Напишите уравнения на примере стрептомицина сульфата и канамицина моносульфата.

3.  Напишите структурную формулу гипотетического аминогликозида, агликоном которого является стрептидин, а аминосахарами – пурпурозамин и 6-глюкозамин. С учетом количества центров основности предположите формулу сульфатов. Напишите реакцию гидролиза и предложите реакции на подлинности.

4.  Напишите структурную формулу канамицина. Обозначить входящие в его состав аминосахара и агликон. С учетом количества центров основности написать формулу сульфатов. Напишите реакцию гидролиза и предложите реакции на подлинности.

Список литературы для подготовки.

1.  Беликов, химия: Учеб. Для вузов. – Пятигорск, 2007.

2.  Фармацевтическая химия: Учеб. Пособие / Под ред. . – 2-е изд., испр. – М.: ГОЭТАР-Медиа, 2005.

ЗАНЯТИЕ 3

Анализ лекарственных препаратов, производных пиридина (группа никотиновой и изоникотиновой кислот)

Цель занятия:

-изучить свойства, реакции идентификации и методы количественного определения лекарственных веществ, производных никотиновой и изоникотиновой кислоты;

- освоить метод количественного определения с использованием УФ-спектрофотометрии на примере анализа кислоты никотиновой, никотинамида, кордиамина, изониазида;

- освоить анализ готовых инъекционных лекарственных форм по показателям: прозрачность, цветность, рН, механические включения, номинальный объем;

- освоить методы анализа таблетированной лекарственной формы на примере анализа таблеток «Изониазид».

Задачи:

- ответить на вопросы входного контроля;

- изучить свойства лекарственных веществ производных никотиновой и изоникотиновой кислот на примере никотиновой кислоты, никетамида (кордиамина), никотинамида, изониазида, фтивазида, метазида, пикамилона.

- выполнить реакции идентификации в соответствии с требованиями соответствующей нормативной документации;

- выполнить анализ предложенных лекарственных форм по показателям нормативной документации, предложенным преподавателем.

В процессе самоподготовки и на занятии студент должен приобрести следующие знания и умения:

Знать:

- формулы, международные, русские и химические названия, внешний вид, свойства и растворимость предложенных веществ;