Практическая биохимия (стр. 9 )

1 Выберите аминокислоты, преобладающие в коллагене:

а) пролин; б) метионин; в) оксипролин; г) аспартат; д) глицин; е) лизин; ж) глутамин; з) оксилизин; и) десмозин; к) валин?

2 Укажите правильный порядок этапов биосинтеза и процессинга коллагена (например, а → б → … и т. д.):

а) фибриллогенез (формирование фибрилл); б) гидроксилирование про и лиз; в) образование альдегидов и поперечных связей; г) образование проколлагена (образование спирали, прекращение гидро­ксилирования); д) гликозилирование; е) образование коллагеновых волокон; ж) отщепление N - и C-концевых фрагментов;

з) трансляция?

3 Чем обусловлена высокая прочность коллагеновых волокон:

а) множеством ковалентных связей внутри молекулы тропоколлагена;

б) формированием третичной структуры коллагена;

в) взаимодействием протеогликанов с коллагеновыми фибриллами;

г) гидрофобными связями между молекулами тропоколлагена;

д) особым расположением пептидных цепей в тропоколлагене;

е) наличием гидратной оболочки;

д) гликозилированием коллагена?

4 При синдроме Элерса-Данлоса (тип VII) отмечается деформация суставов и искривление позвоночника, что обусловлено недостаточностью N‑кон­цевой проколлагенпептидазы, в связи с чем:

а) изобразите схему строения проколлагена;

б) на схеме укажите место действия проколлагенпептидаз;

в) какой из этапов процессинга коллагена нарушен при этом заболевании?

5 Возникающая при гипервитаминозе D3 деструкция костной ткани обусловлена и сопровождается:

а) усилением катаболизма коллагена; б) усилением биосинтеза коллагена; в) усилением катаболизма эластина; г) гиперэкскрецией с мочой оксипролинсодержащих пептидов; д) усилением биосинтеза эластина; е) усилением катаболизма альбумина; ж) усилением биосинтеза альбумина; з) гиперэкскрецией оксипролина с мочой?

6 При гиперпаратиреозе отмечается:

а) увеличение экскреции с мочой оксипролина; б) гиперкальциемия; в) уве­личение экскреция с мочой кальция; г) нарушение функции почек; д) гипер­тензия; е) одышка; ж) язвенная болезнь; з) гипертонус мышц; и) гиперсекре­ция гастрина; к) мышечная слабость?

7 В составе эластина преобладают следующие аминокислоты:

а) ала; б) гли; в) вал; г) глу; д) о-про; е) норлейцин; ж) и-лей; з) про; и) цис; к) лей?

8 Покажите преимущественное распределение коллагена и эластина в следующих структурах:

а) коллаген; б) эластин; в) сухожилия; г) желтая затылочная связка; д) стенка аорты; е) кости?

9 Какие компоненты необходимы для проявления активности пролилгидроксилазы?

а) кислород; б) витамин B6; в) Fe2+; г) витамин С; д) NADP+; е) α-кето­глутарат; ж) цитохром Р-450; з) Cu2+.

10 Какие из компонентов необходимы для проявления активности лизил­оксидазы?

а) кислород; б) витамин B6; в) Fe2+; г) витамин С; д) NADP+; е) α-кето­глутарат; ж) цитохром Р-450; з) Cu2+.

11 Из предложенных утверждений выберите те, которые правильно характеризуют последствия недостаточности лизилоксидазы:

а) нарушается синтез десмозина; б) увеличивается количество растворимого коллагена; в) уменьшается прочность эластина; г) уменьшается прочность аорты; д) в эластине увеличивается количество лизина и снижается количество десмозина; е) увеличивается количество растворимого эластина; ж) возрастает экскреция с мочой оксипролинсодержащих пептидов?

12 Фибронектин является фактором, связывающим коллагеновые волокна, протеогликаны, клетки. Какими свойствами это объясняется?

а) располагается внутри клеток; б) располагается в межклеточном пространстве; в) является простым белком; г) является поливалентным белком; д) имеет центры связывания фибробластов, коллагена и протеогликанов; е) располагается на поверхности клеток; ж) находится в крови; з) депонирует часть железа.

13 Какие свойства злокачественных клеток изменятся из-за снижения на их поверхности количества фибронектина?

14 Выберите положения, правильно характеризующие структуру и биологическую роль протеогликанов:

а) основным компонентом являются гликозаминогликаны; б) белок составляет 5–10 % от массы протеогликанов; в) белок составляет 20–30 % от массы протеогликанов; г) составляют основную массу межклеточного мат­рикса соединительной ткани; д) регулируют сродство гемоглобина к кислороду; е) связаны со структурными белками соединительной ткани; ж) образуют гелеобразные структуры?

15 Укажите, какие компоненты образуются при гидролизе:

а) хондроитин-4-сульфата; б) гиалуроновой кислоты; в) гепарина; г) глюкуроновая кислота; д) глюкуронат-2-сульфат; е) N-ацетилглюкозамин; ж) N-ацетилгалактозамин-4-сульфат; з) N-ацетилглюкозамин-6-сульфат?

Лабораторная работа Определение неорганического фосфора в моче по реакции с малахитовым зелёным.

