Определение количественного о содержания салидрозидов и исследование бактерицидных свойств отваров из коры различных сортов ивы (стр. 3 )

Количественная определение фенолгликозидов в пересчете на салидрозид проводили по методике ГФ XI на сырье родиолы розовой  (Приложение 13).

Результаты спектрофотометрического анализа представлены в таблице 5.

Таблица 5. Содержание салидрозида в исследуемых отварах коры ивы

№ препарата	Наименование препарата	D 1, %	D 2, %	D 3, %	D ср, %	Xсалидрозида, %
1	S. albaL. (Ива белая),	2,055	2,055	2,055	2,055	2,15
2	S. capreaL. (Ива козья),	0,467	0,467	0,467	0,467	0,49
3	S. fragilisL. (Ива ломкая).	1,758	1,758	1,758	1,758	1,84
4	S. acutifoliaWilld. (Ива остролистная)	0,702	0,701	0,702	0,7017	0,73

Результаты эксперимента проверили в лаборатории кафедры Органической химии МГУ им. . на спектрофотометре Varian Cary 50 Scan (Приложение 10).

Из анализа таблицы 5 видно, что в исследуемых препаратах содержится салидрозид.

Определение бактерицидной активности исследуемых препаратов.

Работа проводилась в лаборатории кафедры Микробиологии МВА им. .

Оборудование: газовая горелка; микробиологическая петля; чашка Петри – 5 шт; зонд – тампоны; термостат; предметные стекла; микроскоп; микробиологический лоток.

Реактивы и материалы: мясопептонный агар с добавлением глюкозы; биологический материал – мазки из ротовой полости; генцианвиолет феноловый, раствор Люголя, йодистый калий, дистиллированная вода, спирт 70%-ный, фуксин, иммерсионное масло.

Ход эксперимента:

1-ый день. Посев на твердую среду.

Взяли мазки из ротовой полости и горла. Сделали «газонный посев» мазков на мясопептонный агар с добавлением глюкозы. С помощью стерильной микробиологической петли делали лунки в агаре. С помощью петли помещали пробы в лунки агара. Поставили в термостат при температуре 37°С.

Через 2 дня: Исследование посевов.

Рассматривали чашки Петри с посевами и производили подсчет колоний бактерий и измерение зоны задержки роста ЗЗР. Результаты исследования представлены в таблицах 1,2  Приложений 11,12.

  Окрашивание по методу Грама и микроскопирование.

Предметное стекло размещали на мостике микробиологического лотка около пламени горелки. Капали каплю физраствора. Прокаленной микробиологической петлей брали пробы микроорганизмов и делали мазки. Высушивали мазки при комнатной температуре. Проводили фиксацию мазков с помощью нагреванием до 80°С (физический метод). При фиксации происходит денатурация поверхности белка и мазок становится безопасным. Окраска феноловым генцианвиолетом — 2—3 мин. Обмывание водой и высушивание фильтровальной бумагой. Грамположительные микробы красятся в фиолетовый цвет, а грамотрицательные — в красный. Микроскопирование (Приложение 13).

Анализ полученных результатов.

Анализ подлинности и количественного содержания действующих веществ в лекарственных препаратах салициловой и ацетилсалициловой кислот.

Качественный анализ показал, что все лекарственные препараты подлинные.

В соответствии с ФСП допустимые нормы отклонений в количественном содержании салициловой и ацетилсалициловой кислот в лекарственных препаратах составляют ±4 %. При сравнении полученных результатов с рассчитанным содержанием в приготовленных препаратах салициловой кислоты можно сделать следующие вывод: у всех препаратов отклонения от указанных концентраций соответствует допустимым значениям (препарат, приготовленный из химического реактива – 3%, лекарственных препаратов №1 и №2 – 2% и 1%; салициловая мазь показала наибольшее отклонение 3,8%). В соответствии с ГФ Х содержание ацетилсалициловой кислоты в препаратах должно быть не менее 99,5%. Вывод: препарат №2,3,5 по результатам исследования соответствуют ГФ (в препарате №5 содержание АСК 75%, а для препарата №2 получили допустимое значение погрешности 1,62%). Препарат №1 из химреактива значительные отклонения. Препарат №4 – нельзя применять данную методику.

Количественное определение салидрозида в образцах коры ивы.

Проведенное спектрофотометрическое исследование подтвердило, что в коре ивы содержатся салидрозиды.

При проведении микробиологического исследования отваров коры ивы установлено, что они частично сдерживают рост микроорганизмов полости рта и горла. При окрашивании обнаружены грам – положительные стафиллококки.

Выводы:

Были освоены фармакопейные методики определения подлинности лекарственных препаратов, действующими веществами в которых являются салициловая и ацетилсалициловая кислоты. Определено количественное содержание их методом кислотно – основного титрования – прямой алкалиметрии. В результате можем сделать вывод, что все лекарственные препараты соответствуют ГФ.

Определено содержание салидрозидов в коре ивы. Наибольшее содержание в отварах коры ивы белой и ивы ломкой.

Проверена бактерицидная активность отваров из коры ивы. Отвары ивы обладают бактерицидной активностью по отношению к отдельным видам микроорганизмов, предположительно, сдерживают рост стафилококков (наилучшие показатели в отварах ивы козьей и ивы остролистной).

Т. о. отвары из коры ивы белой и ломкой можно использовать для полоскания рта  и горла при воспалительных заболеваниях.

Работа практически завершена. Хотелось бы далее исследовать состав коры ивы и определить содержание других компонентов – салицилатов, флавоноидов и дубильных веществ.

