Перинатальная патология у крупного рогатого скота и фармакологические аспекты её профилактики и лечения (стр. 1 )

На правах рукописи

АЛЕХИН ЮРИЙ НИКОЛАЕВИЧ

ПЕРИНАТАЛЬНАЯ ПАТОЛОГИЯ У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЕЁ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ

06.02.06 – ветеринарное акушерство и биотехника репродукции

животных

06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени

доктора ветеринарных наук

Воронеж – 2013

Работа выполнена в ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Россельхозакадемии

Научные консультанты:

доктор ветеринарных наук, профессор,

академик РАСХН

доктор ветеринарных наук, профессор,

заслуженный деятель науки РФ

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор,

заслуженный ветеринарный врач РФ,

профессор кафедры терапии, акушерства и

фармакологии ФГБОУ ВПО Саратовский ГАУ

им.

доктор ветеринарных наук, профессор,

профессор кафедры морфологии и физиологии

ФГБОУ ВПО БелГСХА им.

доктор ветеринарных наук, доцент,

заведующий кафедрой акушерства и физиологии

сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО

Воронежский ГАУ им. Императора Петра 1.

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Уральская государственная сельскохозяйственная академия» Свердловская область, Екатеринбург, ул. Карла Либкнехта,.

Защита состоится « 15 » августа 2013 г. в 10.00 часов на заседании диссертационного совета Д 006.004.01 при ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Россельхозакадемии 14-б.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ ВНИВИПФиТ

Автореферат разослан «___» _____________ 2013 г.

Учёный секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук, доцент

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность проблемы. Вопросы получения и сохранения здорового молодняка сельскохозяйственных животных относятся к числу наиболее актуальных в животноводстве, во многом определяющие его эффективность. В формировании нозологического профиля болезней новорожденных и растущих телят ведущая роль принадлежит перинатальной патологии (, 1969, 1994, 1998, , 1999, , 2005,). Механизм её развития достаточно сложен и имеет многофакторную природу ( С, 1993, Person E. G. еt al, 1995, Frai C. еt al, 1997, Lorenz I., 2004, , 2005).

Большинство ранее выполненных исследований посвящено изучению отдельных патологических состояний, таких как гипотрофия, омфалит, гиппогаммаглобулинемия и интранатальная асфиксия. Отмечается, что непосредственной причиной гипотрофии является дефицитное кормление и нарушение обмена веществ у матери (, 1956, 2001, , 2002), гипоксического состояния - ацидоз и гипоксия у матери, а так же нарушение родовой деятельности (, 1997, , 2005), омфалита – патогенная и условно-патогенная микрофлора (, 2005, , И. с соавт., 2005). Предрасполагающими факторами для большинства форм перинатальной патологии являются нарушения условий содержания, кормления и эксплуатации маточного поголовья, правил оказания акушерской помощи и санитарно-гигиенического режима содержания новорожденных. При этом авторы отмечают их существенную роль в возникновении желудочно-кишечных болезней (Brestansley J., 1981, , 2002, Dittenhoffer C., 2005, Batchelder C. A. et al., 2007, И., 2011).

Для профилактики и терапии указанных патологий предложено большое количество средств и способов (, 1997, , 1999, И. с соавт. 2010 и др.). Отмечается сравнительно высокая эффективность препаратов селена, применяемых для оптимизации развития плода и повышения жизнеспособности новорожденных, профилактики и лечения омфалита и желудочно-кишечных болезней (, 2002, В., 2004, , 2007, , 2009, , 2012).

Однако, отдельные патологии анте - интра - и неонатального периодов изучаются, как правило, раздельно, без учёта наличия общих причин возникновения и взаимосвязанных механизмов развития. Поэтому, решение проблемы патологий плодов и новорожденных не возможно без углубления знаний по морфофизиологическим особенностям животных в период антенатального и неонатального развития. Без изучения общих и специфических механизмов патогенеза и особенностей фармакологии патологий перинатального периода не возможно разрабатывать эффективные способы профилактики и лечения. Необходимость комплексного подхода к формированию методологии, диагностики, дифференциации, терапии и профилактики перинатальной патологии у крупного рогатого скота определила направление, цель и задачи наших исследований.

