Теоретическое обоснование и практическое использование ДНК – генотипирования в селекции свиней (стр. 4 )

Естественная резистентность молодняка 1/4КБ+1/4Л+1/2Д различных генотипов по гену RYR-1.

Показатели	Генотип по гену RYR-1 в разные периоды развития, мес. (1- группа)
1 мес.	3мес.	4 мес.	5 мес.	6 мес
NN	Nn	NN	Nn	NN	Nn	NN	Nn	NN	Nn
Количество лейкоцитов, 109/л	13,10± 0,98	12,64± 1,68	12,86± 1,12	11,81± 0,98	11,16± 1,06	12,38± 0,64	12,66± 1,06	13,08± 0,96	12,10± 1,06	11,74± 0,96
Фагоцитарная активность нейтрофилов,%	29,17± 0,46	27,81± 1,34	27,17± 0,56	26,18± 1,00	29,33± 0,49	27,85± 0,84	33,00± 1,14	32,20± 0,66	33,88± 0,54	32,16± 0,60
Опсоно-фагоцитарный индекс, МТ/лейкоцит	0,40± 0,12	0,31± 0,16	0,53± 0,24	0,55± 0,30	0,59± 0,18	0,55± 0,20	0,74± 0,09	0,70± 0,14	0,81± 0,15	0,74±0, 18
Число Райта	1,38± 0,08	1,11± 0,11	1,95± 0,08	2,10± 0,09	2,00± 0,08	1,97± 0,12	2,24± 0,08	2,16± 0,14	2,38± 0,06	2,30± 0,11
Фагоцитарная емкость крови,109 МТ/л	5,27± 0,74	3,90± 0,44	6,81± 0,40	6,50± 0,14	6,54± 0,36	6,80± 0,34	9,35± 1,04	9,10± 0,64	9,76± 0,32	8,68± 0,44
БАСК, %	45,43± 1,65	44,82± 2,06	48,25± 1,64	45,92± 1,54	58,79± 1,93	57,86± 1,74	59,29± 1,42	54,62± 1,64	52,87± 1,34	52,46± 1,86
ЛАСК, %	30,65± 1,26	32,14± 2,06	41,46± 1,01	38,27± 1,65	41,36± 1,71	40,21± 1,16	43,48± 1,86	40,36± 1,14	43,11± 1,54	42,18± 1,34
Индекс резистентности, балл	73,67	72,18	73,33	72,80	81,67	80,16	80,06	78,92	87,67	85,46

К 6- мес. возрасту как у гомозиготных NN, так и у гетерозиготных Nn - животных всех групп полностью сформировался статус неспецифической защиты организма, как клеточные, так и гуморальные факторы в этот период находят свою фенотипическую реализацию. В 6- мес. возрасте произошла окончательная дифференциация животных от различных вариантов межпородного скрещивания по признакам неспецифической резистентности.

За период выращивания молодняка с 1- до 6- мес. средний индекс резистентности составил у гомозиготных поросят (КБ × Л) ×Д - 79,8 балла, а КБ × Л - 84,5 балла, гетерозиготных 77,86 и 82,39 бала соответственно.

Таким образом, более высокорезистентными были гомозиготные (NN) поросята 1/2КБ + 1/2Л, а относительно низкорезистентными - гетерозиготные (Nn) 1/4 КБ + 1/4 Л+ 1/2 Д.

3.5. Мясная продуктивность свиней различных генотипов по гену RYR-1

Подсвинки с генотипом NN достигали живой массы 120кг на 8 дней раньше, аналогов генотипов Nn. Длина полутуши и беконной половинки, толщина шпика над остистыми отростками 6-7 грудных позвонков были больше у гомозиготных подсвинков и составили 98,4; 84,94; 28,0, что на 1,6 см (Р>0,95), 1,9 см (Р >0,95) и 2мм по сравнению с гетерозиготными. Масса задней трети полутуши и площадь «мышечного глазка» были больше у туш гетерозиготных (Nn) подсвинков на 9,4 (Р>0,95) и 7,7 %.

