4. Способ изготовления многоканального элемента входящего в состав многоканального наконечника по п.1, включающий сборку стеклянных трубок в многоканальный пакет, закрепление одного его конца в захвате узла подачи, нагревание в печи другого конца с образованием луковицы и вытяжку до требуемого размера, отличающийся тем, что в процессе формования для получения структур с диаметром канала порядка и меньше 1 мкм осуществляют многократную вытяжку многоканальных элементов, предварительно сформированных укладкой элементов шестигранной формы, граничащих друг с другом диагональю, в углах которых располагают трехгранные элементы, количество капилляров на стороне трехгранника m = (n-1)/2, где n - количество капилляров на диагонали шестигранника.
5. Способ изготовления многоканального элемента по п. 4 отличающийся тем, что для предотвращения схлопывания капилляров во время вытяжки все пакеты первой или многократной вытяжки изолируют с одного торца силиконовым герметиком или клеем, или запаивают.
Просим рассмотреть откорректированную формулу, и дополнения по тексту с представленным примером и фиг.6, демонстрирующей расчет элементов.
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
Изобретение проиллюстрировано следующими чертежами.
На фигуре 1 изображен электрофорез в 0.8% агарозном геле. 1 – маркер, 2 – исходная смесь ДНК-белок, 3 – элюат из многоканального наконечника без инкубирования (только 2-х кратное промывание), 4 – элюат из многоканального наконечника после промывания и инкубации (3 мин).
На фигуре 2 изображен многоканальный массив, имеющий защитное обрамление из нескольких рядов стеклянных стержней.
На фигуре 3 изображен многоканальный массив, в котором защитное обрамление может быть выполнено в виде трубки.
На фигуре 4 изображен многоканальный массив, в защитном обрамлении которого три-шесть угловых мультикапиллярных элементов в массиве заменены на стеклянные стержни.
На фигуре 5 изображен многоканальный массив из предварительно сформированных укладкой элементов шестигранной формы, граничащих друг с другом диагональю, в углах которых располагают трехгранные заготовки.
На фигуре 6 представлен фрагмент многоканального массива, демонстрирующий расчет элементов на стороне трехгранных заготовок, связанных с количеством элементов на диагонали в шестигранных заготовках.
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
|
Фиг. 1. |
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
|
Фиг. 2 |
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
|
Фиг. 3 |
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
|
Фиг. 4 |
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
|
Фиг. 5 |
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
|
Фиг. 6 |
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
Изобретение проиллюстрировано следующими таблицами.
В таблице 1 приведена концентрация ДНК в элюатах после выделения на многоканальном наконечнике.
В таблице 2 приведено относительное содержание ДНК и белка в элюатах.
В таблице 3 приведено содержание белка в полученных элюатах.
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
Номер лунки | Проба | Cp, Fam | Концентрация* |
C3 | Лизат | ||
C4 | Лизат | ||
C5 | Длинный наконечник | 28.4 | 0.302 |
C6 | Длинный наконечник | 29.0 | 0.195 |
C7 | Короткий наконечник | 27.4 | 0.582 |
C8 | Короткий наконечник | 27.5 | 0.561 |
C9 | ПАНИ-сорбент | 25.8 | 1.8 |
C10 | ПАНИ-сорбент | 26.0 | 1.6 |
D3 | Колонки nexttecÔ | 26.3 | 1.2 |
D4 | Колонки nexttecÔ | 26.4 | 1.2 |
D5 | Набор Qiagen | 26.2 | 1.3 |
D6 | Набор Qiagen | 26.6 | 1.0 |
E3 | Отрицательный контроль (вода) | ||
E4 | Отрицательный контроль (вода) |
*В приведенном примере тестировали тонкие наконечники с максимальным объемом вводимой пробы 25 мкл. Объем пробы, наносимой на колонки, составлял 100 мкл. Площадь поверхности сорбента в колонке составлял не менее 7м2, в то время как площадь поверхности тонкого мультикапилляра не превышала 100 - 150 см2. Этим объясняется различие в определенных концентрациях выделенной очищенной ДНК.
Таблица 1.
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
Образец | ОЕ260 нм | ОЕ280 нм | ОЕ260 нм/ОЕ280 нм |
исходная смесь | 0.812 | 0.846 | 0.959 |
элюат без инкубирования | 0.498 | 0.543 | 0.917 |
элюат после промывания и инкубации | 0.796 | 0.031 | 25.68 |
Таблица 2.
Многоканальный наконечник для
экстракции нуклеиновых кислот, белков и пептидов
рН 7.2 | рН 10 | |||||
Образец | ОЕ, 280 нм | Содержание БСА в элюате, мкг | Удерживание белка в капилляре, % | ОЕ, 280 нм | Содержание БСА в элюате, мкг | Выход белка, % |
Kонтроль 1 | 0.036 | 0.0 | - | 0.035 | 0 | - |
Kонтроль 2 | 0.037 | 0.0 | - | 0.036 | 0 | - |
1 | 0.497 | 172.28 | 68.68 | 1.092 | 377.45 | 68.66 |
2 | 0.451 | 156.41 | 71.56 | 1.141 | 394.34 | 71.60 |
3 | 0.448 | 155.38 | 71.75 | 1.142 | 394.69 | 71.75 |
4 | 0.479 | 166.07 | 69.81 | 1.140 | 394.00 | 70.35 |
5 | 0.465 | 161.24 | 70.68 | 1.135 | 392.28 | 70.87 |
6 | 0.464 | 160.90 | 70.75 | 1.138 | 393.31 | 70.97 |
7 | 0.465 | 161.24 | 70.68 | 1.140 | 394.00 | 70.96 |
Среднее | 0.467 | 161.93 | 70.56 | 1.133 | 391.44 | 68.66 |
Таблица 3.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 |