1.2. Цель и задачи исследований. Целью настоящего исследования являлось изучение форм проявления, причин и патогенеза перинатальной патологии у плодов и новорожденных телят, и разработка эффективных методов её диагностики, профилактики и терапии. Для её достижения на разрешение были поставлены следующие задачи:

1. Разработать методологические подходы к оценке физиологического и патологического состояния плодов и новорожденных телят.

2. Выявить клинико-биохимические особенности проявления антенатальной гипотрофии, гепатодистрофии и гипоксии, интранатальной асфиксии и омфалита и их распространение среди животных разных пород, в хозяйствах разных направлений и технологий ведения животноводства.

3. Изучить влияние клинического и метаболического статуса коров-матерей на возникновение перинатальной патологии у плодов и новорожденных.

4. Определить влияние условий содержания и кормления новорожденных на течение патологий анте - и интранатального происхождения и возникновение омфалита.

5. Установить влияние фармакологических средств на возникновение перинатальной патологии.

6. Изучить влияние перинатальной патологии на функциональное становление органов и систем организма у растущего молодняка.

7. Изучить клиническую фармакологию неорганических и органических соединений селена при перинатальной патологии у крупного рогатого скота.

8. Разработать эффективные методы фармакопрофилактики и фармакотерапии различных форм перинатальной патологии плода и новорожденных телят.

1.3. Научная новизна исследований. Определены методологические основы и базовые положения перинатальной патологии у крупного рогатого скота. Впервые изучены состояние плода в родах, механизмы начала лёгочного дыхания и процессы первого этапа послеродовой адаптации, определены формы и клинико-биохимические особенности проявления, причины возникновения и особенности диагностики перинатальной патологии у молочного и мясного скота. Показана роль нарушений обмена веществ у матерей, наличия у них экстра - и интрагенитальных болезней в возникновении перинатальной патологии. Дана классификация гипоксии плода, врождённой гипотрофии и интрантальной асфиксии, дифференциальная диагностика гипоксических состояния у плода и новорожденных. Впервые показано влияние перинатальной патологии на формирование биоценоза желудочно-кишечного тракта, процессы становления работы органов дыхания и преджелудков, а так же влияние параметров микроклимата на новорожденных с перинатальной патологией. Установлена роль обеспеченности коров-матерей селеном в возникновении перинатальной патологии, определены его диагностические диапазоны содержания в сыворотке крови. Изучена клиническая фармакология препаратов селена (деполен, селедант, селетон, селелонг) и обменокорректоров (аминотон и гепатон). Созданы фармакологические схемы профилактики и терапии перинатальной патологии с использованием разработанных препаратов. Разработана система охранительного выращивания телят с перинатальной патологией, включающая в себя мониторинг состояния плода, иммунометаболическую коррекцию и создание комфортных условий для реабилитации, роста и развития молодняка. Новизна проведённых исследований подтверждена 1 патентом РФ (№) и 2 патентами Украины (№ 000 и 67115).

1.4. Практическая значимость и реализация результатов исследований. Разработаны и предложены производству способы диагностики, профилактики и терапии нозологически дифференцируемой перинатальной патологии у крупного рогатого скота, которые вошли в учебное пособие «Практическое руководство по обеспечению продуктивного здоровья крупного рогатого скота (УМО № от 01.01.2001); 9 методических рекомендаций и положений, рассмотренных и одобренных Бюро Отделения ветеринарной медицины РАСХН и секцией «Патология, фармакология и терапия» Отделения ветеринарной медицины РАСХН.: Комплексная экологически безопасная система ветеринарной защиты здоровья животных (2000), Эндогенные интоксикации у животных и их диагностика (2000), Патология фибринолитической системы: клиническое проявление и диагностика (2007), Методические рекомендации по организации работы с импортным крупным рогатым скотом (2007), Методические рекомендации по диагностике, профилактике и лечению омфалита у новорожденных телят (2008), Методические рекомендации по диагностике, профилактике и терапии гепатопатий у крупного рогатого скота (2009), Методические рекомендации по оптимизации формирования колострального иммунитета у новорожденных животных (2009), Методические рекомендации по диагностике и терапии гестоза у молочных коров и свиноматок (2009) и Методы диагностики перинатальной патологии у крупного рогатого скота (2013). Результаты исследований вошли в нормативную документацию по регистрации препаратов Деполен (рег. №ПВР-2-5.0/00524 от 01.01.2001 г), СеледантАФ (рег. №ПВР-2-1.7/01895 от 3.04.2007 г), Аминотон-АФ (рег. №ПВР-2-11.7/02132 от 6.07.2008 г) в РФ, Селелонг (рег. №АВ0 от 01.01.2001 г), Гепатопротекторный комплекс «Гепатон» (рег. № АВ1 от 01.01.2001 г) и Селетон (рег. №АВ2 от 01.01.2001) в Украине.