Степень выраженности характерных признаков пороков PSE и DFD у свиней отечественных пород и типов менее высокая, нежели у зарубежных супермясных. Наибольшая частота встречаемости PSE - и DFD - свинины зарегистрирована у ДМ-1 (21,43%), помесей 1/2СТ СМ-1+1/2Л (20,0%) и 1/2КБ + 1/2Л (20,45%). Установлено, что потомство свиней с генотипом NN является стрессустойчивым, а чувствительность потомства, полученного от скрытого носителя Nn, зависит от генотипа второго родителя.

При рассмотрении физико-химических свойств и химического состава NOR - мяса NN- помесей по сравнению с РSE - у Nn - животных, установлено, что рН, влагоудерживающая способность, окраска мяса, содержание органического вещества были у них выше на 0,44 (Р>0,95), 4,64% (Р>0,99), 2,91 ед. экст.×103 (Р>0,95), 0,37%, а, содержание триптофана и белково-качественный показатель ниже на 0,30 ммоль/г (Р>0,95) и 0,29 соответственно. Резкое снижение рН при высокой температуре приводит к частичной денатурации белков саркоплазмы, что, по видимому, предопределяет бледный цвет PSE- мяса. У гетерозиготных (Nn) стрессчувствительных животных с пороками DFD – мяса рН, влагоудерживающая способность, интенсивность окраски были выше на 0,55 (Р>0,95), 4,05% (Р>0,99)и 4,97ед. экст. × 103 (Р>0,99) соответственно, а БКП был на 1,12 ниже, чем у NOR - мяса гомозиготных (NN) стрессустойчивых подсвинков.

Для DFD - мяса резкое снижение рН отмечено в первые 24 часа. Для NOR - свинины ежедневное уменьшение уровня рН мяса была доста­точно равномерным и составляло 0,07 - 0,13. Более низкими значениями ВУС в послеубойный период характеризовалось мясо с дефектом РSE: через 45 мин, 1, 2 сутки после убоя - на 12,3 (Р>0,95), 13,3 (Р>0,95), 11,2 (Р>0,95), ниже, чем у NOR-свинины. В свою очередь, свинина с дефектом DFD отличалась повышенными значениями водоудерживающей способности по сравнению с нормальным мясом на 8,6 (Р>0,95), 5,0 (Р>0,95), 7,4% (Р>0,95), через 45 мин., 1, 2 сутки.

Дефект РSЕ существенно снижает и цвет мяса. Интенсивность окраски мышечной ткани с пороком РSЕ через 45 мин., 24 и 48 часов была ниже, чем у нормальной свинины соответственно на 11,5 (Р>0,99), 8,7 (Р>0,99) и 6,4 ед. экст. .×103 (Р>0,99). В свою очередь, DFD - свинина превосходила нормальное мясо по цвету в соответствующие периоды на 13,7 (Р>0,99), 9,5 (Р>0,99) и 7,4 ед. экст. ×103 (Р>0,99).

В целом, по всем группам наиболее яркая мышечная ткань наблюда­лась по всем категориям в стадии парного мяса (через 1 час после убоя). Для NOR - мяса среднесуточное снижение окраски составляло 6,8 ед. экст. ×103, для РSЕ - 4,0 - 4,4 ед. экст. ×103, DFD - - 8,9 - 11,0 ед. экст. ×103.

У гомозиготных и гетерозиготных стрессустойчивых подсвинков интенсивность окраски отличалась незначительно. У гетерозиготных (Nn) животных содержание влаги, белка и аминного азота было выше на 3,29 (Р>0,99), 0,5% и 0,32 мг%, чем у гомозиготных (NN).