Принцип метода. Реактив для определения неорганического фосфора (раствор красителя) включает в себя молибдат аммония, краситель малахитовый зелёный и соляную кислоту. Неорганический фосфор образует с молибденовой кислотой фосфорно-молибденовую кислоту, которая реагирует с малахитовым зелёным с образованием комплекса зелёного цвета, стабилизированного в растворе наличием детергента. Оптическая плотность комплекса при 630 нм пропорциональна концентрации неорганического фосфора.

Ход работы. Образец мочи перед употреблением разводят дистиллированной водой в соотношении 1:10.

Реактивы	Опыт, мл
Рабочий реагент детергента	1,00
Раствор красителя	1,00
Разведенная моча	0,01

Перемешать, через 10 минут определить экстинкцию опытной пробы на ФЭКе при длине волны 630 нм в кюветах на 0,5 см против дистиллированной воды.

Расчёт: проводят по калибровочному графику, полученный результат умножают на разведение.

Норма: концентрация неорганического фосфора в моче 25-48 ммоль/сут.

Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагности­ческую оценку.

Лабораторная работа Модифицированный метод количественного определения сиаловых кислот в сыворотке крови

Принцип метода. Метод основан на том, что при добавлении ТХУ к сыворотке крови происходит мягкий гидролиз гликопротеидов, приводящий к отщеплению сиаловых кислот, которые вступают в реакцию с уксусно-сернокислым реактивом с образованием окрашенного соединения буровато-розового цвета. Интенсивность окраски раствора прямо пропорциональна концентрации сиаловых кислот.

Ход работы.

1-й этап – гидролиз гликопротеидов. В сухую центрифужную пробирку отмеривают 1 мл сыворотки крови и прибавляют 1 мл 10 %-го раствора ТХУ. Смесь перемешивают, пробирку закрывают фольгой и помещают в кипящую баню точно на 5 мин для выделения сиаловых кислот в свободном виде. Вынув из бани, пробирку охлаждают в холодной воде со льдом. Смесь центрифугируют или очень аккуратно фильтруют, сливая раствор по стеклянной палочке на маленький бумажный фильтр. Если проводили центрифугирование, то надосадочную жидкость сливают в сухую пробирку.

2-й этап – проведение цветной реакции. В одну пробирку (опытную) отмеривают 0,4 мл супернатанта или фильтрата, в другую (контрольную) – 0,4 мл дистиллированной воды. В обе пробирки добавляют по 5 мл уксусно-сернокислого реактива, закрывают фольгой и помещают на 30 мин в кипящую баню. После этого пробирки охлаждают и колориметрируют на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром (длина волны – 540 нм) в кюветах толщиной слоя 10 мм против контрольной пробы. Зная оптическую плотность испытуемого раствора, по калибровочной кривой определяют концентрацию сиаловых кислот.

Калибровочную кривую строят с пробами, содержащими 0,05; 0,1; 0,2 и 0,3 мл стандартного раствора сиаловой кислоты (0,5 мг в 1 мл).

Общий объем пробы при построении калибровочного графика доводят дистиллированной водой до 0,4 мл. Затем добавляют во все пробирки по 5 мл уксусно-сернокислого реактива, перемешивают и проделывают все операции, описанные выше. При построении графика на оси ординат откладывают значения оптической плотности, а на оси абцисс – содержание сиаловых кислот в пробах.

Клинико-диагностическое значение. Сиаловые кислоты, или N-ацетил­производные нейраминовой кислоты, играют важную роль в организме, прежде всего, как структурные блоки гликопротеидов, являясь концевыми остатками их полисахаридных цепей. Гликопротеины выполняют в организме также опорную, защитную, рецепторную и иммунную функции.

При патологических состояниях организма содержание гликопротеинов существенно изменяется. Особенно заметны эти изменения при воспалительных процессах, сопровождающихся разрушением соединительной ткани, – ревматизме, коллагенозах, некоторых формах новообразований и др. В этих случаях уровень сиаловых кислот в тканях и сыворотке крови резко возрастает и может служить диагностическим тестом для оценки активности патологического процесса.

В норме содержание сиаловых кислот в сыворотке крови составляет в среднем 0,62–0,73 г/л (62–73 мг/дл).

Оформление работы. Дают клиническо-диагностическую оценку полученных результатов, отмечают клиническое значение определения сиаловых кислот.

Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагности­ческую оценку.

Рекомендуемая литература

Основная

Кухта, В. К и др. Биологическая химия: учебник / , , ; под ред. . – Минск: Асар, М.: Издательство БИНОМ, 2008. – С. 625-636. Биохимия: Учебник для вузов / Под ред. . – 4-е изд., испр. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. – С. 687-720. Николаев, химия. М.: Медицинское информационное агентство, 2004. – С. 432-451. и др. Биохимия человека: в 2-х т.: Пер. с англ., М.: Мир, 2004. – Т.1: С. Т.2: С. 311-318, 347-351.

Дополнительная

Березов, химия / , . – М.: Медицина, 1998. – С. 661–678. и др. Элементы патологической физиологии и биохимии. М.: МГУ, 1992. – С. и др. Молекулярная биология клетки. М.: Мир, 1994. Т. 3. С. 287–381.

Занятие 35

Контрольное занятие по разделу «Биохимия органов и систем»

Цель занятия: контроль усвоения тем раздела.