1.5. Апробация работы. Основные положения и результаты доложены и обсуждены на: координационном совещании «Итоги и перспективы научных исследований по проблемам патологии животных и разработке средств и методов терапии и профилактики» (Воронеж, 1995), международном координационном совещании «Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных» (Воронеж, 1997), международной научно-производственной конференции «Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных» (Воронеж, 1999), международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях» (Воронеж, 2002), научно-практической конференции «Современная ветеринарная защита коров высокопродуктивных пород» (Воронеж, 2005), международной конференции «Актуальные проблемы здоровья скота, завозимого в Россию в рамках нацпроекта «Развитие агропромышленного комплекса»» (Казань, 2007), на первом съезде ветеринарных фармакологов России (Воронеж, 2007), международной научно-производственной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Курск, 2008), международной научно-практической конференции «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных» (Воронеж, 2009), международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы болезней обмена веществ у сельскохозяйственных животных в современных условиях» (Воронеж, 2010) и международной научно-практической конференции «Современные проблемы ветеринарного акушерства и биотехнологии воспроизведения животных» (Воронеж, 2012).

1.6. Публикации. По материалам диссертационной работы опубликованы: 1 учебное пособие, 2 коллективные монографии, 9 методических рекомендаций и положений, 41 научные статьи, в том числе 14 в изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ.

1.7. Личный вклад соискателя. Работа является результатом личных исследований автора в период с 1993 по 2013 годы. Автор самостоятельно организовал и провёл все экспериментальные исследования, большую часть клинических, инструментальных и лабораторных исследований, систематизировал и проанализировал полученные результаты.

1.8. Основные положения, выносимые на защиту.

1. Методологические особенности оценки физиологического и патологического состояния плодов и новорожденных телят.

2. Формы проявления и распространение перинатальной патологии у крупного рогатого скота.

3. Клинико-биохимическая характеристика неонатальной гепатодистрофии, гипотрофии, антенатальной гипоксии, интранатальной асфиксии и омфалита.

4. Влияние клинического и метаболического статуса матерей и некоторых фармакологических средств на возникновение перинатальной патологии.

5. Влияние условий содержания и кормления на новорожденных с перинатальной патологией.

6. Влияние уровня обеспеченности матерей селеном на возникновение перинатальной патологии.

7. Клиническая фармакология препаратов селена (деполен, селедант, селетон, селелонг) и обменокорректоров (аминотон и гепатон).

8. Фармакологические схемы профилактики и терапии перинатальной патологии у крупного рогатого скота.

1.9. Структура и объём диссертации. Работа оформлена в соответствии с ГОСТ Р 7.0.11-2011, состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и приложения. Диссертация изложена на 405 страницах машинописного текста, иллюстрирована 120 таблицами и 12 рисунками. Список, используемой литературы содержит 505 источника, из них 405 отечественных и 100 иностранных.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Научно-исследовательская работа проводилась в период с 1993 по 2013 в ГНУ ВНИВИПФиТ Россельхозакадемии в соответствии с Государственным планом научных исследований по заданиям № гос. регистрации 01.9.90.000.1257; 01.200.117019 и 15070.. Экспериментальная часть работы выполнена в лаборатории клинико-функциональной диагностики ВНИВИПФиТ. Ряд исследований проведены в испытательном центре и отделе микробиологии, вирусологии и иммунологии ВНИВИПФиТ. Научно-хозяйственные опыты проводились в и «Заречье» (-Агро»), СХА «Свобода», «им Мичурина» и «Сельские зори», и «Донское», , «Агро-Гарант-Молоко» и «Стивенсен-Спутник» Воронежской области, ГПЗ «Барыбино» Московской области и «Дмитрова гора» Тверской области.