Минимальным содержанием «сырого» жира в мышечной ткани характеризовались гетерозиготные Nn- животные, уступавшие по этому показателю свиньям NN - генотипа на 0,33%. По содержанию сырого протеина в мясе подсвинки Nn - генотипа превосходили гомозиготных (NN) животных на 0,14%, что указывает на более выраженное мясное направление продуктивности. БКП у подсвинков с NN - генотипом был выше, то есть биологическая ценность мяса у них несколько превышает таковую у гетерозиготного (Nn) молодняка. БКП варьировал от 8,11 у гомозиготных (NN) до 8,24 у гетерозиготных (Nn) подсвинков. Таким образом, мутация в гене RYR-1 у гетерозиготных животных оказывает значительное влияние на их организм. Степень этого влияния определяется условиями внешней среды, в которые попадает особь. Выявленная тенденция снижения откормочной и мясной продуктивности животных – носителей мутантного аллеля гена RYR-1 свидетельствует о необходимости проведения генетического тестирования.

3.6. Взаимосвязь уровня и качества мясной продуктивности

у свиней разных генотипов по гену RYR-1

Выявлено большое количество корреляционных связей качества мясной продуктивности свиней с их интерьерными показателями. Выявленные корреляции варьировали от 0,215 до 0,888. Наиболее значимые оказались:

масса туши у гомозиготных (NN) по гену RYR-1 подсвинков 1/2СМ-1+1/2Л коррелирует с длиной беконной половинки (r =0,687***), длиной полутуши (r =0,551***), массой окорока (r =0,384**); длина полутуши коррелирует с массой задней трети полутуши (r = 0,524***), толщиной шпика (r = 0,348**), площадью «мышечного глазка» (r =0,511***), количеством лейкоцитов (r =-0,314**); масса задней трети полутуши у коррелирует с толщиной шпика (r = 0,475***), площадью «мышечного глазка» (r =0,344**), массой туши (r = 0,386**); рН мышечной ткани коррелирует с активностью АСТ (r =0,312**).

У гетерозиготных подсвинков 1/2СМ-1+1/2Л масса туши коррелирует с с влагоудерживающей способностью (r =0,490***), интенсивностью окраски (r =0,392**), белком мышечной ткани (r =0,409***), с содержанием молочной кислоты (r =0,414**), γ – глобулинов (r = 0,373***), концентрацией иммуноглобулинов (r = 0,324**), креатинином (r = - 0,316**), глюкозой (r = - 0,567***), ФА (r =- 0,367***), фагоцитарным индексом (r = - 0,351**), фагоцитарной емкостью крови (r = - 0,384***), чего не наблюдалось у гомозиготных подсвинков. Длина полутуши коррелирует не только с массой задней трети полутуши (r = 0,888***), площадью «мышечного глазка» (r =0,333**), но и с β - глобулинов (r = 0,301**), содержанием влаги (r = 0,392**), количеством молочной кислотой (r = - 0,408***), фагоцитарной емкостью крови (r = -0,312**); масса задней трети полутуши коррелирует с толщиной шпика (r = 0,404**), площадью « мышечного глазка» (r = 0,585***), содержанием альбуминов (r = 0,316**), содержанием влаги (r = 0,393**), содержанием молочной кислоты (r = -0,391***), БАСК (r = -0,631***); рН мышечной ткани коррелирует с влагосвязывающей способностью мышечной ткани (r = 0,451***), интенсивностью окраски мышечной ткани (r =0,439***), уровнем АКТГ (r = 0,611***), количеством лейкоцитов (r = 0,392***), ФА (r = 0,398***), фагоцитарным индексом (r = 0,328**), содержанием общего белка (r = -0,430***), β , γ глобулинов ( r = -0,331**) и ( r = -0,392**) соответственно, активностью АЛТ ( r = -0,340**); влагосвязывающая способность мышечной ткани коррелирует с содержанием влаги (r = 0,446***), количеством дней откорма (r = 0,519***), массой туши (r = 0,490***), альбуминов (r = 0,329**), уровнем мочевины ( r = 0,417***), уровнем глюкозы ( r = -0,459***), кортизола ( r = -0,350**); интенсивность окраски мышечной ткани коррелирует с количеством жира (r = 0,531***), активностью АСТ ( r = 0,423***), уровнем АКТГ ( r = 0,315**), фагоцитарной емкостью крови (r = 0,449***), БАСК (r = 0,320; содержание влаги коррелирует с количеством белка (r = 0,446***), днями достижения 120кг (r = 0,393**), длиной беконной половинки (r = 0,591***), длиной полутуши (r = 0,304**), массой задней трети полутуши (r = 0,348***), активностью АСТ (r = 0,630***) содержанием общего белка (r = -0,351**), α-, β- глобулинов ( r = -0,543***; r = -0,343**).