Литература. [электронный ресурс]- Режим доступа: https://www.chem-astu. ru/misc/0001/05.html. – Статья История создания аспирина. [электронный ресурс] – Режим доступа:  http:///archive/2010/N21/aspeter_2110.php? art_code=7770&part_code=87 электронный журнал «Провизор». , канд. Фарм. Наук. – Статья Еще одна история об ацетилсалициловой кислоте. [электронный ресурс]- Режим доступа: http://www.chem. /rus/elibrary/edu_organic. html Электронная библиотека учебных материалов по химии. Общий курс органической химии (курс лекций). Органическая химия: учебное пособие для вузов: в 3Т/ . – М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2015. [электронный ресурс]- Режим доступа: http://www.chem. /rus/elibrary/edu_organic. html Электронная библиотека учебных материалов по химии. ,  ,  ,  «Практикум по органической химии». [электронный ресурс]- Режим доступа: http://www.chem. /rus/elibrary/edu_organic. html Электронная библиотека учебных материалов по химии. , , . Техника эксперимента в органической химии. Лекарства XX века. – М.: Новая Волна, 1998.-320с. [электронный ресурс]- Режим доступа: http://pharmacopoeia.ru/gosudarstvennaya-farmakopeya-xiii-online-gf-13-online/ Государственная фармакопея РФ. [электронный ресурс]- Режим доступа: http://pharmacopoeia.ru/fs-2-1-0033-15-salitsilovaya-kislota/ ФС.2.1.0033.15 Салициловая кислота. [электронный ресурс]- Режим доступа: http://pharmacopoeia.ru/fs-2-1-0006-15-atsetilsalitsilovaya-kislota/ ФС.2.1.0006.15 Ацетилсалициловая кислота. [электронный ресурс]- Режим доступа: http://pharmacopoeia.ru/ofs-1-4-1-0018-15-nastoi-i-otvary/ОФС.1.4.1.0018.15 Настои и отвары. [электронный ресурс]- Режим доступа: http://pharmacopoeia.ru/fs-2-5-0036-15-rodioly-rozovoj-kornevishha-i-korni/ ФС.2.5.0036.15 Родиолы розовой корневища и корни. [электронный ресурс]- Режим доступа: http://pharmacopoeia.ru/ofs-1-2-1-0010-15-poterya-v-masse-pri-vysushivanii/ОФС.1.2.1.0010.15 Потеря в массе при высушивании. Справочник ВИДАЛЬ. Лекарственные препараты в России: Справочник. - М.: АстраФармСервис, 2002. – 1488 с. [электронный ресурс]- Режим доступа: http://bio-slovar. ru/idx. php/138/1821/article/ Биологический словарь. Ива. Ее культура и использование. – М.: Издательство Академии Наук СССР, 1952. – 168 с. [электронный ресурс] - Режим доступа: http://fpmf. vlsu. ru/fileadmin/kafedry/biology/Metod_mater/Labor_practicum_microb. – Прунтова, практикум по общей микробиологии / , ; Владим. Гос. Ун-т. – Владимир : Изд - во ВлГУ, 2005. – 76 с.

Приложение 1. История получения ацетилсалициловой кислоты из коры ивы.

В стабильной форме, пригодной для очистки, салициловая кислота была впервые выделена из ивовой коры итальянским химиком Рафаэлем Пириа в 1838 году. Впервые была синтезирована Шарлем Фредериком Жераром в 1853 году.

В 1859 году профессор химии Герман Кольбе из Марбургского университета раскрыл химическую структуру салициловой кислоты, что позволило в 1874 году открыть в Дрездене первую фабрику по её производству. В 1875 году для лечения ревматизма и в качестве жаропонижающего средства был применён салицилат натрия. Вскоре было установлено его глюкозурическое действие, и салицин начали назначать при подагре.

10 августа 1897 года Феликс Хоффман, работавший в лабораториях фирмы Bayer AG, впервые получил образцы ацетилсалициловой кислоты в форме, возможной для медицинского применения; используя метод ацетилирования, он стал первым в истории химиком, кому удалось получить салициловую кислоту химически чистой и в стабильной форме. Наряду с Хоффманом изобретателем аспирина также называют Артура Айхенгрюна (Arthur Eichengrun)[6][7]. Сырьём для получения ацетилсалициловой кислоты служила кора дерева ивы. Bayer зарегистрировала новое лекарство под торговой маркой аспирин. Хоффман открыл лечебные свойства ацетилсалициловой кислоты, пытаясь найти лекарство для своего отца, страдавшего ревматизмом.

В 1971 году фармаколог Джон Вейн продемонстрировал, что ацетилсалициловая кислота подавляет синтез простагландинов и тромбоксанов[8][9]. За это открытие в 1982 году ему, а также Суне Бергстрёму и Бенгту Самуэльсону была присуждена Нобелевская премия по медицине;[10] в 1984 году ему был присвоен титул рыцаря-бакалавра.

Торговое название «Aspirin»[править | править код]

После долгих споров за основу решили взять латинское наименование растения, из которого берлинский учёный Карл Якоб Ловиг впервые выделил салициловую кислоту, — Spiraea ulmaria. К четырём буквам «spir» приставили «a», чтобы подчеркнуть особую роль реакции ацетилирования, а справа — для благозвучия и в соответствии со сложившейся традицией — «in». Получилось простое в произношении и легко запоминающееся название «Aspirin» («Аспирин»).