При проведении экспериментальной части работы и в научно-производственных опытах было задействовано 580 коров и 820 телят голштино-фризской породы (голландской и немецкой селекции) и красно-пёстрого скота «Воронежский». При изучении распространённости перинатальной патологии, эффективности схем её профилактики и лечения под наблюдением находилось 3455 коров и 5820 голов молодняка красно-пёстрой, голштино-фризской, чёрно-пёстрой, симментальской (мясо-молочный и мясной тип), швицкой, абердин-ангусской, герефордской, лимузинской, шаролезской и казахской белоголовой породы. Основные этапы исследований представлены на рисунке 1.

Клиническое обследование проводили общепринятыми методами. Контроль беременности и состояние плода оценивали с помощью переносного сканера УЗИ (Draminski, Польша). Внешнее дыхание оценивали с использованием водяного манометра (U-образный), сухого (СПП) и влажного (мод. 18В) спирометров по следующим показателям (система BTPS): дыхательный объём вдоха (TVin) и выдоха (TVex), минутный объём дыхания (MTV), давление воздуха во время вдоха (Рin) и выдоха (Рex), с последующим расчётом разницы давления (ΔР), дефицита экспирации (ΔTV), объёмной скорости воздуха (Vaer), аэродинамического сопротивления (Raw) и работы дыхания (W) (Уэст Дж. 1998). Пробы крови отбирали из ярёмной вены. При необходимости многократного отбора проб проводили катетеризацию вены по методике Сельдингера. Оценку газового состава и кислотно-основного состояния (КОС) крови проводили с помощью анализатора Rapidlab-840 (Великобритания) и оксигемометра 057М по следующим показателям: рН, парциальное давление углекислого газа (рСО2), парциальное давление кислорода (рО2), содержание угольной кислоты (H2CO2), титруемых оснований (BT, но дефицит – BD; избыток – ВЕ), истинных (АВ) и стантартных (SВ) бикарбонатов, сумма буферных систем (ВВ). Содержание в сыворотке крови креатинина, холестерина, глюкозы, мочевины, кальция, неорганического фосфора, активность гамма-глутамилтрансферазы (ГГТФ), щелочной фосфатазы (ЩФ), аспарт - (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ) определяли на биохимическом анализаторе Hitachi–902 (Франция).