Длина беконной половинки как гомозиготных, так и гетерозиготных подсвинков 1/2СТ СМ-1+1/2Л имела прямую взаимосвязь с длиной полутуши (r = 0,653*** и r =0,748***); массой задней трети полутуши (r = 0,548*** и r = 0,677***); толщиной шпика (r = 0,280** и r = 0,489***); ФА (r = -0,331*** и r = -0,439***).

Содержание белка в мышечной ткани гомозиготных NN подсвинков по гену RYR-1 не имеет прямой корреляции с мясной продуктивностью, качеством мяса и интерьерными показателями крови. Чего нельзя сказать о гетерозиготных Nn - подсвинков содержание белка в мышечной ткани коррелирует с содержанием общего белка сыворотки крови (r = 0,339**), количеством креатинина (r = 0,365**), глюкозы ( r = 0,513***), ФА ( r = 0,320**), уровнем кортизола (r = 0,325**), содержанием мочевины (r = -0,485***), активностью АЛТ ( r = -0,310**), ЛАСК (r = -0,332**).

3.7. Гистостроение мышечной ткани свиней различных генотипов

Анализ показал ( рис. 4- 8), что минимальным содержанием мышечной ткани среди Л отличались подсвинки генотипа Nn, а максимальным - генотипа NN; а среди СТ СМ-1 - генотипа NN. Подсвинки КБ и СТ СМ-1×ДМ-1 занимали промежуточное положение. По этому показателю стрессустойчивые свиньи Л NN - генотипа превосходили на 2,9% подсвинков Л генотипа Nn. Гомозиготные (NN) свиньи СТ СМ-1, СМ-1×ДМ-1, КБ уступали по содержанию мышечной ткани на 2,6, (Р>0,95) 2,2 (Р>0,95) и 1,9% соответственно, свиньям Л NN - генотипа.

Рис.4. Поперечный срез длиннейшей мышцы спины свиней Л генотипа NN (микрофотография, × 9)	Рис.5. Поперечный срез длиннейшей мышцы спины свиней Л генотипа Nn (микрофотография, × 9)
Рис.6. Поперечный срез длиннейшей мышцы спины свиней СТ СМ-1×ДМ-1 генотипа NN (микрофотография, × 9)	Рис.7. Поперечный срез длиннейшей мышцы спины свиней СТ СМ-1 генотипа NN (микрофотография, × 9)
Рис.8. Поперечный срез длиннейшей мышцы спины свиней КБ генотипа NN (микрофотография, × 9)

Содержание соединительной ткани в мышечном волокне у гетерозиготных подсвинков Л было больше на 1,09% чем у гомозиготных аналогов. Самое высокое содержание соединительной ткани было у гомозиготных (NN) стрессустойчивых подсвинков СТ СМ-1×ДМ-1, КБ и составило 11,11 и 11,41%, а самое низкое - у стрессустойчивых гомозиготных подсвинков Л - 8,98%, что соответственно на 2,13 (Р>0,99) и 2,43% (Р>0,99) ниже, чем у СТ СМ-1×ДМ-1, КБ. Межпучкового жира было также больше у гетерозиготных Nn - подсвинков Л, превышавших гомозиготных (NN) животных Л, СТ СМ-1, СТ СМ-1×ДМ-1 и КБ соответственно на 0,82, 0,87, 1,15 и 1,21% (Р>0,95). Самое низкое количество внутрипучкового жира было у гомозиготных подсвинков Л и КБ - 3,50 и 3,40%, самое высокое - у гетерозиготных подсвинков Л - 4,50%.