Рис. 1. Общая схема исследований

В крови так же определяли содержание молекул средней массы (ССМ) – по с соавт. (1985), пировиноградной кислоты - энзиматическим UV-методом (набор реагентов, «Вита Рос»), молочной кислоты – по с соавт. (1993), общего белка – рефрактометрическим методом, общих липидов – по (1980), фетального гемоглобина по Зингеру (, 1987), внеэритроцитарный гемоглобин по и др. (1996) и малонового диальдегида ( и др., 1997). С целью оценки системы гемостаза определяли фибриноген унифицированным гравиметрическим методом, время свёртывания крови - унифицированным методом с нативной кровью и по Lee-White, время рекальцификации - унифицированным методом и протромбиновое время по Квику, (, и др., 1980), толерантность плазмы к гепарину по Сулье и Сирма ( и др. 1970), время лизиса эуглобулинового сгустка по М. Buckell и Е. Коwalski (,1981), активность фибриназы – унифицированным ускоренным методом и проводили этаноловый тест (, 1987). Сорбционную способность эритроцитов (ССЭ) определяли по с соавт. (1988), их осмотическую резистентность (ОРЭ) по (, 1987) и мочевинный гемолиз (ПМЭ) по (1982). Объем циркулирующей крови определяли по степени разведения красителя Т-1824 (, 1973). Показатели морфологии крови определяли с помощью гематологического счётчика АВХ Micros 60 CT/OT (Франция), которые так же использовали для расчёта индексов эритроцитов (Тодоров Й, 1966) и лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ, Кальф-, 1941). Экспрессию генов цитокинов (IL-1, IL-2, фактор некроза опухоли - TNF) находили по модифицированной методике (Sacco R. E. et al., 2012). На на атомно-абсорбционном спектрофотометре «Perkin Elmer mod. 703» (США) определяли цинк, медь, марганец, железо, кальций и магний, Shimadzu АА-6300 (Япония) кобальт и селен. Содержание классов иммуноглобулинов в сыворотке крови определяли методом радиальной иммунодиффузии по Манчини (1965), общих иммуноглобулинов - методом преципитации сульфатом цинка (Weaver D. M. et al., 2001). Бактериологические исследования проводили общепринятыми методами ( с совт., 1995; с соавт., 2009). Оценку результатов вофаверидиновой пробы проводили по показателям содержания краски в крови через 3 (C3) и 20 (C20) минут после введения (, 1988), антипириновой пробы - объёма распределения (Vd) и клиренса (Clr) (Brodi B. B., 1949, , 1995), адреналиновой пробы определяли индекс Кугельмана (ИК) (, 1979, , 1988). Оценку микроклимата проводили с помощью метиометра МЭС-200, газоанализаторов МН-5122-1 и УГ-2. В опытах по изучению эффективности фармакологических средств использовали препараты Селедант (РФ, ТД Агрофарм, д. в.: 4,4-ди[3(5-метилпиразолил)] селенида), Деполен (РФ, ТД Агрофарм, д. в.: селенат (селенит) бария), Сел-Плекс (США, Alltech Inc, д. в.: селенметионин и селенцистин), Уротропин 40% растовр (РФ, Мосагроген), метилурацил (РФ, Фармакон), Аминотон-АФ (РФ, ТД Агрофарм), 25% раствор витамина Е в масле для инъекций (РФ, Витаминная станция, Краснодар); 1,2 пропиленгликоль (Германия, BASF), кокарбоксилаза (РФ, Фармстандарт), тиамина хлорид (Армения, ЕХФФ), 5% аскорбиновая кислота (РФ, Биохимик), 20% бороглюконат кальция (РФ, Нита-Фарм), 0,1% адреналина гидрохлорид (РФ, Ферейн), 10% кофеин-бензоат натрия (РФ, Мосагроген), кофеин субстанция (Китай, Shandong Xinhua Pharmaceutical Co), Селетон (Украина, Зооветцентр), Гепатон (Украина, Зооветцентр), Кобактан (Голландия, Интервет).

Экономическую эффективность лечебно-профилактических мероприятий рассчитывали согласно методическим рекомендациям по определению экономической эффективности ветеринарных мероприятий утверждённым ГУВ МСХиП РФ 21.02.1997 г.

Математико-статистическую обработку полученных данных проводили с помощью прикладных программ Statistica v6.1 и Microsoft Excel, при расчёте референсного интервала использовали программу Reference Value Advisor. Рассчитывали среднюю арифметическую и её ошибку (M±m), коэффициент вариации (С), критерий χ2, коэффициент корреляции (r), коэффициент детерминации (rd), достоверность разницы (р) по критерию Стъюдента ( 1999; , 2002; Epiney M., 2005).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Унификация лабораторных методов оценки физиологического и патологического состояния крупного рогатого скота

На этапе апробации методов исследования был выявлен ряд методологических проблем, обусловленных биологической особенностью крупного рогатого скота. При определении толерантности плазмы к гепарину традиционным методом ( и др., 1970) внесение гепарина (1,4-5 ЕД) в сочетании с кальцием замедляет свёртывание крови на 11-25 часов, что ограничивает использование метода при обследовании крупного рогатого скота. Выявлена нелинейная зависимость времени свёртывания и содержания гепарина в среде, а так же влияние дозы кальция и гепарина на вариабельность результатов метода. Установлена оптимальная доза гепарина (0,05 ЕД), разработан метод, принцип которого заключается в том, что в стандартных условиях (37оС) проводят сравнительную оценку времени свёртывания тромбоцитарной плазмы при добавлении хлористого кальция и хлористого кальция с гепарином. Одновременное определение времени рекальцификации плазмы (ВР) и её толерантности к гепарину (ТПГ) создаёт возможность более объективной (ситуационной) оценки соотношения (ВР/ТПГ) активности коагулянтов и антикоагулянтов в плазме.

При апробации бромсульфалеиновой пробы выявлено, что после введения бромсульфалеина наблюдаются болевая реакция и нарушения общего состояния (шаткая походка, мышечная дрожь). На основании данных об объёме циркулирующей крови (ОЦК) установили, что нарушение координации и мышечная дрожь возникают при содержании краски в крови 42 мг/л и более. Предложен метод в котором для устранения болевой реакции после краски вводится раствор новокаина, а с целью исключения интоксикации оптимизированы дозы: животным с массой тела до 99 кг, вводить 5% раствора бромсульфалеина в дозе 5 мг/кг, от 100 до 169 кг - 4 мг/кг, 170 кг и более использовать 10% раствор в дозе 3 мг/кг. Оценку результатов пробы проводили по показателям объёма элиминации краски в течение 3 (R3) и 45 (R45) минут, а так же её концентрации через 45 минут (С45).

Разработан метод оценки состояния мембранно-рецепторных комплексов эритроцитов, в основе которого лежит оценка изменения уровня гемолиза после воздействия адреноагониста (адреналин гидрохлорид) и/или антагониста (пропранололом). В качестве гемолитического фактора используется раствор мочевины (0,135 ммоль/л). Получаемые при этом результаты использовали для расчёта коэффициента модификации (КМА).

3.2. Изучение методологических подходов к постановке диагноза

3.2.1. Антенатальная гипотрофия

Установлено, что в первые минуты жизни у телят с лёгкой степенью гипотрофии, ниже, чем у нормотрофиков, показатели креатинина (на 10,8%, р≤0,05), АлАТ и АсАТ (на 25%, р≤0,01), но выше мочевины (на 11,5%, р≤0,05), что указывает на активизацию у них белкового обмена, на фоне недостаточности гомеостатической функции почек. У них выявлена высокая активность биотрансформации галактозы (КГГ 2,0±0,01) и индоциан зелёного (С20=0,35±0,06 мг/л). Повышенный уровень глюкозы (на 8,5%, р≤0,05), триглицеридов (на 50,0%, р≤0,001), ГГТФ (на 27,0%, р≤0,01), ЩФ (на 6,0%, р≤0,05), общих липидов (на 7,2%, р≥0,05) и холестерина (на 12,9%, р≤0,05) указывает на усиление липидного и углеводного обменов, а так же синтеза желчных кислот, но недостаточность механизмов выведения желчи. Усиление тяжести гипотрофии сопровождается снижением глюкозы на 19,9% (р≤0,01), пировиноградной кислоты на 24,0% (р≤0,001), гемоглобина на 30,7% (р≤0,001), общего белка (на 20,8%, р≤0,01), селена на 28,0% (р≤0,01) и индекса Кугельмана (ИК) на 14,2% (р≤0,001), но увеличением общих липидов на 21,7% (р≤0,05), ССМ на 32,0% (р≤0,001) и ССЭ на 25,0% (р≤0,001). У большинства больных вначале наблюдается повышенная активность коагуляционного и фибринолитического звеньев гемостаза (скорости свёртывания крови - 4,1±0,03 мин, ТПГ 175,3±1,05 с и активности фибриназы 120,0±0,08 с), но сравнительно быстро наступает истощение факторов фибринолитической системы и формирование гиперкоагуляционного профиля (обнаруживаются продукты деструкции фибрина (этаноловый тест), фибриноген ≤ 2,2 г/л).

Из числа клинических параметров постоянными при гипотрофии являются гипотермия, гипотония мышц, гипорефлексия, тахикардия, учащённое дыхание, уменьшение дыхательных объёмов, длительное сохранение метаболического ацидоза, дисбаланса фаз дыхания и дефицита экспирации. У телят бурой швицкой, симментальской, лимузинской, голштино-фризской и красно-пёстрой пород гипотрофия констатируется при массе тела ≤ 28,0 кг, чёрно-пёстрой породы ≤27 кг, герефордской и казахской белоголовой пород ≤26,0 кг, абердин-ангусской породы ≤20,0 кг. При усилении тяжести гипотрофии рождаются телята с более выраженным дефицитом массы тела и уменьшением на 8% и более размеров тела (высота в холке, косая длина туловища и др.). По характеру изменения массы и размеров тела различают асинхронную (уменьшение массы тела) и синхронную (уменьшение промеров и массы тела) гипотрофию.

3.2.2. Патология печени антенатального происхождения

После рождения происходит активация функций печени, а в дальнейшем их становление в соответствии с фактическими условиями кормления и содержания. Активация механизмов биотрансформации бромсульфалеина и индоциан зелёного происходит через 24 часа после рождения, антипирина – на 3-4 сутки, а их становление завершается соответственно в течение 30, 10 и 40 суток.

Для периода новорожденности характерен высокий уровень билирубина, однако иктеричность видимых покровов наблюдается сравнительно редко. Выявлено, что у телят с нормальным уровнем развития, в возрасте до 10 суток желтушность появляется при содержании в сыворотке крови общего билирубина более 90-100 мкМ/л, или (и) его конъюгированной фракции более 55-66 мкМ/л, у гипотрофиков соответственно более 70-85 и 47-58 мкМ/л. Установлено, что в слизистой сычуга, двенадцатипёрстной и ободочной кишок плодов-новорожденных содержатся вещества, способствующие биотрансформации билирубина, что указывает на их важную роль в биотрансформации пигмента и снижении выраженности физиологической гипербилирубинемии.

Ранее выявленные нами особенности этиологии и патогенеза патологии печени у новорожденных телят позволили выделить самостоятельную нозологическую единицу - неонатальная гепатодистрофия (, 1992). Исследования, проведённые в рамках настоящей работы, позволили расширить и уточнить многие позиции патогенеза этой болезни и расширить спектр тестов её диагностики. Выявлено, что основными вариантами проявления поражения печени у плода являются ранняя активизация её функций и неонатальная гепатодистрофия. Первая возникает при наличии функциональной недостаточности печени у коровы-матери и соответствующей необходимости ускорения органогенеза у плода для частичной компенсации ослабленных функций у матери. При этом у новорожденных, в сравнении с приплодом от здоровых коров, в первые 1-2 часа после рождения, выше активность биотрансформации антипирина на 21,1% (Сlr=2,5±0,022 мл/мин; р≤0,001), 9,6% индоциан зелёного (С20=0,18±0,007 мг/л; р≤0,05) и на 11,1% билирубина (коэф. конъюгации 25,0±0,79%, р≤0,01). В первые сутки жизни основными клинико-биохимическими синдромами неонатальной гепатодистрофии являются холестаз и цитолиз, в дальнейшем появляются синдромы шунтирования, мезинхимально-воспалительный и малой печёночно-клеточной недостаточности. У здоровых телят в первые часы жизни (до кормления), имеет место физиологический холестаз, что является особенностью новорожденных. Но при гепатодистрофии данный синдром более выражен: содержание в крови билирубина общего ≥8,2 мкМ/л, свободного ≥6,2 мкМ/л и связанного ≥2,0 мкМ/л. Помимо этого в кале (меконий) обнаруживается стеркобилин, в крови повышается уровень ЩФ (≥1600,0 нМ/с*л), холестерина (≥2,5 мМ/л) и меди (≥15,0мкМ/л), но снижается коэффициент Де Ритиса (≤1,0). На наличие цитолиза в течение 1-2 часов после рождения указывает увеличение активности АсАТ≥350,0 нМ/с*л, СДГ≥45 нМ/с*л, ГлДГ≥120,0 нМ/с*л и уровня коэффициента Де Ритиса ≥2,0. Выраженность данного синдрома имеет тесную корреляцию с содержанием селена (сыворотка крови, r=-0,90) и ВЭГ (плазма, r=0,69). Синдром печёночно-клеточной недостаточности проявляется показателями нарушений отдельных функций, а при уменьшении функционирующей массы паренхимы основными тестами являются нагрузочные пробы (бромсульфалеиновая, вофавердиновая, антипириновая и др.).

3.2.3. Антенатальная гипоксия плода

Установлено, что за 30 дней до рождения частота сердечных сокращений плодов составляет 115-160 уд/мин. При лёгкой и средней степени кислородной недостаточности пульс увеличивается до 180 уд/мин и выше, а при тяжёлой гипоксии снижается до 100 уд/мин и ниже. У здоровых коров (нетелей) интервал рН венозной крови составил 7,35-7,38; рО2 4,7-5,6 кПа, рСО2 5,1-6,7 кПа, BТ от -0,5 до +3,5 ммоль/л, содержание глюкозы 2,5-3,9 ммоль/л, пировиноградной кислоты 80-200 мкмоль/л, молочной кислоты 0,6-2,0 ммоль/л, гемоглобина 90-140 г/л, мочевины 3,3-6,7 ммоль/л и ССМ 0,1-0,32 усл. ед. На высокую вероятность гипоксии у плода лёгкой степени указывает наличие у матери компенсированного ацидоза (рН≥7,35), средней степени – субкомпенсированого ацидоза (рН 7,25-7,34) или умеренной анемии (гемоглобин 70-90 г/л). На тяжелую гипоксию плода указывает наличие у матери декомпенсированного ацидоза (рН<7,25) или выраженной анемии (гемоглобин <70 г/л).

В начале второго периода родов (период изгнания) при антенатальной гипоксии рН крови плода ≤7,17, рО2≤3,9 кПа, BD≥13,7 ммоль/л и рСО2 ≥5,0 кПа. С усилением дефицита кислорода возрастает выраженность гипоксии и метаболического ацидоза, но диапазон рСО2 при этом расширяется и по этой причине в случаях тяжёлой гипоксии данный показатель снижает свою информативность. В конце периода изгнания усиливаются гипоксия (рО2 3,2±0,02 кПа) и ацидоз (рН 7,12±0,003) как за счёт метаболической (BD 14,0±0,53 ммоль/л), так и респираторной (рСО2 5,9±0,08 кПа) составной. С усилением тяжести гипоксии появляется и прогрессирует эндогенная интоксикация. В 79,9% случаев антенатальной гипоксии развивается асфиксия во время рождения.

3.2.4. Асфиксия новорожденных интранатальная (асфиксия новорожденных первичная)

С целью уточнения патогенеза первичной асфиксии новорожденных, проведено экспериментальное воспроизведение интранатального апноэ. Новорожденным (n=8), полученным от клинически здоровых коров, сразу после рождения до первого вдоха специальной маской закрывали носовые ходы и рот, исключая возможность начала лёгочного дыхания. Отбор проб крови для лабораторного исследования проводили сразу после выведения плода до попытки первого вдоха, а также через 1, 2, 3, 4 и 5 минут после неё. Частота пульса в начале опыта была равна 116,0±4,20 уд/мин. В течение 1, 2, 3, 4 и 5 минут апноэ величина изучаемого показателя составила соответственно 148,0±6,50; 188,0±10,50; 152,5±6,50; 120,0±5,00 и 100,0±8,50 уд/мин. Следовательно, в течение второй минуты апноэ возникает тахикардия, а в конце третьей сменяется брадикардией.

С увеличением длительности первичного апноэ наблюдается нарастание гипоксемии и респираторно-метаболического ацидоза. Состояние буферных систем организма характеризуется активизацией их деятельности в течение первой минуты апноэ и снижением ёмкости этих систем при более длительной респираторной паузе. Наиболее выраженные изменения КОС и оксигенации крови наблюдаются в течение второй и четвёртой минуты апноэ. В начале опыта у новорожденных имела место физиологически обусловленная гипоксемия, в течение эксперимента степень её выраженности усиливалась. Однако, при достижении парциального давления кислорода 2,80 - 2,95 кПа наблюдается замедление динамики развития гипоксии.

Таким образом, степень изменения параметров КОС и газового состава крови зависит от длительности периода между попыткой первого вдоха и началом лёгочного дыхания. На основании результатов эксперимента разработали дифференциальную таблицу оценки тяжести интранатальной асфиксии (табл.1).

Таблица 1

Показатели новорожденных, перенёсших интранатальную асфиксию

Показатель	Степень тяжести асфиксия
Лёгкая	Средняя	Тяжёлая	терминальная
ЧСС	140-200 130-180	120-180 115-160	100-120 100-120	< 100 ≤100
рН	7,12-7,15 7,17-7,22	7,05-7,11 7,10-7,16	< 7,05 < 7,10	< 6,9 < 7,0
рО2, кПа	3,3–3,6 6,0-6,5	3,1-2,8 4,0-5,5	< 2,8 < 4,0	< 2,1 < 4,0
рСО2, кПа	5,3–6,0 5,2-5,9	6,1-6,5 6,0-6,4	> 6,5 > 6,4	> 6,5 > 6,5
ВD, мМ /л	13,5-14,5 10,0-13,5	14,6-17,0 14,0-16,3	> 17,0 >16,5	>20,0 >18,0

Примечание. В числителе даны показатели через 15 минут, в знаменателе через 3 часа после рождения.